玉米幼芽提取物抗心肌缺血作用研究

论文摘要

为了探讨玉米幼芽提取物（Extract of Maize Plumule,EMP）对心肌缺血的保护作用,本文通过腹腔注射异丙肾上腺素（Iso）致家兔心肌缺血,静脉注射垂体后叶素（Pit）致家兔心肌缺血以及Iso诱发体外培养的心肌细胞缺血损伤三种实验模型观察了EMP的抗心肌缺血作用,实验结果如下:1 EMP减轻Iso诱发的家兔心肌缺血损伤预先给家兔灌胃不同剂量（20mg?kg-1、40mg?kg-1、80mg?kg-1）的EMP,连续2周后,腹腔注射大剂量Iso（10mg?kg-1,上、下午各一次）诱发家兔心肌缺血。结果显示, EMP（40mg?kg-1、80mg?kg-1）可减轻Iso引起的家兔心率加快、J点升高程度,改善心肌组织损伤;显著或极显著降低血清中的AST、LDH、CK活性（P<0.01或P<0.05）;显著或极显著提高血清中NO含量（P<0.01或P<0.05）、心肌组织和血清中SOD和GSH-pX活性（P<0.01或P<0.05）,显著或极显著降低心肌组织和血清中MDA含量（P<0.01或P<0.05）。2 EMP减轻Pit诱发的家兔心肌缺血损伤预先给家兔灌胃不同剂量（20mg?kg-1、40mg?kg-1、80mg?kg-1）的EMP,连续2周后,耳缘静脉注射Pit （2.0 U?kg-1,用生理盐水稀释为3ml,20s匀速注射）,诱发家兔心肌缺血。结果显示,EMP（40mg?kg-1、80mg?kg-1）可抑制Pit所致家兔心率减缓、S-T段抬高、T波高耸;显著或极显著降低血清中的AST、LDH、CK活性（P<0.01或P<0.05）;显著或极显著提高心肌组织中SOD和GSH-pX活性（P<0.01或P<0.05）,显著或极显著降低MDA含量（P<0.01或P<0.05）。3 EMP减轻Iso诱发的体外培养新生大鼠心肌细胞缺血损伤体外培养乳鼠心肌细胞,加入Iso模拟心肌缺血状态30min后,加入不同浓度的EMP（10mg?L-1、20mg?L-1、40mg?L-1）。结果显示,EMP （40mg?L-1）可改善缺血状态下的心肌细胞形态,提高细胞存活率和细胞密度;显著或极显著降低细胞培养液中AST、LDH、CK活性（P<0.01或P<0.05）;极显著提高SOD和GSH-pX活性（P<0.01）,显著降低MDA含量（P<0.05）;促进BCl-2表达,抑制NF-κB表达。综合上述实验结果,EMP对心肌缺血损伤有保护作用。其机制有可能与EMP能清除自由基,抑制脂质过氧化,维持心肌细胞膜的完整性;提高NO含量,减轻心肌缺血时血管内皮细胞的损伤及抑制心肌细胞凋亡有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 1.1 心肌缺血损伤机制
• 1.1.1 自由基损伤机制
• 1.1.2 细胞凋亡损伤机制
• 1.1.2.1 心肌缺血引起细胞凋亡的机制
• 1.1.2.2 心肌细胞凋亡的调控因素
• 1.2 抗心肌缺血实验研究模型
• 1.2.1 药物性心肌缺血模型
• 1.2.2 实验性心急梗塞模型
• 1.2.3 离体心脏灌流模型
• 1.2.4 体外培养心肌细胞实验模型
• 1.3 心肌缺血的药物治疗
• 1.4 嘌呤类物质药用作用研究进展
• 第二章 玉米幼芽提取物对异丙肾上腺素所致家兔心肌缺血的保护作用
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 药品与试剂
• 2.1.3 仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 分组与处理
• 2.2.2 家兔心肌缺血模型的制备
• 2.2.3 家兔II 导联心电图的检测
• 2.2.4 待测样品采集
• 2.2.5 SOD、GSH-pX 活性和MDA 含量的测定
• 2.2.5.1 总蛋白的测定
• 2.2.5.2 SOD 活性的测定
• 2.2.5.3 GSH-pX 活性的测定
• 2.2.5.4 MDA 含量的测定
• 2.2.6 AST 活性检测
• 2.2.7 CK 活性检测
• 2.2.8 LDH 活性测定
• 2.2.9 NO 含量的测定
• 2.2.10 心肌组织形态检测
• 2.2.10.1 HE 染色
• 2.2.10.2 透射电镜检测
• 2.2.11 统计学分析
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 EMP 对家兔心电图的影响
• 2.3.1.1 EMP 对心肌缺血家兔心电图心率的影响
• 2.3.1.2 EMP 对心肌缺血家兔心电图J 点的影响
• 2.3.2 EMP 对血清中AST、LDH、CK 活性的影响
• 2.3.3 EMP 对心肌缺血家兔血清中NO 含量的影响
• 2.3.4 EMP 对家兔心肌缺血后心肌组织匀浆中SOD、GSH-pX 活性和MDA 含量的影响
• 2.3.5 EMP 对家兔心肌缺血后血清中SOD、GSH-pX 活性和MDA 含量的影响
• 2.3.6 EMP 对家兔心肌缺血后心肌组织病理学的影响
• 2.3.7 EMP 对家兔心肌缺血后心肌组织超微结构的影响
• 2.4 讨论
• 2.4.1 EMP 对心肌缺血家兔心电图的影响
• 2.4.2 EMP 对心肌缺血家兔心肌组织结构的影响
• 2.4.3 EMP 对心肌缺血家兔心肌酶的影响
• 2.4.4 EMP 对心肌缺血家兔血清中NO 的影响
• 2.4.5 EMP 对心肌缺血家兔心肌组织和血清中SOD、GSH-pX 活性和MDA 含量的影响
• 第三章 玉米幼芽提取物对垂体后叶素所致家兔心肌缺血的保护作用
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 实验动物
• 3.1.2 药品与试剂
• 3.1.3 仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 分组与处理
• 3.2.2 Pit 诱发心肌缺血模型
• 3.2.3 家兔II 导联心电图的检测
• 3.2.4 待测样品采集
• 3.2.5 血清中AST、LDH、CK 的检测
• 3.2.6 SOD、GSH-pX 活性和MDA 含量的测定
• 3.2.6.1 总蛋白的测定
• 3.2.6.2 SOD 活性的测定
• 3.2.6.3 GSH-pX 活性的测定
• 3.2.6.4 MDA 含量的测定
• 3.2.7 统计学分析
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 EMP 对家兔II 导联心电图影响
• 3.3.1.1 EMP 对家兔II 导联心电图心率的影响
• 3.3.1.2 EMP 对家兔II 导联心电图S-T 段位移的影响
• 3.3.1.3 EMP 对家兔II 导联心电图T 波波幅的影响
• 3.3.2 EMP 对家兔血清中AST、LDH、CK 的影响
• 3.3.3 EMP 对家兔心肌组织匀浆中GSH-pX、SOD 和MDA 的影响
• 3.4 讨论
• 3.4.1 EMP 对心肌缺血家兔心电图的影响
• 3.4.2 EMP 对家兔血清中AST、LDH、CK 的影响
• 3.4.3 EMP 对家兔心肌匀浆中SOD、GSH-pX 和MDA 的影响
• 第四章 玉米幼芽提取物对新生大鼠心肌细胞缺血损伤的保护作用
• 4.1 实验材料
• 4.2 药品与试剂
• 4.3 实验器材
• 4.4 实验方法
• 4.4.1 新生大鼠心肌细胞体外培养
• 4.4.2 分组与处理
• 4.4.3 细胞密度的检测
• 4.4.4 细胞存活率的检测
• 4.4.5 SOD、GSH-pX 活性和MDA 含量的测定
• 4.4.6 心肌酶的测定
• 4.4.7 心肌细胞内BCl-2 和NF-κB 免疫细胞化学检测
• 4.5 结果与分析
• 4.5.1 新生大鼠心肌细胞体外培养
• 4.5.1.1 体外培养大鼠心肌细胞的基本形态
• 4.5.1.2 EMP 对缺血心肌细胞形态变化的影响
• 4.5.2 EMP 对心肌细胞密度及存活率的影响
• 4.5.3 EMP 对细胞培养液中心肌酶（CK,AST,LDH）活性的影响
• 4.5.4 EMP 对细胞培养液中SOD、GSH-pX 活性和MDA 含量的影响
• 4.5.5 EMP 对心肌细胞BCl-2 和NF-κB 蛋白表达的影响
• 4.6 讨论
• 4.6.1 EMP 对缺血心肌细胞形态变化、心肌细胞密度及存活率的影响
• 4.6.2 EMP 对细胞培养液中心肌酶（CK,LDH,AST）活性的影响
• 4.6.3 EMP 对细胞培养液中SOD、GSH-pX 活性和MDA 含量的影响
• 4.6.4 EMP 对心肌细胞中BCl-2 和NF-κB 蛋白表达的影响
• 全文小结
• 参考文献
• 作者简介