论文摘要
利用生物工程技术研究木质素生物合成与代谢机制,培育低木质素含量的树种,有望从源头解决造纸工业的污染问题。本研究首先克隆了木质素生物合成关键酶基因4-香豆酸辅酶A连接酶（4CL）和咖啡酰辅酶A甲基转移酶（CCoAOMT）,利用反义RNA和基因重组技术,将含有GUS（β-葡糖醛酸糖苷酶）报告基因的植物表达载体pBI121载体改造成为分别含有反义4CL和反义CCoAOMT基因的反义表达载体。同时,克隆了木质部形成层定位的组织特异性启动子GRP1.8启动子,代替组成型CaMV35S启动子,进一步优化了反义表达载体。通过农杆菌EHA105介导,转化造纸资源植物紫穗槐茎,经过诱导和卡那霉素抗性筛选,获得抗性幼苗,经PCR法扩增检测,初步获得了分别含有两种反义基因及其连接GRP1.8启动子的转基因植株。为研究启动子与转基因植物的正常生长及安全应用的相关性,最终培育出低木质素含量、更适于造纸工业的优质树种提供了实验数据。
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