油茶籽脱壳冷榨浸出粕提取茶籽多糖的研究

论文摘要

油茶系山茶科山茶属植物,是一种我国特有的木本油料作物。主要分布在南方的湖南、江西等16个省（区）1100多个县市,全国油茶林面积约400hm2,占木本油料植物种植面积的80%以上。油茶果实是制取茶油的坚果,有很高的经济价值及食用价值。我国年产油茶籽100余万吨,茶籽粕综合利用的研究由来已久。随着新技术的迅速发展,多糖的价值逐渐被人们重视。充分利用我国油茶籽饼粕资源,深入研究油茶籽多糖,加快理论成果转化,实现资源向产业化,对推动经济可持续发展具有重要的意义。本文以油茶籽脱壳冷榨浸出粕为研究对象,研究了甲醇浸提法,分别设计了单因素试验和正交实验对反应条件进行优化,确定甲醇浸提法的最佳工艺,得到了茶籽粗多糖;对制得的茶籽多糖溶液脱蛋白和脱色,得到纯化的茶籽多糖,并对其抗氧化活性进行了研究。本论文主要结论如下:（1）确定了苯酚-硫酸比色法的显色反应优化条件:反应温度100℃,反应时间20min,测定波长490nm。由本方法测定所得平均加样收率为97.96%,相对标准偏差（RSD）为2.73%。此方法结果准确、重复性好、灵敏度高,可以作为实验室测定油茶籽多糖含量的分析方法。（2）本论文采用甲醇浸提法提取油茶籽多糖,优化了提取工艺条件。在多糖提取的工艺研究中,以甲醇-水溶液为浸提溶液,通过研究甲醇料液比、溶剂浓度、浸提温度和浸提时间四个影响因素,结合单因素试验和正交试验,确定最佳提取工艺条件为:料液比1:10（W/V）;溶剂浓度80%;浸提温度60℃;浸提时间3h。此时油茶籽粗多糖的提取率为3.92%。（3）分别采用Sevage法、TCA（三氯乙酸）法、HCl法对油茶籽多糖溶液脱蛋白,对油茶籽粗多糖的脱蛋白效果进行了研究。其中Sevage法多糖损失率为37.3%、蛋白去除率为83.7%;TCA法多糖损失率为18.9%、蛋白去除率为74.3%;而HCl法多糖损失率为16.6%,去除率为52.1%;最终选择TCA法为本研究油茶籽多糖脱蛋白的主要方法。（4）采用活性炭、过氧化氢和壳聚糖对油茶籽多糖的脱色效果进行了试验,综合比较选择活性炭为油茶籽多糖脱色剂,并进行了单因素实验,得出在PH值为6.0,活性炭添加量2%,反应时间50min,温度60℃时多糖脱色率达到68.5%,多糖保留率达到78.3%。（5）对油茶籽多糖进行了抗氧化能力测定,证实了油茶籽多糖对·OH和O2-·均具有清除作用,而且与多糖的浓度成正相关性。使用邻苯三酚法测定,当多糖浓度达2%时,·OH的清除率达到83.7%;Fenton氧化法测得,当多糖浓度为1%时,对O2-·清除率达到49.1%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 绪论
• 1.1 油茶籽粕特性及开发利用现状
• 1.1.1 油茶籽粕的特性及应用
• 1.1.2 多糖的组成
• 1.2 植物多糖的国内外研究进展
• 1.2.1 植物多糖的制备工艺研究
• 1.2.2 油茶多糖的功能性研究
• 1.2.3 油茶多糖的纯化研究
• 1.2.4 油茶多糖的抗氧化研究
• 1.2.5 油茶多糖的开发应用前景
• 1.3 课题研究的目的和意义
• 1.4 本论文主要研究内容
• 第2章 苯酚硫酸法测定多糖含量的研究
• 2.1 试验材料与方法
• 2.1.1 原料与主要试剂
• 2.1.2 实验仪器与设备
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 油茶籽多糖标准溶液的配制
• 2.2.2 葡萄糖标准溶液的配制
• 2.2.3 葡萄糖标准曲线的绘制
• 2.2.4 换算因子
• 2.2.5 测定方法
• 2.2.6 样品中多糖含量的测定
• 2.2.7 显色条件的优化研究
• 2.2.8 精密度试验
• 2.2.9 稳定性试验
• 2.2.10 加样回收率试验
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 显色条件的优化研究
• 2.3.2 精密度试验
• 2.3.3 稳定性试验
• 2.3.4 加样回收率试验
• 2.4 本章小结
• 第3章 油茶籽多糖提取工艺的研究
• 3.1 试验材料与方法
• 3.1.1 原料与主要试剂
• 3.1.2 实验仪器与设备
• 3.1.3 测定方法
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 油茶籽粗多糖的提取工艺研究
• 3.2.2 多糖提取的单因素实验
• 3.2.3 正交实验
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 油茶籽中各成分含量
• 3.3.2 多糖提取的单因素试验结果
• 3.3.3 正交实验结果
• 3.4 本章小结
• 第4章 油茶籽多糖的纯化工艺研究
• 4.1 试验材料与方法
• 4.1.1 原料与主要试剂
• 4.1.2 实验仪器与设备
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 多糖中蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝法）
• 4.2.2 不同方法对粗多糖脱蛋白效果的影响
• 4.2.3 油茶籽多糖脱色研究
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 不同方法对多糖脱蛋白效果的影响
• 4.3.2 各种脱色剂脱色效果的研究
• 4.3.3 粒状活性炭脱色单因素实验
• 4.4 本章小结
• 第5章 油茶籽多糖抗氧化性研究
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 原料与主要试剂
• 5.1.2 实验仪器与设备
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 油茶籽多糖清除超氧阴离子自由基（邻苯三酚自氧化法）的测定
• 5.2.2 油茶籽多糖清除羟基自由基（·OH）的测定
• 5.3 实验结果
• 5.3.1 油茶籽多糖清除超氧阴离子自由基的作用
• 5.3.2 油茶籽多糖清除羟基自由基的作用
• 5.4 本章小结
• 第6章 结论
• 6.1 结论
• 6.2 展望
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间的研究成果