论文摘要
口腔鳞状细胞癌（简称：口腔癌,Oral squamous cell carcinoma）是最常见的口腔恶性肿瘤,其发病率占口腔恶性肿瘤的90%。恶性肿瘤的综合治疗方式中,诱导缓解+手术治疗+术后放疗或化疗,用来提高晚期肿瘤5年生存率已被多数学者所公认。术前化疗又称新辅助治疗或诱导化疗,应用在放疗或手术前,是减少肿瘤负荷的一种方法,在头颈肿瘤中已有大量的随机试验证明了其效果,是恶性肿瘤综合治疗的重要手段。自噬是在生命进化过程中一个非常古老的生物学现象,广泛存在于动植物和其他低等生物体中,是保持细胞内环境稳定的重要方式之一。自噬可通过降解胞内蛋白质及细胞器为细胞的生长提供营养及能量,有利于肿瘤细胞在低血管化的环境中生长。同时,自噬还可能通过去除受损的细胞器,保护癌细胞以对抗抗癌治疗（比如放疗、化疗）,使细胞逃避凋亡,继续存活。研究发现,人类肿瘤中均存在自噬活性的改变,如大肠癌、肺癌及宫颈癌等的肿瘤细胞保持了较高的自噬活性,对肿瘤细胞在恶劣环境中的生存起到了一定的保护作用。很多药物也可以诱导肿瘤细胞发生自噬,如利用莱菔硫烷（Sulforaphane）治疗人前列腺癌时可诱发自噬,但这种自噬可抑制前列腺癌细胞发生凋亡而增强存活,因而认为自噬为肿瘤细胞提供了一种逃避凋亡性死亡的机制,从而导致肿瘤对药物的耐受。另有研究用喜树碱（camptothecin）处理MCF7细胞,24 h内细胞中有自噬泡样结构出现,并聚集于线粒体区域；通过加入自噬抑制剂提高线粒体去极化和caspase-9的活性,加速了凋亡,提示自噬可延迟凋亡和肿瘤细胞的发生、发展、转归和治疗效果有着密切的关系。因此,为了了解口腔癌的发生机制,探讨自噬在口腔癌发生发展和化疗中的作用。体外利用顺铂（DDP）诱导口腔癌细胞株Tca83产生自噬；并且用自噬特异性阻断剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）和顺铂共同作用Tca83细胞。通过MTT法观察Tca83细胞的增殖活性、荧光共聚焦显微镜法观察自噬的表达情况、流式细胞仪法观察Tca83细胞的凋亡情况。结果：1、DDP对Tca83细胞的增殖抑制率影响呈明显的剂量、时间依赖性。2、DDP对Tca83细胞凋亡的影响存在时间依赖性。3、DDP能诱导Tca83细胞发生自噬,LC3Ⅱ的荧光强度在12小时时最强。4、DDP能有效的抑制Tca83细胞的增殖；3-MA提前给药其增殖抑制率有明显提高；3-MA迟后给药其增殖抑制率比单独使用DDP略有下降。5、3-MA自身对Tca83细胞的凋亡影响很小。6.LC3II绿色荧光呈点状散在分布于细胞质内,并且3-MA+DDP组绿色荧光强度较DDP组弱。荧光强度DDP组与其他4组均有统计学差异；3-MA+DDP组和DDP+3-MA组与其他3组均有统计学差异,但该两组之间无统计学差异。7、DDP能诱导细胞内LC3II蛋白表达,而3-MA的干预降低了LC3II的表达。结论：1、DDP能有效抑制口腔癌细胞Tca83的增殖,并且存在剂量和时间依赖性,杀伤细胞启动了凋亡和自噬两种途径。2、DDP诱导自噬与时间相关。3、自噬的下调（抑制自噬）能增强口腔癌细胞对化疗药物DDP的敏感性。4、DDP作用于口腔癌细胞Tca83能诱导细胞发生自噬性活化和凋亡5、自噬在不同的阶段发挥着不同的作用。DDP作用早期,自噬发挥保护作用；在DDP作用后期,自噬则作为另一种死亡形式出现,和凋亡一起促进细胞死亡。
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相关论文文献
- [1].顺铂诱导的自噬在口腔鳞癌Tca83细胞中的作用[J]. 口腔医学研究 2012(06)
- [2].Zyflamend对人舌鳞癌细胞系Tca83增殖和凋亡的影响[J]. 北京口腔医学 2009(06)