论文题目: 过量饲料氟对仔猪生长的影响及其作用机理的探讨
论文类型: 博士论文
论文专业: 动物营养与饲料科学
作者: 占秀安
导师: 许梓荣
关键词: 仔猪,生长,软组织,自由基,抗氧化酶,细胞凋亡,基因表达
文献来源: 浙江大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本课题研究了过量饲料氟对仔猪生长的影响,并从相关组织病理学变化、主要器官代谢酶活力、相关激素的合成与分泌、自由基代谢与抗氧化系统功能、细胞凋亡及其关键酶活力、酶蛋白SOD基因表达、肾细胞培养等方面探讨了机理。 96头“杜长大”仔猪（体重17.17±1.01kg）按饲养试验要求分成4组,每组3个重复,每个重复8头（公母各半）,分别饲以添加了0、100、250、400mg/kg氟（氟化钠）的饲粮（基础日粮含消化能13.22 MJ/kg,粗蛋白17.75%,氟26.18mg/kg,仔猪饲料氟的国家限量标准<100 mg/kg）。预试7天后,进行了为期50天的饲养试验和临床观察。饲养试验结束前一周,每组各选体重相近8头猪（公母各半）,以Cr2O3为外源指示剂进行了消化试验。饲养试验结束后,每组选8头（公母各半）共32头猪进行屠宰试验、剖检与取样分析。同时,通过体外肾细胞培养,检测氟对肾细胞生长与代谢功能的影响。获得了以下主要结果: 1.饲养试验结果表明:过量饲料氟降低了仔猪的日增重（P<0.05）,并使采食量呈减少趋势,其中400mg/kg氟还降低了饲料转化效率（P<0.05）。同时观察到:与对照组相比,试验组仔猪前期表现食欲减退,不愿活动;后期表现被毛粗乱,皮肤苍白,体形消瘦,出现跛行。 2.消化试验结果揭示:过量饲料氟降低了饲料干物质和粗蛋白的表观消化率（P<0.02）,其中250 mg/kg和400mg/kg氟还降低了饲料粗脂肪的表观消化率（P<0.02）。 3.屠宰试验结果表明:250 mg/kg和400mg/kg氟提高了肝重比率（P<0.02）,400mg/kg氟提高了心脏重比率（P<0.03）。同时剖检肉眼可见:试验组仔猪出现氟斑牙:肝脏肿大,局灶性坏死;肾脏肿大,脂肪变性,肾盂积水。 4.组织形态学检测显示:（1） 过量饲料氟显著降低了仔猪十二指肠绒毛高度,而增高了隐窝深度;（2） 试验组仔猪肝细胞与肝血窦排列紊乱,界限不明,肝细胞变性坏死,肾小球皱缩,肾小囊囊腔增大,肾小管上皮细胞变性坏死、脱落而充塞管腔,甲状腺滤泡体积减小,胶质明显减少,滤泡间质纤维化,滤泡旁细胞增生;（3） 试验组仔猪胰、肝、肾和甲状腺细胞核固缩变形,染色质边集,线粒体肿胀、破裂,基质
论文目录:
缩略词
中文摘要
Abstract
第一章 文献综述
1.1 氟的来源、代谢与营养
1.2 氟对畜牧生产的影响
1.3 氟对器官组织结构与功能的影响
1.4 氟与甲状腺相关激素
1.5 氟与抗氧化系统功能及自由基代谢
1.6 氟的细胞毒性
1.7 氟的遗传毒性
1.8 国内外主要畜禽饲料及部分原料氟的限量标准
1.9 降氟的方法与措施
1.10 本研究的目的与内容
第二章 材料与方法
2.1 试验材料
2.2 试验方法
2.2.1 饲养试验
2.2.2 消化试验
2.2.3 屠宰试验
2.2.4 饲料氟含量的测定
2.2.5 光镜、电镜切片制作与显微测量
2.2.6 消化酶活性测定
2.2.7 肝脏细胞线粒体中SDH活性测定
2.2.8 肾脏中LDH、AKP、GPT活性测定
2.2.9 血清激素和TG水平分析
2.2.10 甲状腺中Na~+，K~+-ATPase、TPO活性和碘含量分析
2.2.11 血清生化指标测定
2.2.12 甲状腺、肝、肾中GSH-P_x、SOD活性和MDA、GSH含量分析
2.2.13 肝、肾组织细胞凋亡检测
2.2.14 肝、肾组织中Caspase-9活性测定
2.2.15 肝细胞DNA提取与电泳分析
2.2.16 肝细胞Cu，Zn-SODmRNA丰度的测定
2.2.17 肾细胞培养、NaF染毒与毒性分析
2.2.18 数据处理
第三章 试验结果
3.1 生产性能和表观体征
3.2 饲料养分表观消化率
3.3 主要内脏器官形态
3.3.1 器官重量
3.3.2 剖检症状
3.3.3 组织显微和电镜结构
3.4 主要内脏器官功能
3.4.1 十二指肠和胰脏分泌消化酶功能
3.4.2 肝脏代谢功能
3.4.3 肾脏代谢功能
3.4.4 甲状腺和垂体分泌激素功能
3.5 抗氧化系统功能与自由基代谢
3.6 肝、肾细胞凋亡及Caspase-9活力
3.6.1 肝、肾细胞凋亡
3.6.2 肝、肾Caspase-9活力
3.6.3 肝细胞DNA电泳结果
3.7 肝细胞Cu，Zn-SODmRNA丰度的检测结果
3.7.1 Cu，Zn-SOD和β-Actin基因片段的克隆及序列分析
3.7.2 肝脏Cu，Zn-SODmRNA丰度
3.8 培养肾细胞NaF染毒试验结果
3.8.1 肾细胞生长形态
3.8.2 肾细胞增殖反应
3.8.3 肾细胞培养上清液的生化指标变化
第四章 讨论
4.1 过量氟对仔猪生长性能和健康状况的影响
4.2 过量氟对仔猪消化机能的影响
4.3 过量氟对仔猪肝脏结构与功能的影响
4.4 过量氟对仔猪肾脏结构与功能的影响
4.5 过量氟对仔猪甲状腺结构与功能的影响
4.6 过量氟对仔猪抗氧化系统功能及自由基代谢的影响
4.7 过量氟对仔猪肝、肾细胞凋亡的影响
4.8 过量氟对仔猪肝细胞SOD基因表达的影响
4.9 过量氟对NaF染毒肾细胞生长与代谢功能的影响
提示与创新点
参考文献
附录 论文发表
发布时间: 2005-07-27
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