论文摘要
目的研究不同浓度吡格列酮对成骨细胞增殖及凋亡的影响,进一步了解成骨细胞凋亡发生机制,为临床用药提供一定实验依据。方法（1）以MC3T3-E1小鼠胚胎成骨细胞株为实验对象,将其分为6组,每组4个平行,分别给予5、10、20、30、40μM吡格列酮干预,对照组为相同剂量的二甲基亚砜,24小时后MTT法观察成骨细胞活性变化（2）将其分为6组,每组设3个平行,分别给予5、10、20、30、40μM吡格列酮干预,对照组为相同剂量的二甲基亚砜,干预24小时后通过流式细胞仪检测各组细胞凋亡率及细胞周期各时相比例（3）将其分5组,每组6个平行,分别给予10,20,30,40μM吡格列酮干预,对照组为相同剂量的二甲基亚砜,24小时后用免疫组化法检测成骨细胞Bcl-2,Bax蛋白表达。结果（1）随着吡格列酮浓度增加,成骨细胞的活性在0-30μM浓度范围内逐渐降低,各组间比较均有统计学差异（p<0.05）,呈剂量依赖性下降,30、40μM两组相比无统计学差异（p>0.05）。（2）a)细胞周期各时相比例:与对照组相比各浓度组Go/G1期细胞均增多,其中5μM组与对照组无统计学差异（p>0.05）;G2M期细胞较对照组增多,20、30、40μM组与对照组无统计学差异（p>0.05）;S期细胞减少,与对照组相比浓度≤30μM时显著下降（p<0.01）,40μM时低于对照组（p<0.05）。b)成骨细胞凋亡率:在5,10μM时低于对照组（p<0.05）,20μM略低于对照组但无统计学意义,30、40μM较对照组显著增高（p<0.01）。（3）Bax表达与对照组相比在10μM时明显减弱（p<0.01）,20μM时接近对照组（p>0.05）,30、40μM较对照组显著增强（p<0.01）;Bc1-2表达在浓度≤20μM时显著增强（p<0.01）,30μM时强于对照组（p<0.05）,40μM时表达较对照组显著减弱（p<0.01）。（4）对于Bax/Bc1-2相对表达强度与细胞凋亡率做相关性分析,两者呈显著性正相关（n=15,r=0.796,P <0.001）。结论吡格列酮在低浓度（<20μM）抑制成骨细胞凋亡,对细胞起保护作用,较高浓度（30μM,40μM）则促进成骨细胞凋亡,Bax/Bcl-2参与其凋亡机制,并可能起关键调控作用。整体上可抑制成骨细胞DNA合成,抑制细胞增殖,导致细胞活性下降。
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