导读:本文包含了胶原蛋白多肽论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:鲟鱼皮,胶原蛋白肽,碱性蛋白酶,酶解
胶原蛋白多肽论文文献综述
李露园,王升帆,朱有贵,章银军,汪钊[1]（2019）在《酶法制备鲟鱼皮胶原蛋白多肽及其抗氧化活性研究》一文中研究指出该研究以鲟鱼皮为原料利用碱性蛋白酶水解制备胶原蛋白肽,进行了鲟鱼皮基本成分分析,酶解条件优化和酶解产物抗氧化活性研究。结果表明,最佳酶解条件为pH 9,温度55℃,添加酶质量分数3%,酶解时间5 h时水解度为22. 0%。酶解液经超滤分离得到4种不同分子质量范围的胶原蛋白肽组分SSCP-I(分子质量>10 000 Da)、SSCP-II(分子质量=5 000～10 000 Da)、SSCP-Ⅲ(分子质量=1 000～5 000 Da)和SSCP-IV(分子质量<1 000 Da)。其中(分子质量=1 000～5 000 Da) SSCP-Ⅲ对超氧阴离子自由基的清除能力最高,其半抑制清除浓度IC50为5. 938 g/L。该研究为鲟鱼皮的综合加工和高值化利用提供了理论指导。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2019年20期）
赵静[2]（2019）在《林蛙胶原蛋白多肽的分离纯化、功能性研究及其微胶囊的制备》一文中研究指出本论文课题来源于吉林省科技厅攻关项目(20160204022NY):《林蛙残体胶原蛋白多肽的结构修饰及稳定性关键技术研究》。本研究以酶解过滤得到的具有高生物活性的林蛙胶原蛋白多肽(分子量小于3500Da)为原料,对其进行分离纯化及其功能性等研究。首先优化凝胶层析分离条件得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ叁个组分,利用高分辨液质联用仪(LC-MS)鉴定其氨基酸序列,筛选出各组分的优势序列。其次,对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分的抗氧化和ACE抑制活性进行研究,结合所得氨基酸序列探究抗氧化和ACE抑制活性的构效关系。最后,以林蛙胶原蛋白肽为芯材,制备林蛙肽/微孔淀粉-海藻酸钠微胶囊,考察其在体外模拟胃肠液中的缓释效果。本文的研究内容及对应结果如下:1.利用葡聚糖凝胶层析分离技术分离纯化林蛙胶原蛋白多肽,对层析介质规格、上样量和洗脱流速叁个主要条件进行优化,得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分,再对各组分多肽形貌进行扫描电镜分析,最后将叁个组分进行LC-MS检测得到各组分的优势氨基酸序列。结果如下:(1)层析分离条件为:层析介质SephadexG25、上样量1500μg、洗脱流速60mL/h时分离效果最好,得到叁个组分。(2)混合肽及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的扫描电镜分析结果表明:原混合肽表面形貌呈圆球状,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分表面形貌相似,均是絮状,片状和棒状的混合,彼此间差异不明显。(3)从LC-MS检测所得氨基酸序列中,筛选出Ⅰ组分中的优势氨基酸序列有NMDMPPNK、LDAQVSALEGAR、LEVLEIIMAIFK,分别命名为Ⅰ_1、Ⅰ_2、Ⅰ_3;Ⅱ组分中的优势氨基酸序列有NALSPLK、MLDEVPK、MNAQNVGK,分别命名为Ⅱ_1、Ⅱ_2、Ⅱ_3;Ⅲ组分中的优势氨基酸序列有GGLVGIK、EISSLK、MAAISPK、MANSQLK,分别命名为Ⅲ_1、Ⅲ_2、Ⅲ_3、Ⅲ_4。2.对分离所得的多肽组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ进行抗氧化活性研究,考察了其对DPPH的清除能力、超氧阴离子的清除能力和还原力,并进一步探索其抗氧化构效关系。结果表明:(1)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分对DPPH清除率分别为74.3%、50.8%、59.0%;还原力分别为0.68、0.32、0.33;超氧阴离子清除率分别为33.4%、12.4%、11.5%,总体来讲,I的抗氧化活性最高。(2)LC-MS检测结果表明叁个组分氨基酸序列都含有Leu,Pro,Lys、Arg,这可能是叁个组分均有抗氧化活性的主要原因。(3)Ⅰ中优势序列的N端为Leu和酸性氨基酸的酰胺残基天冬酰胺Asn,而Ⅱ、Ⅲ中优势序列的N端多为中性氨基酸Met,这可能是Ⅰ组分抗氧化活性略高于Ⅱ、Ⅲ组分的原因。3.利用高效液相测定Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分多肽的ACE抑制活性,并探索其ACE抑制构效关系。结果表明:抑制剂浓度在0~10 mg/mL之间时,随着抑制剂浓度增大,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分ACE抑制率均逐渐增高,且Ⅲ组分的ACE抑制活性始终大于I、Ⅱ组分。LC-MS检测得出的I、Ⅱ、Ⅲ的优势氨基酸序列中,每个组分的优势序列C末端均为Lys或Arg,并且每个序列其C末端叁肽位置至少含有一个疏水性氨基酸,这可能是叁个组分均具有ACE抑制活性的主要原因。而Ⅲ组分的ACE抑制活性最高,可能是因为其分子量小,具有活性位点暴露多、分子移动快等特点。4.为提高林蛙胶原蛋白多肽在胃肠液内的生物利用率,增强其缓释效果,以海藻酸钠为壁材,微孔淀粉作吸附芯材的载体,利用锐孔凝固浴法制备了微胶囊,在体外模拟胃肠液的实验结果显示:林蛙肽/微孔淀粉-海藻酸钠微胶囊与林蛙肽-海藻酸钠微胶囊在模拟胃液中4h时,累积释放量分别为32%和41%,在模拟肠液中8h时,累积释放量分别为88%和83.6%。有载体的微胶囊在胃液中释放少,在肠液中释放量增加缓慢,说明有载体的微胶囊能起到一定的缓释作用。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-06-01）
韩姣姣,李妍妍,周君,芦晨阳,李晔[3]（2019）在《仿刺参胶原蛋白多肽对Ⅱ型糖尿病小鼠肾脏的保护机制》一文中研究指出目的:研究仿刺参胶原蛋白多肽对db/db糖尿病小鼠的保护机制。方法:通过仿刺参多肽分组喂养糖尿病小鼠,测定小鼠血清中TC、TG、LDL-C和HDL-C含量及胰岛素浓度。采用双向电泳研究小鼠的肾脏蛋白,通过差异蛋白筛选,GO功能注释,代谢通路等分析确定仿刺参多肽对糖尿病小鼠肾脏的保护机制。生化指标显示:仿刺参多肽可以降低血清中TC、TG、LDL-C的含量和胰岛素浓度,提高HDL-C水平。双向结果表明:相对于模型组,试验组共检测出上调蛋白81个,下调蛋白51个。GO结果显示:差异蛋白的功能主要集中在蛋白转运和信号传导过程。KEGG分析发现,差异蛋白主要富集在代谢途径、胰岛素抵抗和胰岛素信号传导过程。结论:喂养仿刺参多肽的小鼠体内视黄醇结合蛋白4的表达下调,血糖水平下降,胰岛素信号通路恢复正常,可以有效缓解糖尿病的症状。(本文来源于《中国食品学报》期刊2019年03期）
王琦,都帅,赵全民,李庆杰[4]（2019）在《鹿茸多肽对小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3增殖和胶原蛋白分泌能力的影响及其机制》一文中研究指出目的:探讨鹿茸多肽对小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3增殖和胶原蛋白分泌能力的影响,并阐明其相关作用机制。方法:选取对数生长期的NIH/3T3细胞,加入不同剂量(1.56、3.13、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00和200.00mg·L~(-1))鹿茸多肽作为实验组,以加入0mg·L~(-1)鹿茸多肽的细胞作为空白对照组,以加入50μg·L~(-1)碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的细胞作为阳性对照组。MTT法检测各组NIH/3T3细胞存活率,ELISA法检测各组NIH/3T3细胞中胶原蛋白分泌情况,划痕愈合实验检测各组NIH/3T3细胞的迁移能力,Western blotting法检测各组NIH/3T3细胞的细胞外调节蛋白激酶1/2 (ERK 1/2)的磷酸化蛋白(p-ERK 1/2)表达水平,免疫荧光法检测转化生长因子β1 (TGF-β1)的表达情况。结果:与空白对照组比较,阳性对照组和6.25、12.50、25.00、50.00、100.00及200.00mg·L~(-1)鹿茸多肽组细胞存活率明显升高(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组比较,阳性对照组和6.25、12.50、25.00和50.00mg·L~(-1)鹿茸多肽组NIH/3T3细胞培养液中Ⅰ型胶原蛋白水平明显升高(P<0.05或P<0.01),阳性对照组和12.50及25.00mg·L~(-1)鹿茸多肽组NIH/3T3细胞培养液中Ⅲ型胶原蛋白水平明显升高(P<0.05)。与空白对照组比较,阳性对照组和12.50mg·L~(-1)鹿茸多肽组细胞划痕愈合率、NIH/3T3细胞中p-ERK 1/2表达水平及NIH/3T3细胞质中TGF-β1表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:鹿茸多肽能促进NIH/3T3细胞增殖和胶原蛋白分泌,并提高其迁移能力,其作用机制是可能是通过激活ERK 1/2磷酸化及增加TGF-β1表达实现的。(本文来源于《吉林大学学报(医学版)》期刊2019年02期）
盛周煌,贾盟盟,朱良[5]（2018）在《罗非鱼皮胶原蛋白多肽的体外抗氧化活性》一文中研究指出以Vc和水溶性VE(Trolox)为对照品,测定罗非鱼皮胶原蛋白多肽对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基、ABTS自由基的清除能力,研究罗非鱼皮胶原蛋白肽的抗氧化活性。结果表明:罗非鱼皮胶原蛋白多肽对4种自由基均具有一定的清除能力,对羟基自由基和ABTS自由基表现出较强的清除作用,罗非鱼皮胶原蛋白多肽对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基、ABTS自由基的IC_(50)分别为56.31、5.19、49.10、2.51 mg/mL。罗非鱼皮胶原蛋白多肽具有较好的抗氧化能力,为其在抗氧化活性方面的应用提供理论依据。(本文来源于《食品科技》期刊2018年11期）
靳秋[6]（2018）在《林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物的制备及其性质研究》一文中研究指出林蛙是一种在我国东北地区普遍存在的珍贵的营养品,多用于制备林蛙油等产品。林蛙胶原蛋白多肽是以生产林蛙油的副产品─林蛙残体为原料,经过酶解提纯得到的高活性生物制品。本研究从胶原蛋白多肽出发,将其与亚铁离子螯合,合成制备出一款功能性多肽补铁剂,以改善当今社会广泛存在的缺铁性贫血的现状。该产品相对于前几代补铁剂,对人体胃肠道不产生刺激作用,适口性好,易于储存和运输。本论文的主要研究结果如下:1.选取林蛙胶原蛋白多肽与氯化亚铁进行螯合,制备出林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物;通过邻菲啰啉比色法绘制出铁的标准曲线,从而计算出螯合物中的铁含量。通过单因素试验依次考察了林蛙胶原蛋白多肽浓度、p H值、抗坏血酸浓度、反应时间和反应温度对林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物螯合率的影响,并选取了其中影响较大的四个因素进行了四因素叁水平的正交优化试验。最终得到制备林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物的最优工艺参数:林蛙胶原蛋白多肽浓度为9%、p H值为5、抗坏血酸浓度为2.5%、反应时间为80 min、反应温度为50℃。2.为提高产物的抗氧化性,增强细胞膜的流动性,对原料林蛙胶原蛋白多肽进行了糖基化修饰,再选取修饰后的林蛙胶原蛋白多肽与亚铁离子进行螯合制备多肽亚铁螯合物。通过单因素试验依次考察了糖的种类、多肽和糖的比例、p H值、反应温度和反应时间对糖基化修饰后的林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物螯合率的影响,并选取了其中影响较大的四个因素进行了四因素叁水平的正交优化试验。通过正交优化试验选择出制备糖基化修饰后的林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物的最佳工艺参数,其最优参数如下:选择葡萄糖进行糖基化修饰,多肽与糖的比例为1:1、p H值为7、反应温度为70℃、反应时间为18 h。3.通过硫化钠法对林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物的成分进行了定性研究,确定螯合物中不存在游离的多肽,进而确定多肽与亚铁离子已充分螯合;通过紫外扫描和红外光谱分析,对螯合前后的物质进行了结构上的鉴定,根据峰值的不同及其变化特征,确定螯合产物的生成;通过一系列实验对产物进行了抗氧化性的测定。分别比较、测定了糖基化修饰前后的林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物对DPPH、羟自由基、超氧阴离子的清除能力及其还原能力。实验结果表明,通过糖基化修饰后的林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物在以上几方面的能力均显着高于未进行糖基化修饰的林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物,说明糖基化修饰有利于提高物质的抗氧化性。同时得出结论:当糖基化修饰后的螯合物浓度为4 mg/m L时,其对DPPH、羟自由基和超氧阴离子的清除能力最强;其还原能力与浓度成正比。4.采用锐孔-凝固浴法制备林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物微胶囊。首先通过单因素试验依次考察了海藻酸钠浓度、芯壁比、反应温度和氯化钙浓度对林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物微胶囊的包埋率的影响,并在单因素试验的研究基础上,采用响应面法对林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物微胶囊的制备工艺进行优化。以海藻酸钠的浓度、芯壁比、反应温度、氯化钙浓度为响应因子,林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物微胶囊的包埋率为响应值建立二次回归方程。得到方程:Y=85.36-0.29A+0.88B-0.76C+1.09D+0.45AB+1.15AC+0.72AD-1.19BC-0.21BD+0.23CD-11.42A2-6.28B2-5.05C2-7.38D2。本实验所选用的模型显着(P<0.05),拟合度较好,预测值和实验值的相关度非常好。通过响应面软件得到的最佳工艺条件:海藻酸钠的浓度为2.96%,芯壁比为0.41,反应温度为45.8℃,氯化钙的浓度为4.28%。由回归方程确定的制备多肽亚铁螯合物微胶囊的包埋率最高为85.46%,并且可信度为99.3%,具有良好的模拟性。(本文来源于《吉林大学》期刊2018-06-01）
宋红新[7]（2018）在《林蛙残体胶原蛋白多肽的结构修饰及稳定性关键技术研究》一文中研究指出本论文研究内容隶属于吉林省科技厅攻关项目《林蛙残体胶原蛋白多肽的结构修饰及稳定性关键技术研究(20160204022N Y)》。东北林蛙是我国着名的药食两用动物,人们对林蛙的利用主要集中在林蛙油上,林蛙去油后的副产物,往往处理方式非常简单:或加工成动物饲料,或直接将其丢弃等,不仅造成资源的浪费,还常常引起一些环境问题。因此,如何提高林蛙附加值,高效利用林蛙副产物己成为国内学者的研究热点。长春工业大学邱芳萍课题组用酶解法成功制备了具有高生物活性的林蛙残体胶原蛋白多肽,为实现林蛙资源零浪费提供了新的思路。但是,因多肽易受pH值、温度等环境因素的影响,导致结构改变和功能特性破坏,成为限制其功能作用及商业化应用的主要瓶颈。针对上述问题,本研究以酶解的林蛙多肽高活性肽段(分子量<3500 Da)为原料,对其进行糖基化修饰,分析糖基化作用对其结构及功能特性的稳定性影响机理,为拓展林蛙多肽的应用和发展提供理论基础。本论文具体研究内容如下:1.以酶解的林蛙多肽高活性肽段(分子量<3500 Da)为原料,测定其氨基酸序列,并考察抗氧化稳定性、ACE抑制活性和胃肠道消化稳定性。结果表明:林蛙多肽中有14种肽序列,包含除蛋氨酸之外人体必需的七种氨基酸,并含有多种与抗氧化和ACE抑制相关的氨基酸,在强酸条件下抗氧化能力较好,热稳定性较差。林蛙多肽的ACE抑制率为66.87%,半抑制浓度IC_(50)为753.300μmol/L。在模拟胃肠道消化的试验中,DPPH清除率和超氧阴离子清除率是胃液>空白组>肠液,还原能力是肠液>空白组>胃液,而羟基清除率在多肽经过胃液和肠液时均低于空白组。2.以林蛙多肽为原料,木糖/葡萄糖为还原糖,通过控制还原糖种类(木糖/葡萄糖)和底物质量比(1:0、1:1、1:2、1:4、1:6、1:8)进行单因素和正交优化试验,按照最优参数制备糖基化产物,测定其糖基化程度(中间产物、褐变程度、pH值、接枝度),并对各产物的抗氧化活性(DPPH、羟基、超氧、还原力)进行测定。得到糖基化反应最优工艺条件为:底物浓度10 mg/mL、反应温度60℃、反应时间24 h、pH值7、林蛙多肽:木糖=1:4时。测定糖基化反应程度,结果表明发生了糖基化反应,且木糖糖基化效果比葡萄糖好,同时多肽和木糖反应程度与抗氧化活性之间具有显着的相关性。3.制备林蛙多肽-木糖糖基化复合物,对其稳定性(热稳定性、光稳定性、模拟胃肠道消化稳定性、金属离子的影响)和ACE抑制活性进行测定。热稳定性试验结果表明复合物清除DPPH自由基的能力受温度影响不大,说明糖基化能够提高多肽的热稳定性。在光稳定性试验中,复合物在光照和暗处放置30 d后的DPPH清除率分别提升了2.91%和1.96%,说明光照可以提升复合物的抗氧化活性,且复合物受光照的影响比多肽小,呈现更稳定的状态。模拟胃肠道消化试验的结果表明,林蛙多肽经糖基化修饰后在胃液和肠液中的羟基清除率明显提升。金属离子对复合物抗氧化性的影响结果表明,当Na~+和Fe~(3+)存在时会降低复合物的抗氧化性,在存放和加工过程中应该尽量避免与铁制品或钠盐接触。林蛙多肽及复合物的ACE抑制率分别为66.87%和83.83%,半抑制浓度分别为753.300μmol/L和414.475μmol/L,说明糖基化能够提升多肽的ACE抑制活性。4.研究糖基化修饰对林蛙多肽结构的影响,包括DSC分析、紫外光谱、荧光光谱、红外光谱和圆二色谱。DSC分析结果表明,林蛙多肽糖基化修饰后变性温度和热焓值均降低。紫外光谱发生蓝移,表明糖基化后林蛙多肽的结构得到伸展,暴露出芳香族氨基酸。荧光强度降低,最大发射波长蓝移,表明林蛙多肽中色氨酸残基周围极性降低和疏水性增强。由红外光谱和圆二色谱分析可知,木糖通过C-H、-C=O、C=C和C-O等基团与林蛙多肽相连,糖基化修饰使得林蛙多肽的无规则卷曲结构含量降低。5.以糖基化复合物为芯材,海藻酸钠为壁材制备微胶囊。以包埋率为指标,通过单因素和响应面试验确定氯化钙浓度(1~5%)、芯壁比(3:1、2:1、1:1、1:2、1:3)、海藻酸钠浓度(1~3%)和反应温度(40~60℃)的最优参数。并对最优微胶囊进行表征,研究贮藏稳定性(温度、光照、氧气、存放时间)和体内缓释效果。得出微胶囊最优制备参数为:海藻酸钠浓度2.52%,芯壁比0.88,氯化钙浓度2.48%,反应温度50℃,包埋率是69.88%。扫描电镜结果表明制备的微胶囊具有良好的形态。微胶囊贮藏稳定性试验表明糖基化复合物微胶囊具有较好的贮藏稳定性。在缓释试验中,8 h后微胶囊在胃液中累计释放量达37.69%,肠液中达68.65%,可以达到较好的缓释效果。(本文来源于《吉林大学》期刊2018-06-01）
司磊磊,张燕,侯虎,张鸿伟,李八方[8]（2018）在《两种鱼皮胶原蛋白的比较及其降解物中多肽的识别》一文中研究指出本研究从鳕鱼皮和罗非鱼皮中提取酶促溶性胶原蛋白(PSC),采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、傅立叶变换红外光谱、X-射线衍射、氨基酸组成分析、旋转流变仪以及高效液相色谱-串联质谱等技术,分析了鳕鱼皮PSC(G-PSC)和罗非鱼皮PSC(O-PSC)的分子结构、热稳定性以及降解产物中多肽的序列。结果表明:两种来源的胶原蛋白均符合典型Ⅰ型胶原蛋白的组成,具有相似的二级结构和叁级结构,但氨基酸组成存在差异,其中O-PSC的脯氨酸羟基化率(49.1%)大于G-PSC的脯氨酸羟基化率(33.3%);O-PSC的热变性温度(24.7℃)要高于G-PSC(13.8℃),两种鱼皮胶原蛋白中脯氨酸羟基化率越高,则胶原蛋白的热稳定性越强;两种胶原蛋白经相同的酶解处理后,特征性肽片段被检测识别。结论:不同来源的胶原蛋白高级结构方面具有相似性,但经相同的酶解后会生成差异性肽片段,可以利用它们进行胶原蛋白来源的鉴别,这为胶原蛋白快速分析方法的建立提供依据。(本文来源于《食品工业科技》期刊2018年05期）
廖涛,黄晨曦,江洪有,锄晓艳,饶丹华[9]（2018）在《响应面法优化鲟鱼皮胶原蛋白多肽的酶解工艺》一文中研究指出为了解决胶原蛋白多肽制备得率低的问题,以鲟鱼-甲骨板皮胶原蛋白多肽得率为主要指标,在单因素试验基础上,进一步利用响应面模型试验确定加酶量、提取时间、液料比3个因素的最优条件,并建立了关系模型。试验结果表明:影响鲟鱼鱼皮胶原蛋白多肽得率的3个因素主次顺序为:液料比>酶解时间>加酶量,最优提取工艺为:0.5 mol/L的乙酸与原料之间的液料比为14.02,加酶量为1.69%,提取时间为8.51 h。在此条件下胶原蛋白多肽得率为78.86%,且产物主要为小分子胶原蛋白,峰值分子量为3719 u。(本文来源于《食品科技》期刊2018年01期）
庞博,潘黛安,魏星华,齐滨,白雪媛[10]（2017）在《鹿筋胶原蛋白多肽对骨细胞的作用》一文中研究指出目的研究鹿筋胶原蛋白中氨基酸组成及其对骨细胞的作用。方法以双酶法制备的鹿筋胶原蛋白多肽为研究对象,利用柱前衍生化的方法测定其氨基酸的相对含量;采用MTT法检测其对C518软骨细胞和MC3T3-E1成骨细胞的增殖作用。结果在鹿筋胶原蛋白中,甘氨酸相对含量最高,为31.81%,羟脯氨酸的相对含量为6.99%,符合胶原蛋白组成的特点。与对照组比较,鹿筋胶原蛋白多肽对C518细胞、MC3T3-E1细胞均具有显着的增殖作用,其增殖作用呈量效关系,当浓度为200μg/m L时,增殖作用最为显着。结论鹿筋胶原蛋白多肽对骨细胞具有明显的增殖作用,为其产品的开发提供理论依据。(本文来源于《时珍国医国药》期刊2017年11期）
胶原蛋白多肽论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本论文课题来源于吉林省科技厅攻关项目(20160204022NY):《林蛙残体胶原蛋白多肽的结构修饰及稳定性关键技术研究》。本研究以酶解过滤得到的具有高生物活性的林蛙胶原蛋白多肽(分子量小于3500Da)为原料,对其进行分离纯化及其功能性等研究。首先优化凝胶层析分离条件得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ叁个组分,利用高分辨液质联用仪(LC-MS)鉴定其氨基酸序列,筛选出各组分的优势序列。其次,对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分的抗氧化和ACE抑制活性进行研究,结合所得氨基酸序列探究抗氧化和ACE抑制活性的构效关系。最后,以林蛙胶原蛋白肽为芯材,制备林蛙肽/微孔淀粉-海藻酸钠微胶囊,考察其在体外模拟胃肠液中的缓释效果。本文的研究内容及对应结果如下:1.利用葡聚糖凝胶层析分离技术分离纯化林蛙胶原蛋白多肽,对层析介质规格、上样量和洗脱流速叁个主要条件进行优化,得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分,再对各组分多肽形貌进行扫描电镜分析,最后将叁个组分进行LC-MS检测得到各组分的优势氨基酸序列。结果如下:(1)层析分离条件为:层析介质SephadexG25、上样量1500μg、洗脱流速60mL/h时分离效果最好,得到叁个组分。(2)混合肽及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的扫描电镜分析结果表明:原混合肽表面形貌呈圆球状,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分表面形貌相似,均是絮状,片状和棒状的混合,彼此间差异不明显。(3)从LC-MS检测所得氨基酸序列中,筛选出Ⅰ组分中的优势氨基酸序列有NMDMPPNK、LDAQVSALEGAR、LEVLEIIMAIFK,分别命名为Ⅰ_1、Ⅰ_2、Ⅰ_3;Ⅱ组分中的优势氨基酸序列有NALSPLK、MLDEVPK、MNAQNVGK,分别命名为Ⅱ_1、Ⅱ_2、Ⅱ_3;Ⅲ组分中的优势氨基酸序列有GGLVGIK、EISSLK、MAAISPK、MANSQLK,分别命名为Ⅲ_1、Ⅲ_2、Ⅲ_3、Ⅲ_4。2.对分离所得的多肽组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ进行抗氧化活性研究,考察了其对DPPH的清除能力、超氧阴离子的清除能力和还原力,并进一步探索其抗氧化构效关系。结果表明:(1)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分对DPPH清除率分别为74.3%、50.8%、59.0%;还原力分别为0.68、0.32、0.33;超氧阴离子清除率分别为33.4%、12.4%、11.5%,总体来讲,I的抗氧化活性最高。(2)LC-MS检测结果表明叁个组分氨基酸序列都含有Leu,Pro,Lys、Arg,这可能是叁个组分均有抗氧化活性的主要原因。(3)Ⅰ中优势序列的N端为Leu和酸性氨基酸的酰胺残基天冬酰胺Asn,而Ⅱ、Ⅲ中优势序列的N端多为中性氨基酸Met,这可能是Ⅰ组分抗氧化活性略高于Ⅱ、Ⅲ组分的原因。3.利用高效液相测定Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分多肽的ACE抑制活性,并探索其ACE抑制构效关系。结果表明:抑制剂浓度在0~10 mg/mL之间时,随着抑制剂浓度增大,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分ACE抑制率均逐渐增高,且Ⅲ组分的ACE抑制活性始终大于I、Ⅱ组分。LC-MS检测得出的I、Ⅱ、Ⅲ的优势氨基酸序列中,每个组分的优势序列C末端均为Lys或Arg,并且每个序列其C末端叁肽位置至少含有一个疏水性氨基酸,这可能是叁个组分均具有ACE抑制活性的主要原因。而Ⅲ组分的ACE抑制活性最高,可能是因为其分子量小,具有活性位点暴露多、分子移动快等特点。4.为提高林蛙胶原蛋白多肽在胃肠液内的生物利用率,增强其缓释效果,以海藻酸钠为壁材,微孔淀粉作吸附芯材的载体,利用锐孔凝固浴法制备了微胶囊,在体外模拟胃肠液的实验结果显示:林蛙肽/微孔淀粉-海藻酸钠微胶囊与林蛙肽-海藻酸钠微胶囊在模拟胃液中4h时,累积释放量分别为32%和41%,在模拟肠液中8h时,累积释放量分别为88%和83.6%。有载体的微胶囊在胃液中释放少,在肠液中释放量增加缓慢,说明有载体的微胶囊能起到一定的缓释作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胶原蛋白多肽论文参考文献
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