植物性食品中硒的形态分析方法的建立

论文摘要

硒是人体必需的微量营养元素之一,虽然其在环境和植物体中的含量很小,但它对人体有着巨大的生物功效。由于硒的生物有效性和致毒性都与其形态密切相关,现在常用总硒含量来评价其营养性和毒性存在较大不足,因此建立硒的分析方法并推广应用十分必要。本研究就是要以生物中最常见的四种硒形态为基础,建立用HPLC-HG-AFS联用测定植物性食品中硒形态的方法。本项研究的主要特点和成果有：1.研究对象具有很强的代表性。根据硒本身的营养性、毒性特点以及植物对硒的吸收特点等因素,将植物性食品按植物的科属分类,选择十字花科、百合科、豆科等植物性食品进行分析,并在条件允许的情况下对尽可能多的样品进行分析测定。2.确立了比较适宜的硒形态分析提取方法。通过对比测试分析,在沸水浴提取、高氯酸乙醇提取、甲醇水提取、酶提取四种前处理方法中,以甲醇水提取的提取效率较高。3.在本实验条件下,建立了仪器分析的最佳条件。对仪器分析中每一个参数进行了样品检测研究,提出仪器的最佳试验参数为：HPLC部分（流动相为60 mmol/L的（NH4）2HP04,其pH为5.5）,HG部分（还原剂为1.5%（m/v）的KBH4+0.5%KOH （m/v）+0.1%KI,载流为15%的盐酸）,AFS部分（硒空心阴极灯灯电流为45 mA,光电倍增管负高压为300 V,载气流速为400 mL/min,屏蔽气流速为900 mL/min）。4.经可靠性分析认为提出的检测方法准确可靠。对所建立的方法进行了方法检出限、回收率、精密度等试验,四种形态硒的检出限分别为SeCys6.29-6.46μg/L, Se（Ⅳ）5.46-5.57μg/L, SeMet17.15-17.99μg/L, Se（Ⅵ）7.56-7.90μg/L;用某一浓度的混标连续进样7次,四种形态硒的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为：SeCys 0.6%、2.6%, Se（Ⅳ） 0.1%、2.6%, SeMet0.8%、2.5%, Se（Ⅵ）0.2%、4.7%;四种形态硒的峰面积和其浓度呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.999。5.开展了新方法的应用研究。将建立的方法对尽可能多的植物性食品中硒进行测试,结果表明,不同样品中不同形态硒的分离效果良好,部分号称富硒的食品名不符实,其硒含量是很低的。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略语表
• 1 绪论
• 1.1 硒在环境中的分布
• 1.1.1 硒在地壳和土壤中的分布
• 1.1.2 大气中硒的含量
• 1.1.3 水体中硒的含量以及环境中主要的硒化合物
• 1.1.4 植物中硒的含量
• 1.1.5 硒在人体内的分布及其吸收和代谢
• 1.1.6 硒生物功能的二重性
• 1.1.7 部分地区居民的日硒摄入量和部分食品的硒限量标准
• 1.2 硒形态分析实验中样品的保存
• 1.3 硒形态分析的前处理方法
• 1.4 不同形态硒的分离与检测方法
• 1.4.1 气相色谱分离与检测
• 1.4.2 毛细管电泳分离和检测
• 1.4.3 体积排阻色谱（SEC）
• 1.4.4 离子交换色谱（IEC）
• 1.4.5 反相高效液相色谱（RP-HPLC）
• 1.4.6 离子对色谱（IP-HPLC）
• 1.4.7 多维色谱连用技术
• 1.4.8 其他联用技术
• 1.5 讨论
• 2 课题研究背景、目的、内容及技术路线
• 2.1 研究背景
• 2.2 研究目的
• 2.3 研究内容
• 2.4 技术路线
• 3 研究对象与方法
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 仪器
• 3.2.2 试剂
• 3.2.3 样品制备
• 3.2.4 总硒测定
• 3.3 结果与分析
• 3.4 讨论
• 4 仪器条件的研究与确立
• 4.1 引言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 仪器
• 4.2.2 试剂
• 4.2.3 高效液相色谱分离条件的优化方案
• 4.2.3.1 流动相浓度的选择方案
• 4.2.3.2 流动相pH的选择方案
• 4.2.4 氢化物发生装置条件的优化方案
• 4.2.4.1 盐酸浓度的选择方案
• 4.2.4.2 硼氢化钾浓度的选择方案
• 4.2.5 原子荧光检测测量条件的优化方案
• 4.2.5.1 光电倍增管负高压的选择方案
• 4.2.5.2 灯电流的选择方案
• 4.2.5.3 载气流量的选择方案
• 4.2.5.4 屏蔽气流量的选择方案
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 高效液相色谱分离条件的优化
• 4.3.1.1 流动相浓度的选择
• 4.3.1.2 流动相pH的选择
• 4.3.2 氢化物发生装置条件的优化
• 4.3.2.1 盐酸浓度的选择
• 4.3.2.3 硼氢化钾浓度的选择
• 4.3.3 原子荧光检测测量条件的优化
• 4.3.3.1 负高压对信噪比的影响
• 4.3.3.2 灯电流对信噪比的影响
• 4.3.3.3 载气流量对信噪比的影响
• 4.3.3.4 屏蔽气流量对信噪比的影响
• 4.4 讨论
• 5 前处理方法的筛选与建立
• 5.1 引言
• 5.2 材料与方法
• 5.2.1 仪器
• 5.2.2 试剂
• 5.2.3 提取方法
• 5.2.4 方法优化方案
• 5.3 结果与分析
• 5.3.1 提取方式的选择
• 5.3.2 提取剂甲醇水体积比的选择
• 5.3.3 不同超声时间的选择
• 5.3.4 提取次数的选择
• 5.4 讨论
• 6 方法验证
• 6.1 方法的检出限
• 6.2 方法的准确度
• 6.3 方法的重现性
• 6.4 所确立方法的标准曲线
• 7 所建立的方法在植物性食品中的应用
• 7.1 前言
• 7.2 材料与方法
• 7.2.1 蔬菜样品的采集与处理
• 7.2.2 植物性食品中硒的形态分析
• 7.3 结果与分析
• 7.3.1 十字花科类植物性食品图谱
• 7.3.2 百合科类植物性食品图谱
• 7.3.3 科类植物性食品图谱
• 7.3.4 菊科和伞形花科类植物性食品的图谱
• 7.3.5 禾本科植物性食品图谱
• 7.4 小结
• 8 总结
• 8.1 检测方法的建立
• 8.2 检测方法准确性研究
• 8.3 方法的应用
• 参考文献
• 致谢
• 附录Ⅱ