论文摘要
竹沥(Succus Bambusae)为禾本科植物粉绿竹(phyllostachys glauca Me clure)等刚竹属(phyllostachys Viridis Me clure)竹子的鲜杆加工制得的中药,具有清热化痰的功效。用于治疗痰热咳喘,痰稠难咯,小儿痰热惊风,四肢抽搐;现代用于乙型脑炎,流行性脑膜炎之高热、呕吐,痰热咳喘,中风口噤。宋《本草衍义》称其为“痰家之圣剂也”。竹沥来源丰富,疗效确切,但其工艺落后,竹源混乱,掺伪现象普遍,其成分复杂,且所含成分因所用竹子的品种,产地,制备方法不同而有所变化,造成竹沥质量难以控制。目前国内对竹沥真伪鉴别及质量控制所采用的方法比较落后、片面,不能全面、完整的体现竹沥的质量,不能保证竹沥在临床应用中的安全性和有效性。为了解决这一问题,规范竹沥的采收、炮制、加工、制剂等各个环节,本文对竹沥进行了指纹图谱的研究。本研究采用HPLC法,对竹沥的不同制备方法和样品不同纯化方法,不同品种、不同产地竹子,不同采收期水竹制成的竹沥以及竹沥伪品进行了指纹图谱研究。仪器选用Waters高效液相色谱仪,包括Waters1525泵,Waters2410检测器(Refractive Index Detecter), Breeze工作站。色谱条件为:Dikma DiamonsilTMC18柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,检测波长为254nm,进样量为10μl,流速为1.0mL/min。流动相及梯度程序为:乙腈(A)/0.1%磷酸水溶液(B)(时间-A%):(0-2)→(15-6)→(20-12)→(35-15)→(50-15)→(80-40)。结果:(1)水提法、醇提法、烧制法、干馏法所制竹沥的指纹谱图存在一定的差异,水提法和醇提法之间差异较小,其峰数目和峰面积明显多于传统的烧制法和干馏法。(2)10个不同品种、不同产地的竹子经水提法制成竹沥的指纹图谱显示,有24个色谱峰是它们所共有,确定为共有峰。利用Exce12003软件,以夹角余弦为测度,对竹沥HPLC指纹图谱进行相似度计算,结果10批竹沥的指纹图谱之间相似度不同。用聚类分析将10个不同品种、不同产地竹子经水提法制成的竹沥分为2类,并分别建立了各类的共有模式。(3)10个不同采收期水竹经水提法制成竹沥的指纹图谱显示,有29个色谱峰是它们所共有,确定为共有峰,利用Exce12003软件,以夹角余弦为测度,对竹沥HPLC指纹图谱进行相似度计算,12、1、8、9月的水竹制备成竹沥相似度比较高,而2、4、7月的相似度低,大体可认为秋冬采收的水竹制备的竹沥为一类,春夏为另一类。(4)楠竹和茶叶制成竹沥伪品的指纹图谱与正品存在明显差异。该方法具有稳定性高、重复性好和切实可行等特点,可以为竹沥质量的控制提供更为科学的依据和有效的鉴别方法。