实时定量PCR检测乳腺癌患者外周血CK19、CEAmRNA的表达及其与转移相关因子的关系

论文摘要

【目的】研究检测细胞角蛋白19（CK19,Cytokeratin 19）mRNA、癌胚抗原（CEA,Carcinoembryonic antigen）mRNA 的表达在诊断乳腺癌病人外周血微转移的临床意义,同时探讨乳腺癌病人外周血微转移与转移相关因子:细胞粘附分子CD44 变异型v6（CD44v6,Variant exon 6-containing isoforms of CD44）,基质金属蛋白酶9（MMP9,Matrix metalloproteinase-9）,血管内皮生长因子（VEGF,Vascularendothelial growth factor）及其他临床病理指标的关系。【方法】采用实时定量聚合酶链反应（RQ-PCR, Real-time quantitative polymerasechain reaction）法,并以?-actin 为内对照,测定乳腺癌细胞株MCF7 及19 例新鲜乳腺癌组织中特异性mRNA 表达情况,以及测定28 例健康女性志愿者、20 例良性乳腺疾病患者、108 例乳腺癌患者（88 例可行手术切除乳腺癌患者、20 例复发转移乳腺癌患者）的外周血中CK19、CEAmRNA 的表达。应用免疫组织化（Elivision 法）检测88 例可行手术切除乳腺癌患者手术标本CD44v6、MMP9 和VEGF 表达情况。【结果】对于乳腺癌细胞株MCF7 行15 次检测,CK19mRNA 和CEAmRNA 均为100%表达。19 例新鲜乳腺癌组织CK19mRNA 的表达阳性率为100%,CEAmRNA 的阳性率为78.9%。应用RQ-PCR 检测外周血CK19、CEAmRNA 的表达来检测乳腺癌外周血微转移,以上有一项为阳性即判定为转移。28 例健康对照CK19mRNA 和CEAmRNA两个指标检测结果均为阴性。良性乳腺疾病患者中,CK19mRNA 阳性1 例（5%）,无CEAmRNA 表达阳性者。108 例乳腺癌患者外周血CK19mRNA、CEAmRNA 表达阳性率分别为24.1%和21.3%,两者均阳性者13.9%。在108 例乳腺癌患者中,复发转移乳腺癌患者CK19mRNA 和（或）CEAmRNA 的表达高于可行手术切除乳腺癌患者。88 例可行手术切除乳腺癌患者中有22 例CK19mRNA 和（或）CEAmRNA 阳性,66例CK19mRNA 和CEAmRNA 两个指标检测结果均为阴性,经过术后不到一年的随访,

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