水稻小粒矮杆突变体sgdl(t)的表型分析及基因精细定位

水稻小粒矮杆突变体sgdl(t)的表型分析及基因精细定位

论文摘要

株高作为水稻重要的农艺性状之一,直接关系到水稻的产量,株高过高容易引起植株倒伏产量减产,适当矮化则可以达到抗倒、增产的目的。对矮杆水稻的研究有助于了解和完善矮源多样性,进而加以利用,以避免目前水稻矮杆品种单一的遗传特性,为水稻育种实现新的产量突破创造条件。因此发掘和鉴定新的矮杆基因有着十分重要的理论和实践意义。本实验室从日本晴(Nipponbare) T-DNA插入突变体库中筛选发现了一个小粒矮杆突变体,经潮霉素鉴定该突变表型与T-DNA插入无关,推测应为组培过程中引起的突变,暂命名为sgd1(t).本文分析了sgd1(t)的遗传特性,同时结合生理生化、细胞学形态观察和激素敏感性实验,初步剖析了矮秆形成的原因,并利用图位克隆的方法对目标基因sgd1(t)进行了精细定位。主要结果如下:(1)成熟期突变体sgd1(t)株高约为35厘米左右,为野生型日本晴(110厘米)的34.31%。与野生型日本晴相比,sgd1(t)植株表现为所有节间不能完全伸长,穗子及各节间均缩短,植株矮化;粒型圆小、颖壳厚实且呈现暗黄色;叶片短而宽、叶色深绿,叶绿素含量升高;穗短而紧凑,分蘖数略微增多,抽穗和开花时间均延迟,育性差且结实率很低;(2)电镜扫描观察茎杆及颖壳细胞学形态。结果发现,和日本晴相比,sgd1(t)茎杆细胞未能形成正常的细胞列,细胞形状发生改变,这是导致植株矮化的直接原因;颖壳表皮细胞排列紧密,呈不规则状,细胞形状发生改变,导致整体细胞呈现小突起状,而颖壳横切面细胞发育不正常,细胞形态发生变化,不规则,大小不一,从而导致细胞排列混乱,这是造成sgd1(t)颖壳表皮粗糙、厚实的直接原因;(3)通过不同浓度梯度的GA3和BL处理,发现sgd1(t)对赤霉素敏感,而对油菜素内酯不敏感,在GA3浓度为10-4(M)处理时能恢复到和日本晴相近的表型。因此,推测sgd1(t)的赤霉素信号传导途径是正常的,下一步待测内源赤霉素含量,以确定sgd1(t)基因是否与GA合成相关;(4)通过遗传分析实验表明该突变性状是由隐性单基因sgd1(t)控制;利用2010年sgd1(t)/Pusher F2群体及2011年sgd1(t)/Pusher F2:3群体,共1235株矮杆纯合隐性单株,最终将sgd1(t)定位在第9染色体短臂端着丝粒附近553kb的区域范围内。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 文献综述
  • 1.1 水稻矮杆突变体的来源
  • 1.1.1 自然突变
  • 1.1.2 人工诱变
  • 1.1.3 插入突变
  • 1.2 水稻矮杆基因的分类及命名
  • 1.2.1 水稻矮杆基因的分类
  • 1.2.2 水稻矮杆基因的命名
  • 1.3 水稻矮杆基因的遗传分析
  • 1.4 水稻矮杆植株的调控机制
  • 1.5 植物激素对水稻株高的调控
  • 1.5.1 赤霉素(GA)调控
  • 1.5.2 油菜素内酯(BR)调控
  • 1.6 水稻矮杆基因的报道、定位及克隆
  • 1.7 本研究的目的和意义
  • 第二章 材料与方法
  • 2.1 材料来源
  • 2.2 实验方法
  • 2.2.1 遗传分析及定位群体的构建
  • 2.2.2 茎杆、颖壳的细胞学扫描电镜
  • 2.2.3 碘一碘化钾染色法测定花粉育性
  • 2.2.4 GA处理实验
  • 2.2.5 BR处理实验
  • 2.2.6 农艺性状调查
  • 2.2.7 色素含量的测定
  • 2.2.8 DNA样品制备
  • 2.2.9 标记分析
  • 2.2.10 基因定位
  • 第三章 结果与分析
  • 3.1 小粒矮杆突变体sgd1(t)表型及各方面农艺性状
  • 3.2 小粒矮杆突变体sgd1(t)茎杆切面细胞学形态
  • 3.3 小粒矮杆突变体sgd1(t)颖壳细胞学形态
  • 3.4 小粒矮杆突变体sgd1(t)的激素敏感性
  • 3.4.1 GA敏感性
  • 3.4.2 BR敏感性
  • 3.5 小粒矮杆突变体sgd1(t)的遗传
  • 3.6 小粒矮杆突变体sgd1(t)的基因定位
  • 3.6.1 sgd1(t)基因的初定位
  • 3.6.2 sgd1(t)基因的精细定位
  • 第四章 全文小结与讨论
  • 4.1 全文小结
  • 4.1.1 sgd1(t)矮化表型的原因
  • 4.1.2 sgd1(t)颖壳表皮粗糙的原因
  • 4.1.3 激素调控sgd1(t)植株生长发育
  • 4.1.4 sgd1(t)基因遗传及分离
  • 4.2 全文讨论
  • 4.2.1 水稻新矮杆基因的发掘和利用
  • 4.2.2 本研究的创新及不足之处
  • 参考文献
  • 硕士在读期间发表的论文
  • 致谢
  • 相关论文文献

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