三种吞噬细胞功能缺陷病的临床特征及基因诊断

论文摘要

背景吞噬细胞包括组织中吞噬细胞、单核细胞及血液里中性粒细胞。先天性吞噬细胞缺陷病为一类原发性免疫缺陷病（Primary immunodeficiency disease,PID）,主要指吞噬细胞功能障碍性疾病,其相对发病率为1%～2%,慢性肉芽肿病最常见。吞噬细胞缺陷病包括数量和功能缺陷,数量缺陷可为先天遗传和后天生成,包括先天性嗜中性粒细胞减少症、周期性中性粒细胞减少症以及粒细胞缺乏症。原发性吞噬细胞功能缺陷病往往病情重,具有致死性。白细胞粘附分子缺陷Ⅰ型（Leukocyte adhesion deficiency,LADⅠ）是因整合素B2（CD18）分子亚单位基因缺陷致使白细胞趋化功能障碍,不能穿越血管内皮细胞向炎症部位趋化,导致感染灶迁延难愈;慢性肉芽肿病（Chronic granulomatous disease,CGD）是因吞噬细胞还原型辅酶Ⅱ（NADPH）氧化酶缺陷导致白细胞杀伤功能缺陷,对氧化酶阳性细菌难以杀灭;白细胞介素12受体β1链（IL-12Rβ1）缺陷病为IL-12受体缺陷导致巨噬细胞、T细胞IFN-γ介导的细胞免疫功能缺陷,使白细胞杀伤功能减弱,易患分支杆菌感染。三种病均属于吞噬细胞功能缺陷病,其共同临床特征为反复、慢性感染（以金黄色葡萄球菌、真菌为主）,但各有特征表现。LADⅠ特征表现为无痛性溃疡,感染部位无脓液形成;CGD特征表现为化脓性感染,感染部位肉芽肿形成;IL-12Rβ1缺陷特征表现为播散性卡介苗病。目前国内吞噬细胞缺陷病报道甚少,临床医师对该类疾病诊断及治疗缺乏经验,常导致误诊误治。本文就这三种吞噬细胞缺陷病的临床特征、诊断及治疗进行详细分析和总结,增强临床医师对该类疾病的认识,提高诊断、治疗率。目的:分析三种吞噬细胞功能缺陷病临床特征及基因突变,明确患者诊断及家庭成员携带情况,产前诊断避免该类患者出生,并指导其预防接种。方法:1.对三种吞噬细胞功能缺陷病的临床及实验室资料进行回顾性分析。2.流式细胞术检测LADⅠ患者及家系成员中性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞表面CD18表达;应用基因组DNA聚合酶链反应（PCR）直接测序法分析相应致病基因ITGB2。3.流式细胞术检测XCGD患者及家系成员中性粒细胞呼吸爆发试验;应用DNA-PCR直接测序法分析CYBB基因。4.流式细胞术检测IL-12Rβ1缺陷患者及家系成员IL-12Rβ1蛋白;应用DNA-PCR直接测序法分析IL-12Rβ1基因。结果:1.白细胞粘附分子缺陷Ⅰ型（LADⅠ）（1）CD18分子表达患者及其母亲、姑姑中性粒细胞表面分别为0.22%、99.11%、96.62%,淋巴细胞3.11%、90.18%、91.73%,单核细胞8.81%、99.68%、90.08%。（2）患者为ITGB2基因杂合突变,第6外显子787位核苷酸（G→A）,发生错义突变,使第239位丙氨酸突变为苏氨酸（A239T）,其母亲、外祖母均为该异常基因携带者。2.X-连锁慢性肉芽肿病（XCGD）（1）中性粒细胞氧化指数（NOI）患者1.14,父亲31.66,母亲14.0,祖母18.5,正常对照24.46。（2）患者CYBB基因在第10内含子和11外显子处发生拼接错误,且1329-1380段核苷酸缺失,发生移码突变,于484位提前出现终止密码（IVS10-2A>C,I439fsX484）,其母为该异常基因携带者。3.白细胞介素12受体β1（IL-12Rβ1）缺陷（1）患者永生化B细胞上IL-12Rβ1蛋白表达呈阴性,母亲有部分蛋白表达。（2）患者为IL-12Rβ1基因纯合单核苷酸替换突变,第9外显子853位核苷酸（C→T）,发生无义突变,使第285位谷氨酸突变为终止密码（CAG >TAG,Q285X）,其父、母均为该异常基因携带者,患者弟弟产前羊水DNA序列分析及产后脐血基因组DNA序列分析均正常。结论:1.LADⅠ特征表现为无痛性坏死、溃疡,感染部位无脓液形成,流式细胞术检测中性粒细胞表面CD18表达可快速有效诊断,通过基因诊断鉴定出1例新型ITGB2基因突者（A239T）。2.XCGD特征表现为肉芽肿及脓肿形成,中性粒细胞呼吸爆发试验比NBT实验能更快速准确诊断XCGD患者、发现携带者,基因诊断鉴定出1例CYBB基因突变患者（IVS10-2A>C,I439fsX484）。3.IL-12Rβ1缺陷特征表现为结核易感和严重、播散性卡介苗接种病,鉴定出我国首例新型IL-12Rβ1基因突变（Q285X）患者,发现此基因突变患者的IL-12Rβ1蛋白缺乏,确定此基因突变是引起患者发生播散性卡介苗接种病的根本原因。三种吞噬细胞缺陷病共同临床表现为反复感染,鉴别诊断困难,易误诊。流式细胞术是快速诊断这三种吞噬细胞缺陷病的重要手段,基因序列分析是确诊手段,三种病均为单基因突变PID,因此较易明确基因诊断及家庭成员携带情况,进而作好遗传咨询,产前诊断避免患者出生,指导其预防接种。

论文目录

• 英汉缩略语名词对照
• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一部分 白细胞粘附分子缺陷Ⅰ型临床特征及基因诊断
• 前言
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 结论
• 第二部分 X-连锁慢性肉芽肿病临床特征及基因诊断
• 前言
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 结论
• 第三部分 白细胞介素12 受体β1 缺陷病临床特征及基因诊断
• 前言
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 结论
• 全文小结
• 参考文献
• 文献综述：白细胞粘附分子缺陷病的诊治进展
• 致谢
• 攻读硕士学位期间研究成果及发表的学术论文目录