乳腺导管内增生性病变及浸润性乳腺癌中ERβ蛋白表达及其基因甲基化的研究

论文摘要

【目的】观察乳腺普通型导管增生（usual ductal hyperplasia，UDH）、非典型导管增生（atypical ductal hyperplasia，ADH）、导管原位癌（ductal carcinoma in situ，DCIS）及浸润性乳腺癌（invasive breast cainoma，IBC）中雌激素受体β（estrogen receptor beta，ERβ）基因启动子甲基化的变化及ERβ蛋白的表达，分析ERβ基因甲基化与ERβ蛋白表达之间，ERβ与ERα之间的相关性，旨在探讨ERβ在乳腺癌发生、发展过程的作用，以期为临床指导乳腺癌内分泌治疗提供实验依据。【材料与方法】选择齐鲁医院2002～2005年外科手术切除标本64例，其中乳腺导管内增生性病变44例（UDH 12例，ADH 8例，DCIS 24例），浸润性乳腺癌14例，正常乳腺组织6例（来自乳腺整形手术）。所选标本均经10％福尔马林固定，石蜡包埋。根据2003年WHO乳腺肿瘤病理诊断标准对所选病例的HE组织切片进行复习以确定诊断。从全部病例的石蜡包埋组织中提取DNA进行甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR，MSP）检测，对其中57例组织切片采用二步法进行ERβ的免疫组织化学染色。用SPSS软件对所得数据进行统计分析。【结果】在12例UDH中，7例检测到甲基化，甲基化率为58.3％；8例ADH中，5例检测到甲基化，甲基化率为62.5％；24例DCIS中，15例检测到甲基化，甲基化率为62.5％；14例IBC中，11例检测到甲基化，甲基化率为78.6％，6例正常乳腺组织中均未检测到ERβ甲基化。经统计学分析，正常乳腺组织和UDH、ADH、DCIS及IBC之间ERβ基因甲基化率有显著性差异；其余各组之间ERβ基因甲基化率无显著性差异。从正常乳腺组织到导管内增生性病变再到浸润性癌的发展过程中ERβ基因甲基化率呈增高趋势，经线性趋势检验有统计学意义（P＜0.05）。免疫组化染色结果显示，ERβ蛋白阳性例数百分率：6例正常乳腺组织全部阳性，阳性率为100％（6／6）；UDH为81.8％（9／11）；ADH为42.9％（3／7）；DCIS为45.5％（10／22）；IBC为27.3％（3／11）。ERβ蛋白阳性细胞表达率：正常乳腺组织中为86.4％，UDH为64.3％，ADH为25.0％，DCIS为27.2％，而在浸润性癌中为9.3％，从正常乳腺组织到导管内增生性病变再到浸润性癌的发展过程中ERβ蛋白的阳性例数百分率和阳性细胞表达率都呈下降趋势，且这种变化趋势具有统计学意义。在31例ERβ阳性的病例中，14例检测到甲基化，甲基化率为45.2％；在26例ERβ阴性的病例中，20例检测到甲基化，甲基化率为76.9％。经统计学分析ERβ阳性组和ERβ阴性组之间，ERβ基因甲基化率有显著性差异（P＜0.05）。统计分析结果提示，ERβ蛋白表达与ERβ基因甲基化两者之间呈负相关。结合以往我们的实验结果，经配对统计分析提示，ERβ蛋白表达与ERα蛋白表达不具有相关性，ERβ甲基化与ERα甲基化之间也不具有相关性（P＞0.05）。【结论】1．ERβ基因启动子在正常乳腺组织中未发生甲基化，而在乳腺癌变中出现甲基化，但尚有少部分乳腺癌的ERβ基因未发生甲基化。2．在乳腺导管内增生性病变中，ERβ基因甲基化已经存在，表明ERβ基因甲基化可能是癌变发生的早期事件。3．从正常乳腺组织到普通型导管增生、非典型导管增生、导管内原位癌直到浸润性乳腺癌的发展过程中，ERβ基因的甲基化率呈逐渐上升趋势，而ERβ蛋白表达呈下降趋势，这提示随着癌变的发展过程，ERβ基因的甲基化逐渐增加，ERβ蛋白表达逐渐丧失。4．从正常乳腺组织到增生性病变再到浸润性乳腺癌的发展过程中ERβ蛋白的失表达与ERβ基因甲基化有一定的关系，启动子的甲基化很可能是ERβ基因沉默的方式之一。5．ERβ的基因甲基化及蛋白表达与ERα基因甲基化及蛋白表达之间无明显关系，表明ERβ的作用不依赖于ERα的存在，提示ERβ蛋白在乳腺癌内分泌治疗中的作用可能与ERα不同。

论文目录

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• 材料与方法
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• 讨论
• 结论
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