论文摘要
目前,干扰素是国际上公认的治疗乙肝和丙肝以及部分肿瘤的首选药物,动物试验表明,口服干扰素具有较好的应用前景。本研究拟用人参愈伤组织表达干扰素期望为进一步提高口服干扰素的疗效打下基础。我们应用PCR 和:DNA 重组技术构建出含有人干扰素a 2b 基因的植物细胞表达载体pBIFN,然后转化根癌农杆菌LBA4404,利用农杆菌介导的转化法将人干扰素a 2b 基因导入人参愈伤组织细胞并整合到其基因组中。用G418 培养基筛选出抗性细胞株;以筛选的抗性细胞DNA 为模板进行:PCR,产物经DNA 测序表明人干扰素a 2b 基因已成功整合到人参愈伤组织细胞基因组中;经用RT-PCR.和琼脂糖凝胶电泳证明存在人干扰素a 2b 基因的转录产物;用WISH-VSV 系统检测分析表明表达的人干扰素a 2b 具有一定的生物学活性。说明我们已成功构建了含有人干扰素a 2b 基因的植物细胞表达载体并通过农杆菌介导的转化方法获得了能够表达人干扰素a 2b 的转基因人参愈伤组织细胞。
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