大气混合污染物对大鼠血清及肺组织肺表面活性蛋白B表达的影响

论文摘要

目的本实验制备大鼠染尘染毒后的动物模型,分析大气混合污染物对大鼠血清和肺组织中SP-B表达的影响,研究大气混合污染物对大鼠呼吸道损伤的作用机制,为控制大气污染、制定防治对策提供理论依据。方法本研究在乙醚麻醉下,通过将实验组大鼠注入含有PM2.5的生理盐水混悬液和吸入含有SO2、NO2、CO的空气混合气来建立动物染尘染毒模型。应用ELISA法测定血清和BALF中肺表面活性蛋白B（Pulmonary surfactant protein B,SP-B）水平,免疫组化法测定SP-B在肺组织中的表达,实时荧光定量RT-PCR检测肺组织SP-BmRNA的表达。结果染毒1d组、7d组和30d组大鼠BALF和血清中SP-B的含量与各自对照组相比较无明显变化;大鼠肺组织在染毒7d组SP-BmRNA的表达高于对照组和染毒1d组和30d组（P<0.05）;染毒1d组和7d组SP-B蛋白的含量明显低于对照组（P<0.01）,染毒30d组SP-B蛋白的含量高于对照组（P<0.05）,染毒1d组大鼠肺组织中SP-B的表达明显低于染毒7d和30d组（P<0.01）。结论1、大气混合污染物所致急性炎症反应中,大鼠血清及BALF中SP-B含量均无明显变化,提示SP-B作为一种疏水蛋白可能不是肺组织受损伤敏感生物指标。2、免疫组化方法显示,在大气混合污染物的早期炎症反应（1 d和7d）,由于肺组织受损,肺组织内的SP-B含量低于对照组,而在30d时,肺组织内SP-B的含量升高,说明肺组织的代偿性保护作用。3、在染毒7d时,肺组织中SP-B mRNA的表达水平上调,代偿性地合成SP-B蛋白。4、SP-B mRNA水平变化可作为早期肺损伤的敏感性生物学指标。SP-B是肺部表面活性物质的重要组分之一,受损肺组织早期可出现肺组织SP-B及SP-BmRNA表达的变化,为临床肺组织疾病的防治提供理论指导。

论文目录

• 提要
• 中文摘要
• Abstract
• 英文缩略词表
• 引言
• 第1章 文献综述
• 1.1 SP-B 蛋白质结构和功能
• 1.2 SP-B 的合成与调控
• 1.3 SP-B 的生理作用
• 1.3.1 促进气-液表面磷脂的吸附
• 1.3.2 参与管状髓磷脂的形成
• 1.4 SP-B 缺乏与肺疾病
• 1.4.1 SP-B 缺乏与急性呼吸窘迫综合症
• 1.4.2 SP-B 缺乏与特发性肺纤维化
• 1.4.3 SP-B 缺乏与胎粪吸入综合症
• 1.4.4 SP-B 功能异常与哮喘
• 1.4.5 SP-B 缺乏与肺水肿
• 1.5 展望
• 第2章 材料与方法
• 2.1 实验技术路线图
• 2.2 主要仪器与设备
• 2.3 主要试剂
• 2.4 试剂配制
• 2.5 实验动物
• 2.6 实验方法
• 2.6.1 PM2.5 的采集及混悬液的制备
• 2、SO₂、CO 空气混合气'>2.6.2 制备NO₂、SO₂、CO 空气混合气
• 2.6.3 动物分组及模型的制备
• 2.6.4 标本采集
• 2.6.5 指标检测
• 2.7 统计学分析
• 第3章 结果
• 3.1 大鼠血清中SP-B 的含量
• 3.2 大鼠BALF 中SP-B 的含量
• 3.3 大鼠肺组织中SP-B 蛋白的表达
• 3.4 大鼠肺组织中SP-B mRNA 的表达
• 第4章 讨论
• 第5章 结论
• 参考文献
• 作者简介及在学期间发表的学术论文
• 致谢