论文摘要
【目的】建立和评价海人酸致颞叶癫癎大鼠模型,观察海马癫癎灶高频电刺激对大鼠癫癎发作、脑电及海马苔藓纤维出芽的影响,初步探讨其可能的机制。【方法】用脑立体定位海马局部注射海人酸的方法,诱导雄性成年SD大鼠癫癎发作,建立大鼠颞叶癫癎模型,以高频电刺激海马癫癎灶为干预手段,观察大鼠不同时间点癫癎发作特点,用视频脑电图描记大鼠的皮层电活动,用HE、Nissl染色以及改良Timm染色法观察海马组织病理改变,用荧光实时定量PCR技术检测海马sema3A、GAP-43 mRNA表达的改变。【结果】1.行为变化:海人酸给药后,点燃大鼠出现急性期、静止期、慢性期三期的行为改变。电刺激可减少慢性期自发性癫癎发作次数50.78%。2.脑电图改变:急性期可出现持续的尖波、棘波、棘慢波、高波幅慢波发放;静止期脑电表现为大致正常,偶见低波幅尖波、棘慢波发放;慢性期主要表现阵发性棘慢波、尖波。电刺激可减少慢性期癎性放电次数58.05%。3.病理改变:点燃大鼠注射海人酸14天后海马癫癎灶HE染色可见神经元变性坏死、胶质细胞增生,同时有筛状脑软化灶形成;CA1区Nissl染色见较多锥体神经元死亡,电刺激组相对海人酸组神经元死亡较少;苔藓纤维出芽4天时开始出现,到14天时最明显（p<0.01）,电刺激可在一定程度上阻止苔藓纤维出芽（p<0.05）。4.分子水平变化:海人酸组在1d时出现sema3A mRNA表达下调（p<0.01）、GAP-43 mRNA表达上调（p<0.01）。smea3A到7天时恢复正常,持续到14天,GAP-43 mRNA表达上调1d最为明显（p<0.01）,以后逐渐回落但仍维持在高于正常水平,持续到14天（p<0.01）。电刺激在一定程度上可以抑制sema3A mRNA表达下调（p<0.05）,4天时即可恢复正常,持续到14天,而对GAP-43 mRNA表达变化没有影响（p>0.05）。【结论】1.通过海马注射海人酸诱导大鼠癫癎发作建立的癫癎模型,能较好地模拟人类颞叶癫癎特点,是理想的颞叶癫癎模型。2.高频电刺激海马癫癎灶在一定程度上可以控制癫癎发作。3.通过抑制smea3A mRNA表达下调,减少海马苔藓纤维出芽,抑制海马突触重构,防止异常兴奋通路的形成,降低癫癎发作敏感性,可能是高频电刺激控制癫癎发作的作用机制之一。