本文主要研究内容
作者周芝海,谭耀荣,郑瑶瑶,曾繁文,麦凯杰,马静云（2019）在《猪急性腹泻综合征冠状病毒核衣壳蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备》一文中研究指出：为了制备猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)核衣壳(N)蛋白多克隆抗体,采用PCR方法扩增SADS-CoV/CN/GDGL/2017毒株N基因片段,并对N基因的序列以及N蛋白氨基酸突变位点进行分析。随后,将N基因片段克隆到原核表达载体pET-32a(+)构建重组质粒,测序验证后转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行原核表达,用Ni-NTA亲和层析柱纯化N蛋白,通过免疫BALB/c小鼠获得多克隆抗体。结果表明,扩增的N基因片段和所构建的重组质粒正确无误,成功诱导表达出可溶性重组蛋白SADS-CoV-N,分子质量约为67 ku,最佳诱导时间为6 h。Western-blot以及间接免疫荧光试验结果表明,该多克隆抗体能特异性检测SADS-CoV,证明重组蛋白有良好的免疫原性。本研究为后续建立SADS-CoV快速诊断方法及该病毒致病机制的深入研究奠定基础。
Abstract
wei le zhi bei zhu ji xing fu xie zeng ge zheng guan zhuang bing du (SADS-CoV)he yi ke (N)dan bai duo ke long kang ti ,cai yong PCRfang fa kuo zeng SADS-CoV/CN/GDGL/2017du zhu Nji yin pian duan ,bing dui Nji yin de xu lie yi ji Ndan bai an ji suan tu bian wei dian jin hang fen xi 。sui hou ,jiang Nji yin pian duan ke long dao yuan he biao da zai ti pET-32a(+)gou jian chong zu zhi li ,ce xu yan zheng hou zhuai hua zhi da chang gan jun BL21(DE3)gan shou tai xi bao zhong jin hang yuan he biao da ,yong Ni-NTAqin he ceng xi zhu chun hua Ndan bai ,tong guo mian yi BALB/cxiao shu huo de duo ke long kang ti 。jie guo biao ming ,kuo zeng de Nji yin pian duan he suo gou jian de chong zu zhi li zheng que mo wu ,cheng gong you dao biao da chu ke rong xing chong zu dan bai SADS-CoV-N,fen zi zhi liang yao wei 67 ku,zui jia you dao shi jian wei 6 h。Western-blotyi ji jian jie mian yi ying guang shi yan jie guo biao ming ,gai duo ke long kang ti neng te yi xing jian ce SADS-CoV,zheng ming chong zu dan bai you liang hao de mian yi yuan xing 。ben yan jiu wei hou xu jian li SADS-CoVkuai su zhen duan fang fa ji gai bing du zhi bing ji zhi de shen ru yan jiu dian ding ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国兽医科学的周芝海,谭耀荣,郑瑶瑶,曾繁文,麦凯杰,马静云，发表于刊物中国兽医科学2019年09期论文，是一篇关于猪急性腹泻综合征冠状病毒论文,蛋白论文,原核表达论文,多克隆抗体论文,中国兽医科学2019年09期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国兽医科学2019年09期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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