论文摘要
目的:建立大鼠胚脑皮层神经干细胞体外培养模型及鉴定技术;探讨其在表皮生长因子（EGF）作用下的增殖分化特性,为应用神经干细胞移植治疗神经疾病提供基础。 方法:取孕13.5-14.5天Sprague-Dawley（SD）大鼠的胚胎大脑皮层神经细胞,采用含有终浓度为20ng/ml有丝分裂源表皮生长因子（EGF）和1%B27的无血清高糖DMEM/F12培养基体外培养,筛选神经干细胞;Nestin免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞特异性标记;单细胞连续克隆实验及BrdU免疫标记证实神经干细胞自我增殖能力;诱导细胞分化,MAP-2及GFAP免疫标记了解细胞向神经元及神经胶质细胞的分化能力。 结果:（1） 孕13.5-14.5天SD大鼠胚脑皮层分离的神经干细胞体外悬浮培养4—5天有大量细胞球形成;制备成单细胞悬液贴壁培养4小时内nestin免疫细胞化学标记,鉴定结果90%以上呈阳性表达,证实此细胞神经干细胞属性;倍比稀释法单细胞连续克隆实验,观察一周内细胞生长,有形状规则的神经细胞球形成;BrdU掺入实验,85%的细胞核呈BrdU免疫染色阳性,提示此来源NSCs具有增殖能力;细胞悬液贴壁培养一周,MAP-2和GFAP免疫细胞化学染色检测,证实其可分化为神经元和神经胶质细胞。（2） 去除EGF后体外培养分离胎鼠皮层细胞,发现生长速度明显减慢,细胞24小时贴壁分化及死亡率明显增加;细胞球形成慢且形状不规则;所培养细胞在第四次传代时几乎完全死亡。（3） 无血清条件下神经干细胞诱导分化后约40%表达MAP-2,60%表达GFAP;在细胞悬液中加入10%FBS培养,发现细胞贴壁加快,分化速度亦迅速,一周后90%以上分化细胞表达GFAP,表达MAP-2的细胞不足10%。 结论:孕13.5—14.5d大鼠胚胎大脑皮层可分离培养出神经干细胞;并具有增殖、
论文目录
相关论文文献
- [1].约氏疟原虫红内期体外培养的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2017(04)
- [2].蜂胶对体外培养的血管内皮细胞增殖活力的影响[J]. 北京农学院学报 2009(02)
- [3].促结缔组织增生型成釉细胞瘤细胞的体外培养与鉴定[J]. 中国口腔颌面外科杂志 2008(01)
- [4].改构型酸性成纤维细胞生长因子对体外培养肝细胞增殖活性的影响[J]. 安徽医科大学学报 2017(11)
- [5].体外培养过程中许旺细胞S100表达规律研究[J]. 现代生物医学进展 2013(22)
- [6].积雪草甙、羟基积雪草甙对体外培养人胚胎成纤维细胞的影响[J]. 中国医疗前沿 2011(02)
- [7].影响间日疟原虫红内期短期体外培养的虫源因素研究[J]. 中国血吸虫病防治杂志 2010(01)
- [8].苦参碱对体外培养的强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞增殖的影响[J]. 北京中医药 2010(05)
- [9].成人骨髓间充质干细胞体外培养及诱导分化的研究进展[J]. 河南科技大学学报(医学版) 2009(02)
- [10].碱性成纤维细胞生长因子对人体外培养牙髓细胞增殖的影响[J]. 现代口腔医学杂志 2008(02)
- [11].仿制肉的生产技术及其发展趋势[J]. 食品与发酵工业 2019(22)
- [12].六味地黄丸水提液对体外培养人牙周膜成纤维细胞增殖的影响[J]. 生物技术世界 2014(04)
- [13].造血干细胞体外培养模式的研究进展[J]. 现代生物医学进展 2011(07)
- [14].氯喹抑制体外培养星形胶质细胞的激活[J]. 基础医学与临床 2011(10)
- [15].温度对体外培养精原细胞增殖和凋亡的影响[J]. 解剖学杂志 2008(06)
- [16].体外培养小鼠精原干细胞的研究[J]. 畜牧与兽医 2016(07)
- [17].肌肉来源干细胞表面抗原-1阳性与阴性细胞体外培养成肌特性的比较[J]. 口腔生物医学 2012(03)
- [18].成骨细胞的体外培养与鉴定[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2011(33)
- [19].体外培养角膜内皮细胞的鉴定方法[J]. 四川解剖学杂志 2011(04)
- [20].大黄素对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞的影响[J]. 中国药房 2010(43)
- [21].人脐静脉内皮细胞的体外培养[J]. 中西医结合心脑血管病杂志 2008(03)
- [22].体外培养人成纤维细胞模型的建立[J]. 现代医院 2019(12)
- [23].锌及碱性成纤维细胞生长因子单独或联合应用体外培养骨髓间充质干细胞的生长及增殖[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2010(27)
- [24].人幼儿心肌细胞体外培养的实验研究[J]. 安徽医学 2009(01)
- [25].连续应力对体外培养成纤维细胞生长增殖的影响[J]. 济宁医学院学报 2008(02)
- [26].高糖抑制体外培养Müller细胞生长[J]. 基础医学与临床 2008(10)
- [27].人牙周膜成纤维细胞体外培养的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志 2012(05)
- [28].不同浓度川芎嗪对体外培养骨髓间充质干细胞增殖的影响[J]. 中药新药与临床药理 2010(05)
- [29].黄芪多糖对体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞增殖的影响[J]. 中国畜牧兽医 2009(03)
- [30].VEGF对体外培养的脐静脉内皮细胞增殖和迁移能力的影响[J]. 心脏杂志 2008(06)