JAB1对糖皮质激素受体转录活性及功能调控的实验研究

论文摘要

糖皮质激素（Glucocorticoids, GC）是临床上常用抗炎、抗免疫反应药物,普遍认为GC 的抗炎效应是通过糖皮质激素受体（Glucocorticoid receptor, GR）调控多种炎性因子的表达。以往的研究表明严重创伤后多种器官组织GR 表达减少,尤其是GR 核转位减少,提示GR 的转录激活能力减弱,但其具体的分子机制尚不清楚。激活的GR也可直接与其它转录因子相互作用,如核因子-?B（nuclear factor ?B, NF-?B）和活化蛋白-1（activator protein-1,AP-1）,AP-1 和NF-?B 是调控炎性基因表达的重要转录因子,GR 与转录因子之间的相互作用可能通过它们共同的辅活化因子来介导。c-Jun激活区结合蛋白1（c-Jun activation domain-binding protein l,JAB1）是一种多功能蛋白质,能与多种蛋白质发生相互作用,调控多种细胞内信号转导通路。JAB1 也能增强多种转录因子的活性如核受体、AP-1 和NF-?B。以往的研究表明JAB1 能与GR-LBD在COS-7 细胞中特异性地发生相互作用,因此,JAB1 均能与GR、AP-1 和NF-?B 发生相互作用,提示JAB1 可能在炎症反应的发生发展中起重要作用,但JAB1 对GR 的具体作用目前仍不清楚。本研究的目的是为了进一步明确JAB1 对GR 转录活性及功能的调控作用及JAB1和GR 在创伤后应激反应紊乱中的作用,阐明安定-氯胺酮对严重烧伤早期应激和炎症反应的调控作用及分子机制,为调控严重创伤后早期应激反应紊乱提供新的途径。本研究首先应用JAB1、hGRa 表达质粒与GRE-CAT 报告质粒共转染COS-7 细胞,通过CAT ELISA方法观察JAB1 及LPS 对GR 转录激活活性的影响。其次通过电穿孔方法将JAB1 表达质粒转染小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,观察JAB1 高表达对GR 表达水平及功能的影响,并同时观察对RAW264.7 细胞分泌致炎细胞因子TNF-a 及IL-6的影响。最后以严重烧伤小鼠为创伤动物实验模型,旨在观察烧伤后早期肝脏、肺及腹腔巨噬细胞中JAB1、GR 的变化特点及相互关系以及安定-氯胺酮对其影响,进一步明确JAB1、GR 在严重创伤早期的相互关系。主要实验结果: 1. 采用脂质体法将pCDNA3.1-JAB1、pCMV-hGRa 和pMAMneo-CAT GRE报告

论文目录

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• 论文正文 JA81 对糖皮质激素受体转录活性及功能调控的实验研究
• 前言
• 第一部分 JA81、LPS 对糖皮质激素受体转录活性的影响
• 材料和方法
• 实验结果
• 讨论
• 第二部分 JA81 基因转染RAW264.7 细胞对其糖皮质激素受体表达及炎性细胞因子分泌的影响
• 材料和方法
• 实验结果
• 讨论
• 第三部分 严重烧伤早期小鼠JA81 及糖皮质激素受体表达的变化及安定-氯胺酮对其的影响
• 材料和方法
• 实验结果
• 讨论
• 全文结论
• 致谢
• 照片
• 参考文献
• 文献综述 JA81 蛋白的研究进展
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的文章