论文摘要
研究目的:评价自噬在开放线粒体K+ATP通道保护缺血再灌注损伤中的作用资料与方法:取220-250克Sprague-Dawley雄性大鼠,建立Langendorff离体心脏灌流模型,取32只造模成功心脏,随机分为4组（n=8）。心脏血流动力学稳定30min后分别给予以下处理:对照缺血组（C组）,100umol/L二氮嗪灌流10min（D组）,二氮嗪加15mg/kg自噬特异性阻断剂渥曼青霉素（wortmannin,WT,15μg/kg处死前30min腹腔注射,DW组）,单纯渥曼青霉素组（使用方法同前,W组）。所有心脏均缺血20min,再灌注30min。Medlab生理记录仪记录血流动力学变化。再灌注结束后称取100mg心肌组织匀浆后检测组织中SOD、MDA含量,免疫组化、免疫印迹检测自噬相关蛋白beclin1表达,透射电子显微镜观察自噬小体。研究结果:与其他各组比较,二氮嗪可以显著改善缺血再灌注30分钟后血流动力学,SOD、MDA含量显著增加,电镜下可见大量自噬小体生成,免疫组化与Western blot检测显示自噬相关蛋白beclin-1表达较其他各组差异有统计学意义。W组与DW组血流动力学指标,SOD、MDA含量与C组无显著差异。W组beclin-1蛋白表达较DW组与C组差异有统计学意义。结论:线粒体膜K+ATP开放剂二氮嗪可通过促进自噬,减弱离体大鼠心肌缺血再灌注后ROS生成,从而起到心肌保护作用。
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