导读:本文包含了甜菜遗传转化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:甜菜,遗传转化,StGCS-GS,谷胱甘肽合成酶
甜菜遗传转化论文文献综述
刘大丽,马龙彪[1]（2018）在《谷胱甘肽合成酶StGCS-GS对甜菜遗传转化的研究》一文中研究指出嗜热链球菌γ-谷氨酰半胱氨酸谷胱甘肽合成酶Streptococcus thermophilusγ-glutamylcysteine synthetase-glutathione synthetase(StGCS-GS)是一类新型的非限速谷胱甘肽合成酶,其产物GSH在包括干旱在内的众多非生物逆境中发挥着重要作用。本研究利用Gateway系统构建了p GWB2重组植物表达载体。以农杆菌介导法对甜菜叶柄进行遗传操作,将编码该酶的StGCS-GS基因(Genbank accession no.GQ848551)转化到甜菜体内。研究结果表明,当农杆菌侵染浓度OD600值为0.6,侵染时间10 min,共培养4 d后,甜菜叶柄外植体经过农杆菌侵染,在筛选培养基上所获得的抗性芽比率相对最高。通过对潮霉素抗性植物基因组DNA的PCR检测,研究共获得7个转基因甜菜株系。(本文来源于《中国糖料》期刊2018年05期）
伍国强,焦琦,刘海龙,蔺丽媛[2]（2018）在《甜菜液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白BvNHX基因RNAi载体构建及遗传转化》一文中研究指出液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白介导的Na+区域化在植物适应盐胁迫中起着重要作用。本研究以甜菜(Beta vulgaris L.)叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因BvNHX的靶片段,以中间载体pHANNIBAL和表达载体pART27为基础,采用酶切和连接的方法,构建CaMV 35S启动子驱动的含BvNHX基因片段反向重复序列的RNAi植物表达载体pARB,通过冻融法将其导入根癌农杆菌GV3101,并转入甜菜幼苗获得BvNHX-RNAi转化株系。半定量RT-PCR分析结果表明该干扰载体能特异性地导致转化植株BvNHX基因表达的沉默。这将为解析BvNHX在甜菜体内Na+区域化中的功能及其在甜菜适应盐渍生境中的作用机制提供帮助。(本文来源于《分子植物育种》期刊2018年18期）
呼斯乐[3]（2015）在《甜菜高效组培再生体系建立及遗传转化研究》一文中研究指出甜菜(Beta vulgaris L.)是世界上重要的糖料作物之一,也是我国第二大糖料作物,在北方农业生产中占有重要地位。近2-3年随着甜菜机械化种植模式的推进,甜菜生产中病虫草害日渐凸显。实践证明,转基因是解决作物草害和虫害的最有效手段,因此,针对甜菜生产上主要虫害及杂草为防治对象,开展甜菜转基因生物技术研究势在必行,也是甜菜产业长远发展的需求。目前,植物基因工程的遗传转化技术己基本成形,但甜菜转基因品种的产业化生产一直未见报道,甜菜转基因品种未能产业化应用是由多种原因造成的,其中甜菜很难建立起高效的遗传转化再生体系和未能找到—个合适的高效的遗传转化方法就是其中重要的两个原因,本研究通过对5种不同基因型甜菜的多种外植体进行再生培养,研究分析影响甜菜外植体再生的因素,建立并优化了甜菜植株再生体系；对已构建Bt基因crylAc甜菜表达载体pSKBt进行了酶切鉴定,并通过农杆菌介导法对甜菜进行了遗传转化;研究了农杆菌介导甜菜的不同转化条件,建立甜菜转基因体系,为今后甜菜转基因品种的产业化生产奠定基础。主要研究结果如下：1、本研究利用30407、30427、32449、35250、44321五种基因型不同的甜菜品系为材料,通过对五种材料外植体分化再生的组织培养分析研究,筛选出高诱导率基因型材料1份(35250)；以35250作为材料,筛选出适用于此品系的最适诱导分化筛选培养基1种：MS+0.5mg/L NAA+1.5mg/L 6-BA;继代培养基1种MS+0.5mg/LNAA+1.0mg/L 6-BA-生根培养基1种MS+1.0mg/L NAA。2、酶切鉴定含Bt基因crylAc的甜菜表达载体pSKBt,证明了该载体的正确性。采用农杆菌介导法对甜菜进行了遗传转化,优化了农杆菌侵染甜菜的最佳条件为：OD600=0.5-0.7,最适侵染时间25min；经抗性筛选、诱导分化,得到—批抗性芽,多次继代培养后,最终获得24株抗性组培苗。3、利用PCR扩增技术检测抗性植株,检测出5株含Bt基因crylAc的阳性组培苗。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2015-06-01）
张海霞,张少英,付增娟[4]（2013）在《乙酰丁香酮对甜菜遗传转化的影响》一文中研究指出乙酰丁香酮(AS)是农杆菌介导转基因技术的一种有效的酚类化合物。以甜菜叶柄为受体材料,研究了共培养阶段AS和pH对转化频率的影响。结果表明,AS和pH对转化过程有明显影响;当AS浓度为0.2 mmol/L、pH值为5.6时转化率最高。(本文来源于《广东农业科学》期刊2013年22期）
郝慧[5]（2012）在《甜菜蔗糖磷酸合成酶（SPS）基因的克隆及其遗传转化》一文中研究指出甜菜是我国糖料作物之一，在我国北方地区种植，在育种过程中，主要的目的是培育出高产、高糖、高品质的新品种甜菜。在甜菜的生产中病虫害较多，从而影响到甜菜的质量和品质。为了使植物生长性状得到改变，基因工程是最直接有效的手段。由于基因工程具有周期短，见效快等优点，所以，基因工程在植物新品种选育中是一条有效的途径。由于建立甜菜植株再生体系比较困难，较低的遗传转化效率，具有较差的重复性。因此，甜菜植株再生体系及遗传转化体系的建立，转化并培育出优质、高产的甜菜新品种是许多研究者的目标，具有很大意义。本研究是通过RT-PCR扩增技术，将甜菜的蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因克隆出来，进行重组质粒的构建，将目的基因利用农杆菌介导法导入甜菜，转化条件得到了优化，建立了稳定的甜菜叶柄遗传转化体系，获得转蔗糖磷酸合成酶基因的甜菜再生植株。主要研究结果如下：1.对SPS基因进行扩增利用RT-PCR方法从甜菜嫩叶片总RNA中克隆出甜菜的SPS基因。进行测定序列，该序列与甜菜SPS基因编码区的核苷酸序列其同源性可达100%。2.构建植物表达载体利用pMD18-TVector克隆载体的介导，将SPS基因与质粒pBI121连接，构建了以CaMV35S为启动子和Tnos为终止子的植物双元表达载体，该载体含有选择标记基因nptII。3.农杆菌介导法优化了甜菜叶柄遗传转化体系结果显示：将生长到对数生长期的农杆菌菌液重悬稀释，确定了浓度OD600值为0.6；叶柄外植体经过48h的预培养，确定侵染时间为5min；确定了共培养培养基中乙酰丁香酮的浓度为100μmol/L；确定了22℃～25℃共培养4d；经过头孢霉素的抑菌，确定了200mg/L的Kan浓度的筛选。4.对获得的阳性植株检测用农杆菌介导法将SPS基因转入甜菜，经过筛选培养共获得27株抗Kan的甜菜稳定再生植株。提取27株基因组DNA，经PCR检测有8株呈阳性植株，PCR阳性率为29%。(本文来源于《黑龙江大学》期刊2012-05-16）
芦宝琳[6]（2012）在《抗草甘膦基因甜菜遗传转化的研究》一文中研究指出种植田中的杂草是导致甜菜产量和含糖量下降的重要原因之一。通过基因工程手段获得抗草甘膦除草剂的甜菜品种成为有效的除去田间杂草，解决杂草对甜菜产量和含糖的影响。本研究以甜菜无菌苗的叶柄为外植体材料，通过农杆菌介导方法将EPSPS基因转入甜菜外植体内，对农杆菌转化条件、方法及甜菜外植体再生条件进行较为系统地比较研究，建立与优化了转基因甜菜再生体系，从而获得转基因甜菜的再生植株。1、转基因甜菜再生体系的建立与优化本研究利用DM1-9、O-68和DY5-O叁种不同基因型的甜菜品系为试验材料。通过对叁个品系甜菜不同部位、不同培养基和不同苗龄进行试验，总结出最适合应用于转基因条件的甜菜品系为DM1-9和O-68。转基因甜菜材料外植体制备用无菌苗培养的优化方法为：以DM1-9和O-68为材料，利用筛选出的再生培养基MS+1mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+100mg/LKan+500mg/LCb、继代培养基MS+6-BA0.5mg/L+NAA1.0mg/L+100mg/LKan+500mg/LCb及生根培养基MS+1.0mg/LNAA使得该甜菜品系达到最大的转化效率。通过农杆菌侵染转基因试验，筛选出转基因操作时最佳的农杆菌侵染条件为：OD600=0.3时侵染10min。2、外植体中农杆菌的最佳去除方法筛选出农杆菌与甜菜外植体共培养操作后的农杆菌最佳去除方法为：500mg/LCB清洗1次无菌水冲洗3次，300mg/LCef清洗1遍，无菌水冲洗3次后用无菌滤纸吸干。3、获得转入EPSPS基因的甜菜再生植株利用农杆菌侵染方法，根据建立的最佳遗传转化方法和条件进行甜菜转基因试验，获得转抗草甘膦基因的甜菜植株。对所获得的卡那霉素抗性转基因再生植株中提取的总DNA进行PCR检测，以EPSPS基因两端序列设计引物，部分卡那霉素抗性再生植株扩增出目的基因片段。(本文来源于《黑龙江大学》期刊2012-05-12）
殷东林,祝建波,王爱英,向本春[7]（2011）在《蔗糖转运蛋白基因VvSUC11和VvSUC12双价植物表达载体的构建及在甜菜中的遗传转化》一文中研究指出将葡萄Vitis vinifera L.的蔗糖转运蛋白基因VvSUC11和VvSUC12与甘薯Ipomoea batatas L.Lam.的甘薯贮藏蛋白(Sporamin)基因的根部特异性启动子命名为SP1和SP2重组。以pCAMBIA2301为起始载体,构建了pCAMBIA2301-SP1-VvSUC11-SP2-VvSUC12用农杆菌介导法转化了甜菜Beta vulgaris L.品种KWS-9103,发现预培养4 d,侵染时农杆菌的浓度OD600值为0.5,附加0.005%表面活性剂Silwet L-77,延迟筛选4 d,转化效率最高,可达42%。对在卡那霉素中分化并生根的甜菜植株进行PCR和RT-PCR检测,证明目的基因已整合到甜菜中并表达,为进一步研究该基因在甜菜Beta vulgaris中的功能奠定了基础。(本文来源于《生物工程学报》期刊2011年08期）
李建平[8]（2010）在《甜菜蔗糖磷酸合酶基因的克隆、表达及其遗传转化》一文中研究指出甜菜是重要的经济作物,蔗糖合成效率的高低是评判甜菜品种好坏的标准之一,因此,研究与蔗糖合成相关的酶也是非常必要的。蔗糖磷酸合酶(SPS)是植物蔗糖合成的关键酶,它在调控光合产物的最终分配、促进库细胞中蔗糖的积累方面具有重要的作用。本研究从以下几方面开展对蔗糖磷酸合酶基因的研究。1. RT-PCR克隆得到甜菜蔗糖磷酸合酶基因(BvSPS1)的克隆,对该基因的序列分析表明:BvSPS1开放阅读框全长3138 bp,编码1045个氨基酸,所推导的蛋白质分子量为118 kDa,所推测的BvSPS1氨基酸序列跨膜区域位于第561-593位氨基酸之间。与酿酒葡萄(Vitis vinifera)的序列同源性是75.45%、烟草(Nicotiana tabacum)为74.59%。2.利用半定量RT-PCR分析了BvSPS1基因在甜菜中的表达,结果显示,该基因在根部的表达水平远远高于叶柄及叶,表达方式属于组织特异性表达。对甜菜各部位的SPS酶活性分析同样表明该酶在根部的活性高于其它部位。葡萄糖及蔗糖对BvSPS1基因的表达产生不同的影响,葡萄糖能够强化BvSPS1基因的表达,且表达量与处理时间相关。3.建立了甜菜的遗传转化体系,研究结果表明叶柄的再生能力较强,甜菜叶柄在6-BA 1.0 mg/L与IAA 0.3 mg/L激素组合的培养基上,再生率较高,均提高至约14.0%。利用农杆菌介导方法将BvSPS1基因导入甜菜,并获得了转基因植株,PCR结果为阳性。本研究得出的结论从分子水平初步阐述了BvSPS1基因的特性和功能,同时通过将该基因导入甜菜获得转基因甜菜,为进一步研究该基因功能奠定基础。(本文来源于《新疆农业大学》期刊2010-06-01）
阮美煜,谢亚红,徐全乐,高楠,王新宇[9]（2009）在《同源异型盒基因PttKN1对红叶甜菜和彩叶草的遗传转化》一文中研究指出KNOX基因家族是一类植物发育调控基因,分为Ⅰ类和Ⅱ类。Ⅰ类KNOX基因对分生组织的形成和维持必不可少。PttKN1(Populus tremula×tremuloides KNOTTED1)是从杂交杨树维管束中分离到的Ⅰ类KNOX家族基因。为研究多年生木本植物Ⅰ类KNOX基因的(本文来源于《细胞·生命·健康——第十一届中国细胞生物学学术大会暨2009西安细胞生物学国际会议论文集》期刊2009-07-05）
崔杰[10]（2008）在《抗虫Bt基因cry1Ac甜菜叶绿体遗传转化与表达研究》一文中研究指出甜菜（Beta vulgaris L.）是我国重要的糖料作物，也是虫害非常严重的作物之一，尤其是甘蓝夜蛾的危害更为严重，化学防治达不到预期效果，还严重污染环境。随着人类生态及环保意识的加强，大力发展绿色农业已经成为新时代的要求，因而，培育高抗虫甜菜新品种成为一项重要研究课题，基因工程方法培育抗虫品种是害虫防治的有效途径。本论文首次尝试对未知叶绿体基因组序列的甜菜进行抗虫基因的叶绿体转化与表达研究。以克隆的甜菜叶绿体基因atpB/rbcL为同源片段，以作用鳞翅目的Bt基因cry1Ac为外源目的基因，以aadA基因为筛选标记基因构建了甜菜叶绿体定点整合转化载体，基因枪法转化甜菜，通过抗性筛选、分子检测及抗虫试验等，最终获得了甜菜抗虫转基因再生植株及后代，并对转基因植株后代抗虫基因遗传稳定性进行了研究，以及对叶绿体转化技术的机理进行了探索，最终建立了甜菜叶绿体转化体系。通过对甜菜不同基因型、外植体及培养基激素组合等再生影响因素的筛选，优化了各类培养基配方，建立了以甜菜叶柄为外植体的高效不定芽直接再生体系，为转基因再生植株的获得打下了基础。通过抗性筛选试验确定了甜菜遗传转化中适宜的筛选剂（壮观霉素和卡那霉素）及其使用浓度（30mg/L和50mg/L），确定了甜菜叶绿体转化的筛选标记基因为aadA基因。通过比较试验，借鉴已有植物叶绿体DNA提取方法优点，并结合甜菜特性（糖分含量较高），研究建立了甜菜叶绿体DNA分离纯化方法。试验证明：利用该方法获得的甜菜叶绿体DNA不仅纯度高，得率提高3倍以上，可直接用于分子生物学研究及基因组测序。由于甜菜叶绿体基因组全序列未知，本研究首先利用高等植物叶绿体基因组在进化过程中的高度保守的特性，借助生物信息学软件分析了烟草、水稻、菠菜、玉米等高等植物的叶绿体基因组全序列资料，筛选到紧密连锁的atpB基因与rbcL基因、rps7基因与ndhB基因两个位点，并参照烟草、水稻和菠菜叶绿体基因组全序列资料中相应区段核苷酸序列，分别设计引物，PCR方法成功克隆了甜菜叶绿体中与光合作用有关的重要功能基因atpB和rbcL及rps7和ndhB的完整基因，测序、序列分析及同源性比较证实：得到的结果与预期相符。其中，atpB和rbcL基因序列已提交到GenBank，登录号分别为DQ067451、DQ067450，atpB和rbcL基因的克隆同时也为研究甜菜光合作用机理提供依据。采用分子生物学手段成功构建了抗虫Bt基因cry1Ac甜菜叶绿体转化载体，该载体包含有同源片段atpB/rbcL、Bt基因cry1Ac表达盒（Prrn-cry1Ac-psbA3’）、筛选标记基因aadA表达盒（Prrn-aadA-TpsbA），采用基因枪法转化甜菜，通过多次继代及2轮分化与多次继代结合的抗性筛选，获得一批转基因抗性植株。建立了甜菜叶绿体遗传转化体系，为今后继续开展甜菜叶绿体遗传转化研究提供了依据。转基因再生植株外源基因的PCR检测、Southern blot、Northern blot、Western blot，结果表明：抗虫Bt基因cry1Ac已定点整合到甜菜叶绿体基因组中，并得到了表达。以二龄末甘蓝夜蛾为试虫，通过人工饲虫法，分别检测克隆工程菌及转基因再生植株的杀虫性，结果表明：以克隆菌菌体蛋白涂抹甜菜叶片饲喂的二龄末幼虫，幼虫平均死亡率达到90%；以不同转基因再生植株叶片饲喂二龄末幼虫，幼虫死亡率达33.3%~66.7%。之所以出现差异，可能与转化体的同质化程度不同有关。众所周知：每个叶肉细胞含有数十个甚至数百个叶绿体，被整合外源基因的叶绿体数量越多，即转化体同质化程度越高，其外源基因表达量越高，杀虫性也越好。采用在抗性培养基上2轮筛选及多次继代方法对转基因植株进行同质化筛选研究，结果表明：转基因植株的同质化程度明显提高，加快了获得同质化纯系的进程。转基因甜菜后代抗虫基因的遗传稳定性和抗虫性分析表明，外源基因在转基因后代中得到稳定遗传并表达稳定的杀虫活性,幼虫死亡率仍达33.3%~55.6%。为了使叶绿体转化技术能广泛应用，本论文对其机理进行了研究。以除草剂抗性基因bar为筛选标记基因，比较研究bar基因和aadA基因的筛选效率，结果表明：筛选标记基因是影响目的基因转化效率的因素；以本研究克隆的位于叶绿体基因组中反向重复序列上的rps7-rps12/ndhB基因为同源片段，比较研究同源片段位置与目的基因转化效率的关系，结果表明：同源片段的位置对目的基因转化效率影响差异不大。此研究结果为其他植物开展叶绿体转化研究提供理论依据。(本文来源于《哈尔滨工业大学》期刊2008-10-01）
甜菜遗传转化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白介导的Na+区域化在植物适应盐胁迫中起着重要作用。本研究以甜菜(Beta vulgaris L.)叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因BvNHX的靶片段,以中间载体pHANNIBAL和表达载体pART27为基础,采用酶切和连接的方法,构建CaMV 35S启动子驱动的含BvNHX基因片段反向重复序列的RNAi植物表达载体pARB,通过冻融法将其导入根癌农杆菌GV3101,并转入甜菜幼苗获得BvNHX-RNAi转化株系。半定量RT-PCR分析结果表明该干扰载体能特异性地导致转化植株BvNHX基因表达的沉默。这将为解析BvNHX在甜菜体内Na+区域化中的功能及其在甜菜适应盐渍生境中的作用机制提供帮助。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
甜菜遗传转化论文参考文献
[1].刘大丽,马龙彪.谷胱甘肽合成酶StGCS-GS对甜菜遗传转化的研究[J].中国糖料.2018
[2].伍国强,焦琦,刘海龙,蔺丽媛.甜菜液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白BvNHX基因RNAi载体构建及遗传转化[J].分子植物育种.2018
[3].呼斯乐.甜菜高效组培再生体系建立及遗传转化研究[D].内蒙古农业大学.2015
[4].张海霞,张少英,付增娟.乙酰丁香酮对甜菜遗传转化的影响[J].广东农业科学.2013
[5].郝慧.甜菜蔗糖磷酸合成酶（SPS）基因的克隆及其遗传转化[D].黑龙江大学.2012
[6].芦宝琳.抗草甘膦基因甜菜遗传转化的研究[D].黑龙江大学.2012
[7].殷东林,祝建波,王爱英,向本春.蔗糖转运蛋白基因VvSUC11和VvSUC12双价植物表达载体的构建及在甜菜中的遗传转化[J].生物工程学报.2011
[8].李建平.甜菜蔗糖磷酸合酶基因的克隆、表达及其遗传转化[D].新疆农业大学.2010
[9].阮美煜,谢亚红,徐全乐,高楠,王新宇.同源异型盒基因PttKN1对红叶甜菜和彩叶草的遗传转化[C].细胞·生命·健康——第十一届中国细胞生物学学术大会暨2009西安细胞生物学国际会议论文集.2009
[10].崔杰.抗虫Bt基因cry1Ac甜菜叶绿体遗传转化与表达研究[D].哈尔滨工业大学.2008