普罗布考对2型糖尿病大鼠足细胞的保护作用

论文摘要

目的:观察2型糖尿病对肾小球足细胞和裂隙膜的影响,并探讨其可能机制和作用,及普罗布考对糖尿病肾病足细胞和裂隙膜的保护作用。方法:雄性SD（sprague-Dawley）大鼠36只,分为两组,正常对照组（N组,喂养普通饲料10只）和高糖高脂组（M组,喂养高糖高脂饲料26只）,分别喂养8周后,测量血脂、血糖和血胰岛素,并计算HOMA-IR。高糖高脂组喂养的26大鼠只注射STZ（链脲佐菌素,30mg/kg）,血糖＞16.67mmol/l确定为糖尿病,糖尿病大鼠成模共23只;然后重新分组,N组（正常对照组,10只）不变,D组（糖尿病组,12只）,P组（普罗布考组,成模后给予普罗布考500mg/kg/d干预8周组,11只）,D组和P组大鼠继续予高糖高脂饲料喂养8周;测定三组大鼠血脂、胰岛素、糖化血红蛋白、血糖、24小时尿微量白蛋白定量（UMA）、肾功能、肾脏肥大指数,肾皮质丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽还原酶（GSH-PX）活性,应用免疫组织化学方法检测裂隙膜nephrin的蛋白表达,RT-PCR方法检测nephrinmRNA、podocinmRNA和CD2AP mRNA的表达,同时在电子显微镜下观察肾小球足细胞超微结构的改变。所得数据用SPSS13.0统计软件包分析。结果:1.高糖高脂喂养加小剂量STZ诱导的糖尿病大鼠血糖、血脂及HOMA-IR较普通饲料喂养组明显增高（均P＜0.05）,符合2型糖尿病发病特点。2.糖尿病组大鼠肾皮质SOD、GSH-PX活性较正常对照组显著降低（均P＜0.05）,MDA含量较正常对照组显著升高（P＜0.05）;普罗布考组SOD、GSH-PX活性较糖尿病组升高（均P＜0.05）,MDA含量较糖尿病组显著下降（P＜0.05）;糖尿病组和普罗布考组的肾脏肥大指数较正常对照组增大（均P＜0.05）。3.糖尿病组大鼠肾小球内nephrin蛋白表达较正常对照组显著降低（P＜0.05）,nephrinmRNA、podocinmRNA和CD2APmRNA的表达较正常对照组显著降低（均P＜0.05）;普罗布考干预后nephrin蛋白表达较糖尿病组增加（P＜0.05）,nephrin mRNA、podocinmRNA和CD2AP的mRNA表达较糖尿病组增加（均P＜0.05）。4.糖尿病组肾小球足细胞足突严重融合,足突减少;普罗布考组足突融合严重程度介于正常对照组和糖尿病组。结论:1.利用高糖高脂饮食喂养加小剂量STZ两次注射方法成功制备了T2DM大鼠模型。2.糖尿病时肾组织抗氧化能力降低、氧化应激增高,可能损害足细胞和裂隙膜,导致肾小球滤过屏障外层完整性破坏,尿微量白蛋白定量增高;普罗布考可能通过增强糖尿病大鼠肾脏抗氧化能力,减轻氧化应激,保护肾小球滤过屏障外层裂隙膜和足细胞的结构与功能,减少蛋白尿,延缓糖尿病肾病的发生发展。3.目前研究仅限于体外实验及动物模型,在人体研究、临床科研方面,累积资料尚少,有待进一步探索。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 对象和方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 附录
• 综述
• 足细胞损伤与糖尿病肾病的研究进展
• 综述参考文献
• 致谢