论文摘要
目的 1.通过研究c-FLIP(细胞型Fas相关死亡区域蛋白样自介素-1-β转换酶抑制蛋白)在眼眶横纹肌肉瘤及横纹肌肉瘤RD细胞株中的表达,探讨其在RMS发生、发展中的作用。 2.设计筛选c-FLIP反义寡核苷酸(ASODN),观察其对RD细胞株c-FLIP表达的调节,进一步探讨c-FLIP对细胞凋亡的影响。 3.采用PLGA为载体,制备载c-FLIP反义寡核苷酸纳米粒,对比分析其对RD细胞凋亡的影响。 方法 1.应用RT-PCR检测眼眶横纹肌肉瘤RD细胞株和18例眼眶横纹肌肉瘤及其周围正常组织中c-FLIP的表达。 2.通过设计筛选的c-FLIP反义寡核苷酸处理RD细胞株,应用Western蛋白印迹法检测ASODN干预前后RD细胞c-FLIP表达水平的变化;通过流式细胞仪用AnnexinⅤ试剂盒定量测定干预前后RD细胞凋亡率的变化。 3.通过二次超声乳化和溶剂挥发技术,以PLGA纳米粒子作为c-FLIP-ASODN导入的载体,并评价载c-FLIP-ASODN的PLGA纳米粒的特性。 4.利用c-FLIP-ASODN纳米粒处理RD细胞株,通过上述方法,对比分析RD细胞c-FLIP表达水平及细胞凋亡率的变化。
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