论文题目: 丝氨酸蛋白酶介导隐球酵母细胞穿越血脑屏障机制及其对中枢神经系统作用的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 皮肤病与性病学
作者: 徐赤宇
导师: 温海,廖万清,陈江汉
关键词: 新生隐球菌,丝氨酸蛋白酶,血脑屏障,胞外蛋白水解酶,大鼠,小鼠,组织芯片,蛋白琼脂的廓清率,聚丙烯酰胺凝胶电泳,酶解物的凝胶分析法,菌株芯片,毒性因子
文献来源: 第二军医大学
发表年度: 2005
论文摘要: [背景] 新生隐球菌如何穿越血脑屏障并造成中枢神经系统感染的机制目前尚不清楚。研究发现丝氨酸蛋白酶可以提高血脑屏障开放程度,丝氨酸蛋白酶具有嗜神经性。有学者研究证实新生隐球菌可分泌丝氨酸蛋白酶。[目的] 证实新生隐球菌分泌的丝氨酸蛋白酶可以介导隐球酵母细胞穿越血脑屏障及其对中枢神经系统的作用。[方法] 运用构建的菌株芯片平台、免疫组织化学技术、蛋白琼脂廓清率晕环大小的测定、酶解物的凝胶分析、透射电镜技术、阿尔新蓝特殊病理染色和相差荧光显微镜等手段。[结果] 体外实验:绝大多数新生隐球菌菌株能产生特异性廓清率晕环;所有筛选的菌株细胞中都有丝氨酸蛋白酶表达;丝氨酸蛋白酶等干预因素使内皮细胞面积减少。体内实验:丝氨酸蛋白酶可以使伊文氏蓝荧光出现在有血脑屏障保护的脑组织区域;丝氨酸蛋白酶可以使穿越血脑屏障的菌量增多、穿越时间缩短。[结论] 发现新生隐球菌分泌具有活性的胞外蛋白水解酶并含有丝氨酸蛋白酶成分;新生隐球菌自身分泌的丝氨酸蛋白酶可以干扰构成血脑屏障主要成分内皮细胞的完整性使得血脑屏障开放程度提高;致病性真菌分泌的丝氨酸蛋白酶可能是一种毒性因子。
论文目录:
文缩写词表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分：新生隐球菌胞外蛋白水解酶活性及丝氨酸蛋白酶检测
实验材料
实验方法
实验结果
讨论
第二部分：各型新生隐球菌菌株中丝氨酸蛋白酶的表达
菌株芯片的构建
免疫组化的研究
结果
实验结果图片
讨论
第三部分：丝氨酸蛋白酶对体外培养脑微血管内皮细胞的作用
体外血脑屏障细胞模型的建立
体外脑微血管内皮细胞观测
统计学处理
实验结果
讨论
第四部分：丝氨酸蛋白酶介导新生隐球菌通过血脑屏障及MMP-9在脑组织中的分布
实验材料
实验方法
统计学处理
实验结果
讨论
全文总结
文献综述
发表文章
致谢
发布时间: 2006-05-08
参考文献
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