两种福禄考组织培养再生及受体再生体系建立

两种福禄考组织培养再生及受体再生体系建立

论文摘要

本研究通过对宿根福禄考(Phlox paniculata)和丛生福禄考(Phlox subulata)愈伤组织和不定芽的诱导、继代增殖、生根、移栽等植株再生过程中的主要影响因素和两种福禄考对抗生素的敏感性进行研究,建立了宿根福禄考和丛生福禄考不同外植体的遗传转化受体再生体系,为运用基因工程育种技术转入抗旱基因,改良现有品种,培育抗旱新品种打下良好基础。抗旱型地被植物的获得,对逐步发展节水耐旱型的地被景观,缓解我国淡水资源短缺城市的用水压力,具有重要作用,同时为瘠薄和高燥地段绿化提供新型材料。宿根福禄考茎段在MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L的培养基上长势最佳,萌发率最高,为91%;在MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L繁殖系数最高,为3.1。以宿根福禄考经过5000mg/L抗坏血酸浸泡5min的叶片为外植体,通过不定芽途径繁殖宿根福禄考,分化率、增殖系数最高的培养基是MS+6-BA 3.0mg/L+NAA0.1mg/L,其分化率、增殖系数分别为86%、3.7。最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+AC0.3%和1/2MS+NAA0.2mg/L+AC0.1%,生根率为80%。移栽成活率可高达96%。以丛生福禄考茎段为外植体,MS+6-BA0.4mg/L+IBA0.04mg/L+GA31.0mg/L和MS+6-BA0.4mg/L+NAA1.5mg/L是最佳萌发快繁培养基,萌发率为100%;以MS+6-BA0.4mg/L+IBA0.04mg/L+GA31.0mg/L为愈伤组织诱导、增殖及不定芽分化的最佳培养基,愈伤组织诱导率为96%,愈伤增殖系数为5.6,不定芽分化率为100%,不定芽增殖系数为11.6。以MS+6-BA0.4mg/L+IBA0.04mg/L培养基为壮苗培养基。最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+IAA0.1 mg/L+6-BA0.02mg/L,生根率为88%,移栽成活率可达85.7%。通过对两种福禄考在遗传转化中对选择抗生素和抑菌抗生素敏感性试验,建立了两种福禄考受体再生体系。结果表明,宿根福禄考最佳的选择抗生素为Kan,适合的选择压为200mg/L,最佳抑菌剂为Cef,50mg/L的Cef可以完全抑制根癌农杆菌的生长,且外植体再生率达55%;丛生福禄考最佳的选择抗生素为Kan,适合的选择压为200mg/L,最佳抑菌剂为Carb,100mg/L的Carb完全可以抑制根癌农杆菌的生长,外植体再生率达65%。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 绪论
  • 1.1 观赏植物组织培养的研究进展
  • 1.1.1 快速繁殖
  • 1.1.2 种苗脱毒
  • 1.1.3 新种培育
  • 1.1.4 观赏植物组织培养中克服外植体褐变的研究进展
  • 1.2 观赏植物基因工程研究进展
  • 1.3 福禄考属植物研究进展
  • 1.4 本研究的目的意义
  • 2 材料与方法
  • 2.1 植物材料
  • 2.2 试验药品及器材
  • 2.2.1 基本培养基配制
  • 2.2.2 植物生长调节剂、抗生素、抗氧化剂的配制
  • 2.2.3 主要试验仪器
  • 2.2.4 培养条件
  • 2.3 试验方法
  • 2.3.1 植物材料的无菌处理
  • 2.3.2 启动培养
  • 2.3.3 增殖培养
  • 2.3.4 愈伤组织诱导、继代增殖及分化培养
  • 2.3.5 生根培养
  • 2.3.6 试管苗的炼苗与移栽
  • 2.3.7 受体再生体系的建立
  • 2.4 有关指标的计算方法
  • 3 结果与分析
  • 3.1 宿根福禄考组织培养再生
  • 3.1.1 启动培养
  • 3.1.2 增殖培养
  • 3.1.3 愈伤组织诱导、继代增殖及分化培养
  • 3.1.4 生根培养
  • 3.1.5 试管苗的炼苗与移栽
  • 3.1.6 抗生素敏感性测定
  • 3.2 丛生福禄考组织培养再生
  • 3.2.1 启动培养
  • 3.2.2 增殖培养
  • 3.2.3 愈伤组织诱导、继代增殖及分化培养
  • 3.2.4 生根培养
  • 3.2.5 试管苗的炼苗与移栽
  • 3.2.6 抗生素敏感性测定
  • 结论
  • 参考文献
  • 攻读学位期间发表的学术论文
  • 致谢
  • 相关论文文献

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