导读:本文包含了起始密码子论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:维生素D受体,起始密码子区,基因突变,真核表达载体
起始密码子论文文献综述
毕红东,李宝群,万立野[1]（2019）在《类固醇激素受体起始密码子区突变位点报告基因系统的构建》一文中研究指出目的构建含有类固醇激素受体(VDR)起始密码子区突变序列的双荧光素酶报告基因系统。方法以人肝组织总RNA为模板应用RT-PCR方法扩增出VDR cDNA基因序列全长并克隆于T载体后酶切再与空载体pcDNA3.1(-)B-myc/his连接形成重组载体;测序验证后与荧光素酶报告基因连接构建起始密码子区T/C突变型人VDR,以phRL-SV40质粒作为内对照共转染COS-7细胞,设1,25(OH)2VD3不同浓度点进行干预后,化学发光法检测荧光强度。结果人VDR基因起始密码子区突变重组质粒测序验证与Genbank完全相同。通过双荧光素酶报告基因分析系统检测,1,25(OH)2VD3干预组荧光素酶活性数值显着升高,差异有统计学意义(P<0.05),表明人VDR起始密码子区突变重组体在COS-7细胞中存在转录激活能力。结论成功构建了含有起始密码子区突变的报告基因载体,为VDR有关的药物代谢异常、肿瘤易感性提供机制性指导。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2019年17期）
詹瑶,曹高燚,曹雪松,武俊杰,丁博[2]（2018）在《酿酒酵母起始密码子表达载体pYES2-ATG的构建及应用》一文中研究指出鉴定合成的或通过高通量随机组合方法获得的潜在功能片段的生物学功能需要一套高效便捷的酵母表达专用载体。酵母表达载体pYES2多克隆位点处不含起始密码子,通过设计含有ATG和Eco RⅠ酶切位点的特异性引物扩增一段Intron,利用In-Fusion重组技术(Clontech)将该片段构建至酵母表达载体p YES2,得到一个含有ATG的重组酵母表达载体pYES2-ATG。为了检测该载体的功能,扩增不含起始密码子的DNA序列nlea,该序列由本实验室设计合成,具有潜在的耐盐功能。构建重组表达载体p YES2-ATG-nlea在酵母中进行功能鉴定。研究结果表明,半乳糖诱导后,含pYES2-ATG-nlea的重组酵母菌株耐盐能力明显高于含pYES2-ATG空质粒的菌株,表明在该载体系统上的添加了起始密码子的nlea成功表达,具有一定的耐盐性,同时也证明改造的载体系统可用于没有起始密码子的编码区序列的功能筛选和鉴定。p YES2-ATG酵母载体系统不影响原始载体基本功能元件的表达,同时能使不含起始密码子编码区序列在酵母中正常表达,在大规模进行多个基因的功能鉴定中具有重要的应用价值。(本文来源于《分子植物育种》期刊2018年23期）
高鹏[3]（2017）在《基因科学新发现:所有密码子都可能成为起始密码子》一文中研究指出用16个不同的大肠杆菌菌株划线的琼脂平板的图像,每个菌株均含有具有不同起始密码子的绿色荧光蛋白(沿着平板的边缘标注)。16个密码子分别对应16个最强的表达密码子。该图像是用两幅由激光扫描仪拍摄的图像迭加合成的。近几十年来,那些与遗传物质打交道的科学家能想到的就那么几条基本规则。首先,DNA被"转录"成信使RNA(mRNA),而mRNA被"翻译"成蛋白质,这一过程对几乎所有的生物学功能来说都是必需的。而有关这一"翻译"过程的中心原则,科学家一直以为mRNA中只有少数几个起始密码子和叁碱基序列才能触发蛋(本文来源于《飞碟探索》期刊2017年04期）
[4]（2017）在《改写教科书:起始密码子至少有47种》一文中研究指出几十年来,研究遗传物质的科学家将一些基本原则牢记在心,如中心法则,DNA先经过转录产生mRNA,然后mRNA翻译产生蛋白质。人们长期认为在翻译时,mRNA中仅有少量叁联密码子能够启动蛋白质翻译,因此这些叁联密码子也被称作起始密码子。但是,在一项新的研究中,来自美国国家标准技术研究所、斯坦福大学和澳大利亚麦考瑞大(本文来源于《中学生物教学》期刊2017年06期）
陈明辉,张志录,杨雨华,佟伟霜,杨风岭[5]（2016）在《红豆杉种质资源遗传多样性的目标起始密码子多态性(SCoT)分析》一文中研究指出采用目标起始密码子多态性(SCo T)分子标记技术,研究红豆杉18份种质的遗传多样性及种质间的遗传关系,为红豆杉资源的保护、利用以及遗传育种提供依据。以18份红豆杉种质资源为材料,从80条引物中筛选出19条重复性好、条带清晰的引物进行PCR扩增,利用NTSYS-pc2.10e软件对其扩增位点多态性进行分析。结果表明:19条引物共扩增出134条带,其中97条具有多态性,多态性带比率为72.39%。18个红豆杉种质间遗传相似系数在0.31~0.89之间,说明SCo T标记能够揭示材料间较高的遗传多样性。利用UPGMA进行系统的聚类分析显示,在相似系数0.53处可将18份红豆杉资源分成两大类;主坐标分析结果与聚类分析结果相一致。红豆杉资源具有较丰富的遗传多样性,SCo T分子标记技术可有效地从分子水平揭示红豆杉种质资源的遗传背景和亲缘关系。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2016年10期）
王健胜,侯桂玲,程立平,谢永凤[6]（2016）在《国内外苜蓿种质起始密码子遗传多样性分析》一文中研究指出为了对新引进的苜蓿种质亲缘关系进行鉴定,采用起始密码子多态性(SCo T)标记对19份国内外苜蓿种质的分子遗传多样性进行分析。结果显示,14个SCo T引物在供试苜蓿材料中共获得有效扩增条带78个,其中多态性条带72个,多态性条带百分比为92.31%;SCo T引物的有效等位基因数、Nei’s基因多样性指数、Shannon’s信息指数和多态性信息含量平均分别为1.53、0.31、0.46和0.31;供试苜蓿材料间的遗传相似系数介于0.385~0.846,平均为0.657,表明供试苜蓿材料遗传多样性较丰富;聚类分析和主成分分析均表明,供试材料可被划分为2大类,第1类群包括的苜蓿种质数达到16个,占到所有供试苜蓿种质总数的84.21%,第2类群包含的苜蓿种质数只有3个。综合分析表明,新引进的19份苜蓿种质具有较丰富的遗传多样性,其在未来苜蓿育种中具有较好的应用前景。(本文来源于《河南农业科学》期刊2016年10期）
高晓玲,吴慧,陈琪,龚贵如,熊冬金[7]（2016）在《黄淮海和南方大豆育成品种的目标起始密码子(SCoT)遗传多样性分析》一文中研究指出利用目标起始密码子(SCo T)标记对159份1923-2005年育成的中国黄淮海和南方大豆育成品种进行遗传多样性分析。从80条目标起始密码子(SCo T)标记引物中筛选出27条引物,27条引物共扩增出130条DNA条带,其中多态性条带110条,多态性比率为84.62%。Nei's基因多样性变化范围为0.24~0.49,平均为0.37;平均多态信息含量(PIC)为0.27。黄淮海大豆育成品种的Nei’s基因多样性指数和Shannon信息指数的平均值和变幅范围略高于南方品种,黄淮海大豆育成品种平均值多态信息含量(PIC)也略高于南方品种,但变幅范围略低于南方品种。基于SCo T标记遗传距离的聚类分析表明:I类群中99个主要是黄淮海大豆育成品种,Ⅱ类群中60个主要是南方大豆育成品种。随着时间的推移,大豆育成品种的遗传多样性呈递增趋势,至1971-1990年达到最高并保持不变,表明自70年代以来大豆育成品种遗传基础有所拓宽。结果表明SCo T可用于大豆育成品种遗传多样性研究,为拓宽大豆育成品种遗传基础提供重要参考。(本文来源于《大豆科学》期刊2016年05期）
高清丽[8]（2016）在《α2珠蛋白基因起始密码子突变导致α地中海贫血的研究》一文中研究指出目的：分析广西地区血红蛋白H病(Hemoglobin H Disease, Hb H病)的基因突变类型与血液学特征。方法：对从2015年4月至2015年12月在广西医科大学第一附属医院经血常规、血红蛋白分析确诊为Hb H病的203个病例,利用聚合酶链式反应(gap Polymerase Chain Reaction, PCR)、反向斑点杂交(Reverse Dot Blot, RDB)及DNA测序等方法进行α地中海贫血基因突变分析。应用统计软件SPSS17.0进行数据分析处理。结果：1、在203例Hb H病患者中发现一例罕见Hb H病,患者为男性,30岁,无黄疸、肝脾肿大等,未输过血。血常规结果显示Hb 87g/L, RBC 4.57×10O12L, MCV 67.7fL, MCH 19pg, HCT 0.285,血红蛋白分析示HbH+Hb Bart's 26.6%, Hb A21.5%, Hb F 0.7%,基因分析证实为α2珠蛋白起始密码子突变(ATG→A-G)复合东南亚缺失型α地中海贫血(--SEA/αATG→A-Gα)。病例家系调查提示其父亲为该起始密码子突变杂合子(αATG→A-Gα/αα)血常规和血红蛋白分析正常。其母亲血常规检测结果：Hb 111g/L, RBC 4.9×1012L, MCV69.4fL, MCH22.6pg, MCHC326g/L, HCT0.341,基因分析为东南亚缺失型α地中海贫血(-SEA/αα)。2、共检出缺失型Hb H病109例,占53.5%,其中73例为-SEA/-α37(35.9%),35例为__SEA/_α3.2 (17.2%),1例-_THAI/-α4.2(0.4%);非缺失型Hb H病94例,占46.5%,其中87例-SEA/αCSα(42.8%),4例-SEA/αQSα(1.9%),--THAI/αCSα、--SEA/α△30α、--SEA/αATG→A-Gα各1例。3、共检出8种等位基因,等为基因-SEA的检出率高达99%,其次为αCSα、-α3.7α、-α4.2、αQSα,等为基因-_TAHI、α△30α、αATG→A-Gα较少见,检出率分别为分别为1.0%、0.5%、0.5%。4、缺失型Hb H病组与非缺失型Hb H病组血红蛋白H平均水平相比较,--SEA/αQSα组Hb H平均水平最高,--SEA/αCSα组Hb H平均水平次之,两组之间差异无统计学意义(P>0.05)；--SEA/-α4.2组Hb H平均水平为(12.3±3.4)%,--SEA/-α3.7组Hb H平均水平最低(10.3±3.9)%,两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。5、缺失型Hb H病组与非缺失型Hb H病组血液学参数比较,缺失型Hb H病组Hb平均水平高于非缺失型Hb H病组,MCV、MCH平均水平均较非缺失型Hb H病组低,两组差异有统计学意义(P<0.001)。结论：1、α2珠蛋白起始密码子突变(ATG→A-G)导致a地中海贫血。其杂合子无临床症状,血液学检测正常,Hb分析正常。当复合东南亚缺失型α地中海贫血-1时导致HbH病,临床有中度贫血。此基因突变类型容易漏诊,需基因分析才能确诊。2、广西地区Hb H病基因突变类型以--SEA/αCSα最常见,其次为-SEA/-α3.7、--SEA/-α4.2、--SEA/αQSα。3、等位基因以_SEA检出率最高,其次为αCSα、-α3.7、-α4.2、αQAα。4、非缺失型Hb H病患者贫血程度比缺失型Hb H病的严重,但其MCV、MCH值较后者的高。(本文来源于《广西医科大学》期刊2016-05-01）
高清丽,张学,陈萍,李树全,丘玉玲[9]（2016）在《α2珠蛋白基因起始密码子突变导致α-地中海贫血的研究》一文中研究指出目的:分析血红蛋白H病(hemoglobin H disease,Hb H病)的基因型与临床特征。方法:对2015年4月至2015年12月在广西医科大学第一附属医院经血常规、血红蛋白分析确诊为Hb H病的200例患者,利用聚合酶链式反应(PCR)、反向斑点杂交(RDB)及DNA测序等方法进行α-地中海贫血基因突变分析。结果:在200例Hb H病患者中发现1例罕见的Hb H病。病例为男性,30岁,无黄疸、肝脾肿大等,未输过血。血常规结果显示:Hb 87g/L,RBC 4.57×1012 L,MCV 67.7fL,MCH 19pg,HCT 0.285。血红蛋白分析示:Hb H+Hb Bart′s 26.6%,Hb A21.5%,Hb F 0.7%,基因分析结果为α2珠蛋白起始密码子突变(ATG→A-G)复合东南亚缺失型α-地中海贫血-1(--SEA/αATG→A-Gα)。病例的家系调查提示其父亲血常规和血红蛋白分析正常,基因分析为α2珠蛋白起始密码子突变(ATG→A-G)杂合子(αATG→A-Gα/αα);其母亲血常规检测结果:Hb 111g/L,RBC 4.9×1012 L,MCV 69.4fL,MCH 22.6pg,MCHC 326g/L,HCT 0.341,基因分析为东南亚缺失型α-地中海贫血(--SEA/αα)。结论:这是中国人群中首次发现α2珠蛋白起始密码子突变导致α-地中海贫血。其杂合子无临床症状,血液学检测正常,Hb分析正常。当复合东南亚缺失型α-地中海贫血-1时导致Hb H病,临床有轻度贫血。此基因突变类型容易漏诊,需基因分析才能确诊。(本文来源于《广西医科大学学报》期刊2016年02期）
孟祥琨[10]（2016）在《毕赤酵母AOX启动子作用下起始密码子周围序列对EGFP表达量的影响》一文中研究指出毕赤酵母(P.pastoris),甲醇营养型酵母,已经成为基因工程生产外源蛋白最重要的工具,与其他表达系统而言,具有很多优点,对于大肠杆菌表达系统而言,既具有操作简单、生产成本较低、外源蛋白高产量等优点,同时还具有蛋白的翻译后加工修饰作用;对于酿酒酵母而言,具有质粒表达的稳定性高、表达菌株较稳定、分泌效率较高等优点;对于哺乳动物表达系统而言,具有操作简单,培养基低廉,生产过程中不易污染的特点;对于昆虫细胞表达系统而言,具有成本显着降低的优点。基因的表达调控在蛋白表达过程中发挥重要的作用,基因表达分为DNA转录成RNA和RNA翻译成蛋白质。转录是基因表达的初始阶段,在这个阶段进行调控,对于生物来说是最为经济的。真核生物中,基因调控也是主要在转录水平上进行的。通过顺式作用元件和反式作用因子的相互作用实现了真核生物的转录调控。生物体基因调控主要发生在这些顺式作用元件上,如启动子、GC盒、CCAAT盒、增强子、沉默子、阻遏子等,最近发现起始密码子ATG周围碱基影响基因的转录效率,从而影响最终蛋白的产量。大量的实验结果表明起始密码子ATG周围序列对蛋白表达有不同程度的影响。Tatematsu,K.,et al.在2014年发表的文章中研究了家蚕中的起始密码子ATG周围的序列对重组蛋白表达量的影响。文章中比较了50种家蚕的自身基因,发现AAAAATCAAAATGG序列影响转录效率,之后他们利用EGFP和荧光素酶作为报告基因,构建了8种由不同的序列组成的质粒,这些序列长度为包括ATG在内的14个碱基,发现这些序列对基因转录和蛋白产量有显着影响,并且具有组织特异性。Dai,C.,et al.在2007年发表的文章中报道:他们将钾离子通道蝎毒素基因插入到p EGFP-N1真核表达载体的EGFP前面,并在融合蛋白的起始密码子ATG前插入了Kozak序列GCCACC,发现插入Kozak序列GCCACC使得融合蛋白的表达量大大升高,而未插入Kozak序列的基本上没有表达。Sano KI et al在2002年的文章中报道他们在荧光素基因以及龙虾原肌球蛋白的起始密码子ATG前面插入了龙虾原肌球蛋白c DNA的ATG前21个氨基酸,发现能显着的提高这两种蛋白的表达量。这些报道证明ATG周围序列对于基因的表达具有极大的影响,但是目前尚未有人对毕赤酵母AOX1启动子介导下毕赤酵母中ATG周围序列对基因表达的影响进行研究。本实验采用EGFP作为报告基因,构建了重组载体p PICZαA-EGFP,根据α信号肽序列和EGFP序列设计一对引物,在上游引物中引入PstⅠ限制性内切酶酶切位点,并在起始密码子ATG周围插入6个突变碱基,在大肠杆菌中使重组质粒得到大量扩增后电转化到毕赤酵母中,诱导转化子的表达,筛选阳性转化子,测定EGFP的表达量,经多次测序,得到ATG前面插入突变序列的阳性克隆数为77种;在ATG后面插入突变序列的阳性克隆数为48种后测序,记录插入的突变碱基的序列,接着我们使用RT-q PCR法对这些克隆的m RNA水平进行测定,综合分析ATG周围插入序列对EGFP转录水平的影响。实验结果表明:(1)在ATG前面插入6个碱基,显着增加EGFP表达量(荧光值变化率高于100%)的序列为CMSYMM;中等程度增加EGFP表达量(荧光值变化率在50-100%)的序列为RHSDYC;低程度增加EGFP表达量(荧光值变化率在0-50%)的序列为CMBNCB;降低EGFP表达量(荧光值变化率为负值)的序列为KWBKTN。(2)在ATG后面插入6个碱基,明显增加EGFP表达量(荧光值变化率高于100%)的序列为BHYRAS;中等程度增加EGFP表达量(荧光值变化率在50-100%)的序列为ASBRWY;低程度增加EGFP表达量(荧光值变化率在0-50%)的序列为NHCVND;降低EGFP表达量(荧光值变化率为负值)的序列为WARRBV。(3)m RNA表达量的高低基本上与在ATG周围插入序列的EGFP荧光强度变化一致,这说明,在ATG周围插入的序列是通过影响了EGFP的转录,使得m RNA的表达量发生了改变,从而影响蛋白质的最终产量。(本文来源于《吉林大学》期刊2016-04-01）
起始密码子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
鉴定合成的或通过高通量随机组合方法获得的潜在功能片段的生物学功能需要一套高效便捷的酵母表达专用载体。酵母表达载体pYES2多克隆位点处不含起始密码子,通过设计含有ATG和Eco RⅠ酶切位点的特异性引物扩增一段Intron,利用In-Fusion重组技术(Clontech)将该片段构建至酵母表达载体p YES2,得到一个含有ATG的重组酵母表达载体pYES2-ATG。为了检测该载体的功能,扩增不含起始密码子的DNA序列nlea,该序列由本实验室设计合成,具有潜在的耐盐功能。构建重组表达载体p YES2-ATG-nlea在酵母中进行功能鉴定。研究结果表明,半乳糖诱导后,含pYES2-ATG-nlea的重组酵母菌株耐盐能力明显高于含pYES2-ATG空质粒的菌株,表明在该载体系统上的添加了起始密码子的nlea成功表达,具有一定的耐盐性,同时也证明改造的载体系统可用于没有起始密码子的编码区序列的功能筛选和鉴定。p YES2-ATG酵母载体系统不影响原始载体基本功能元件的表达,同时能使不含起始密码子编码区序列在酵母中正常表达,在大规模进行多个基因的功能鉴定中具有重要的应用价值。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
起始密码子论文参考文献
[1].毕红东,李宝群,万立野.类固醇激素受体起始密码子区突变位点报告基因系统的构建[J].中国老年学杂志.2019
[2].詹瑶,曹高燚,曹雪松,武俊杰,丁博.酿酒酵母起始密码子表达载体pYES2-ATG的构建及应用[J].分子植物育种.2018
[3].高鹏.基因科学新发现:所有密码子都可能成为起始密码子[J].飞碟探索.2017
[4]..改写教科书:起始密码子至少有47种[J].中学生物教学.2017
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[9].高清丽,张学,陈萍,李树全,丘玉玲.α2珠蛋白基因起始密码子突变导致α-地中海贫血的研究[J].广西医科大学学报.2016
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