论文摘要
背景与目的喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous carcinoma，LSCC）是头颈部常见的恶性肿瘤，在我国部分省市的发病率约为1.5～3.4／10万人，占头颈肿瘤的13.9％，占全身恶性肿瘤的2.1％，近几年来其发病率有日益增高的趋势。对于单纯LSCC病人，可以通过手术切除的方式得到较好的治疗效果，其术后5年生存率能达到80％。而对于伴颈部淋巴结转移的病人，即使通过颈清扫及术后的放疗，其5年生存率仅为46.2％，死亡率明显上升。肿瘤细胞的转移是一个十分复杂的过程，是多步骤，多基因协同作用的结果，其中转移抑制基因的失活和肿瘤血管生成是转移发生的必要步骤。nm23-H1是研究的较深入的肿瘤转移抑制基因，已在多种恶性肿瘤中发现nm23-H1的低表达与转移及临床预后等呈负相关。但临床上也有相反的报告，有些肿瘤组织中的nm23-H1基因表达水平缺失与肿瘤是否转移及临床预后无关，甚至有的肿瘤在其发生转移时nm23-H1的表达反而增高，以上这些相互矛盾的结论，说明人们对nm23-H1的认识还很不够，还需更深入的研究。碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor bFGF）最早是从牛垂体中分离到的一种碱性蛋白，其在体内分布广泛，存在于神经组织、骨骼、生殖器官、腺体、白细胞等以及多种肿瘤细胞中。它与细胞膜上的受体结合后可刺激细胞的增殖、分化，诱导新生血管的形成。通过观察喉鳞状细胞癌中nm23-H1、bFGF蛋白的表达和MVD的检测，探讨其在LSCC组织中生长、浸润、转移与预后的关系。材料与方法收集2003年1月～2004年12月郑州大学第一附属医院病理科存档的手术切除并经病理确诊的喉鳞状细胞癌57例，其中男56例，女1例，年龄46岁～75岁（平均年龄61.5岁），中位年龄58.2岁，所有病例术前均未接受过肿瘤治疗。另取20例声带息肉及喉正常粘膜组织，来自2004年至2005年郑州大学第一附属医院耳鼻喉科非癌患者喉正常粘膜。临床分期及组织病理学分级按1992年国际抗癌协会（UICC）TNM分类标准及组织病理学分级标准第四版第二次修订方案：Ⅰ期18例，Ⅱ期8例，Ⅲ期24例，Ⅳ期7例；组织病理学分级：G1（高分化）33例，G2（中分化）20例，G3（低分化）4例。应用免疫组化SP法，正常喉粘膜及声带息肉组织作为对照组，已知阳性组织作为阳性对照（试剂公司提供），PBS代替一抗作为阴性对照，分别检测nm23-H1、bFGF在标本中的表达情况，利用CD34对微血管染色，计算MVD值，并结合LSCC的临床病理特征进行分析。采用SPSS13.0软件包进行统计分析，以α=0.05作为差异有显著性的检验水准，P＜0.05认为有统计学意义。结果1．nm23-H1在声带息肉及正常喉粘膜组织中不表达。高分化LSCC中nm23-H1蛋白表达阳性率（69.7％）明显高于中、低分化LSCC中nm23-H1蛋白表达阳性率（25.0％），差别有统计学意义（P＜0.05）；无颈淋巴结转移组nm23-H1蛋白表达（71.4％）明显高于颈淋巴结转移组（18.2％），差别有统计学意义（P＜0.05）；nm23-H1蛋白表达与临床分期无关（P＞0.05）。2．bFGF蛋白表达和病理分级和临床分期均无关（P＞0.05）；颈淋巴结转移组bFGF蛋白表达（81.8％）明显高于无颈淋巴结转移组（45.7％），差别有统计学意义（P＜0.05）。3．病理分级不同的LSCC中MVD值无显著性差异，中晚期LSCC（Ⅲ+Ⅳ期）的MVD值（24.87±7.72）明显高较早期（Ⅰ+Ⅱ期）的MVD值（18.94±6.59），差别有统计学意义（P＜0.05）。有颈淋巴结转移者的MVD值（30.60±5.38）明显高于无颈淋巴结转移者的MVD值（16.86±2.51），差别有统计学意义（P＜0.05）。4．nm23-H1蛋白表达阳性者MVD值明显低于阴性表达者，差异有统计学意义（P＜0.05）；bFGF蛋白表达阳性者MVD值明显高于阴性表达者，差异有统计学意义（P＜0.05）。LSCC中bFGF阳性病例中，nm23-H1的阳性率（38.2％）低于nm23-H1阴性的病例（69.6％），两者呈负相关（rs=-0.478，P＜0.05）。结论1．nm23-H1蛋白的表达与有无颈淋巴结转移及病理分级有明显相关关系，提示nm23-H1对LSCC的转移起重要作用，且随着细胞分化程度的降低，其转移潜力的增强。2．bFGF蛋白与有无颈淋巴结转移有明显相关关系，提示bFGF通过刺激新生血管的生成促进肿瘤的转移。3．LSCC中MVD值与TNM分期及颈淋巴结转移密切相关，提示MVD值可作为评价LSCC预后的指标之一。4．nm23-H1蛋白的表达与MVD有明显相关性，nm23-H1蛋白阴性表达组MVD值明显高于nm23-H1蛋白阳性表达组，提示转移能力强的肿瘤细胞克隆中血管生成的作用也强。5．bFGF蛋白表达与MVD有明显相关性，bFGF蛋白表达阳性组MVD值均高于其阴性表达组，提示bFGF能促进肿瘤血管的生成。6．nm23-H1和bFGF在LSCC中呈负相关，在统计学上有显著性意义，提示nm23-H1的表达的减少和bFGF表达的增加能协同促进肿瘤的转移。
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