运输和抗应激添加剂对肉仔鸡生理生化指标和肝脏HSP70基因表达及肉质的影响

论文摘要

本研究以肉仔鸡为研究对象,分别探讨了模拟运输密度、时间和日粮添加抗应激添加剂对肉仔鸡生理生化指标、热应激蛋白HSP70表达及其肉品质的影响。试验1选取体重相近的49日龄的AA肉公鸡48只,随机分为5组1、3、5组为8只（低密度,8只/0.64m2）,2、4组为12只（高密度,12只/0.64m2）,采用模拟运输方式,1组:静止2小时;2、4组:运输2小时;3、5组:运输4小时。结果表明,运输应激降低血清T3（P<0.05）和T4水平（P>0.05）,但对COR无影响。随着运输时间延长和密度增加,血清INS含量呈现逐渐下降的趋势,其中以高密度4小时运输下降最为明显,同时肌肉糖原含量显著增加（P<0.05）,但血糖无显著变化。运输处理显著影响血清AST活性（P<0.05）,并有提高CK、GGT和LDH活性的趋势（P>0.05）;运输应激导致肉仔鸡胸肌和腿肌MDA含量明显上升（P<0.05）,并随密度的增加而增高,并随时间延长而有所下降。同时肌肉总NOS和SOD活性也显著增高（P<0.05）,其中SOD活性随时间延长和密度增加而持续上升,4h高密度组胸肌SOD含量显著高于4小时低密度组,4h高密度组腿肌SOD含量显著高于2h低密度组。运输2h显著提高HSP70 mRNA丰度（P<0.05）,但运输4h后,HSP70 mRNA丰度回落到正常水平;运输应激显著影响一些肉质指标（P<0.05）,降低了胸肌和腿肌24h滴水损失、胸肌pH值和乳酸水平,但提高了胸肌和腿肌1h滴水损失、腿肌pH值和乳酸水平。结果提示,运输应激能够诱发组织的过氧化损伤,而肉仔鸡对运输应激产生不同程度的适应。此外,短期运输应激时HSP70mRNA相对表达量升高。试验2选取体重相近的49日龄AA肉公鸡40只,随即分为5组,每组8只,1、2组饲喂基础日粮,3、4、5组分别在基础日粮中添加MgCl2,吡啶甲酸铬和维生素C,连续饲喂1周后断食断水2小时,按8只/0.64m2密度装载,1组静止,2、3、4、5组以60km/h的速度在乡间公路运输2小时。结果表明,饲喂添加添加MgCl2、吡啶甲酸铬和维生素C的日粮一周显著提高肉仔鸡的抗运输应激能力。日粮添加维生素C显著降低肌肉MDA含量并显著提高GSH-Px、NOS和SOD活力和HSP70基因表达水平（P<0.05）,减缓运输应激导致的皮质醇降低,并有提高血清T3水平、降低T4水平的趋势。此外还显著提高胸肌1h滴水损失以及腿肌1h和24h滴水损失,显著降低胸肌LD含量,缓解运输应激导致的胸肌pH值减低和腿肌肌糖元含量的升高。日粮中添加吡啶甲酸铬则显著降低胸肌MDA水平（P<0.05）,但对SOD、NOS和GSH-Px活性无显著影响;此外也显著降低胸肌乳酸含量、腿肌糖原含量和pH值（P<0.05）,同时提高了HSP70基因表达水平和肌肉1h滴水损失。日粮中添加大剂量氯化镁则显著提高了胸肌和腿肌的SOD活性并显著降低了肌肉MDA含量（P<0.05）,并显著提高了腿肌和胸肌1h和24h滴水损失（P<0.05）。结果显示,3种添加剂在抗运输应激的机理上存在较大差异,不同添加剂相比较以大剂量氯化镁抗运输应激作用最为明显。

论文目录

• 摘要
• Summary
• 第一部分 文献综述
• 1 应激的基本概念及其发生原理
• 2 应激对神经内分泌系统的影响
• 2.1 下丘脑-交感神经-肾上腺髓质反应
• 2.2 下丘脑一垂体一肾上腺皮质轴反应
• 3 应激对机体代谢的影响
• 3.1 对蛋白质、糖和脂肪代谢的影响
• 3.2 应激对矿物质代谢的影响
• 3.3 运输应激对肌肉能量代谢的影响
• 2+循环'>3.3.1 骨骼肌兴奋-收缩耦联中的Ca²⁺循环
• 3.3.2 骨骼肌能量代谢的特点
• 4 运输应激的特点及其诱发的主要症状
• 5 运输应激反应程度测定的指标选择与分析
• 6 应激对HSP 族热应激蛋白的影响
• 7 小结
• 第二部分 试验研究
• 试验一 模拟运输对肉仔鸡生化指标和肝脏HSP70 表达及肉质的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试验动物与试验设计
• 1.2 主要仪器与药品
• 1.3 样本的采集与处理
• 1.4 肝脏中HSP70 蛋白m RNA 丰度的测定
• 1.5 血液生化指标的测定
• 1.6 肌肉生化指标的测定
• 2 结果与分析
• 2.1 肉仔鸡肝脏HSP70 mRNA 相对表达量
• 2.2 肉仔鸡血清激素水平和生化指标
• 2.3 肉仔鸡胸肌和腿肌关键酶活性
• 2.4 肉仔鸡胸肌和腿肌肌糖原和代谢产物的含量
• 2.5 肉仔鸡胸肌和腿肌滴水损失与pH 值
• 3 讨论
• 4 结论
• 试验 二饲喂抗应激饲料添加剂对运输后肉仔鸡生理生化指标和肝脏HSP70 表达及肉质的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试验动物与试验设计
• 1.2 主要仪器与药品
• 1.3 样本的采集与处理
• 1.4 肝脏中HSP70 蛋白的RNA 转录水平的测定
• 1.5 血液各项指标的测定
• 1.6 肌肉生化指标测定
• 2 结果与分析
• 2.1 肉仔鸡HSP70 mRNA 相对表达量
• 2.2 肉仔鸡血液中激素浓度
• 2.3 肉仔鸡肌肉酶活性
• 2.4 肉仔鸡肌肉肌糖原和代谢产物含量
• 2.5 肉仔鸡肌肉滴水损失与pH 值
• 3 讨论
• 3.1 镁盐抗运输应激的作用
• 3.2 铬抗运输应激的作用
• 3.3 Vc 抗运输应激的作用
• 4 结论
• 总体讨论与结论
• 1 总体讨论
• 2 总体结论
• 参考文献
• 附录1 HSP70 MRNA RT-PCR 条件的筛选
• 附录2 不同运输时间和装载密度影响HSP70 MRNA 转录电泳图
• 附录3 抗运输应激添加剂对HSP70RNA 转录影响电泳图
• 致谢
• 导师简介
• 作者简介