血脂异常的危险因素及脂代谢关联基因相关性研究

论文摘要

背景与目的血脂异常是指人体内血清脂质代谢异常,包括血清总胆固醇（TC）、血清甘油三脂（TG）、血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平升高,以及血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平降低。血脂异常已成为当今社会人群的普遍健康问题。大量的流行病学调查结果表明,血脂异常是高血压、2型糖尿病、脑卒中、动脉粥样硬化和冠心病等多种慢性非传染性疾病的重要危险因素。血脂水平与生活及饮食习惯有密切的关系,随着我国经济的发展和人民生活水平的提高,人们的生活方式及膳食结构发生了很大变化,血脂异常等慢性病的发病率也明显上升。此外,血脂水平还受到年龄、性别、职业、文化程度、经济条件以及不同地域的人群的生活饮食习惯等诸多因素的影响。潮汕地处沿海,当地居民长期以来有着自己独特的传统风俗文化及生活饮食习惯。根据我们3年来的慢性病监测研究发现,所监测人群中30岁以上的人血脂异常率高达40%以上,其中以高胆固醇血症尤为突出,其次是高甘油三酯血症,已成为危害当地人群健康的潜在威胁。但目前有关影响当地人群血脂异常的危险因素尚未见系统的研究报道。血脂水平除了受环境因素的影响外,还与个体的遗传因素有关。研究认为血脂异常是一种由遗传和环境危险因素共同作用的多基因性疾病。目前认为环境因素是大多数疾病发生的始动因素,而个人的遗传特征决定疾病的易感性。单核苷酸点突变造成的基因多态性（SNPs）是易感性的遗传基础,因此对于基因的SNPs筛查和研究具有非常重要的理论及应用价值。脂蛋白的代谢主要受载脂蛋白、脂蛋白受体及脂蛋白代谢酶的影响。载脂蛋白ApoE和脂蛋白脂酶（LPL）是参与调节机体血脂代谢的重要因子,其基因多态性是影响血浆脂蛋白水平的显著的遗传因素。全基因组关联性研究显示（Genome-Wide Association Studies,GWAS）,ApoE rs157580的SNPs与血浆高水平LDL-C、LPL rs326的SNPs与血浆高水平TG极为相关,并在欧洲人群中得到了证实而成为高危标签SNP,但这种关联性是否存在于所有的人群尤其是东亚人群,目前为止,尚未得到验证。本研究以潮汕人群为研究对象,采用病例-对照的研究方法,对可能影响血脂水平的相关因素尤其是生活及饮食习惯进行了系统的流行病学调查和分析,明确影响该人群血脂异常的危险因素。同时,通过检测该人群脂代谢相关基因ApoE rs157580 C>T和LPL rs326 T >C的多态性,分析其在潮汕人群中的频率分布以及与血脂异常的关联性,并进一步分析基因-基因,基因-环境间的交互作用对血脂异常的影响。通过对上述SNPs的验证,为筛查高危人群和寻找有效的药物治疗靶点提供依据,结合血脂异常的危险因素,制定适合当地的慢性病防治教育模式和干预措施,可有效降低慢性病的发病率及病死率。对象和方法采用整群抽样的方法,抽取2010年5月至2010年12月在潮南民生医院和汕头大学医学院第一附属医院体检中心以单位集体参加体检的居民作为研究对象。所有对象年龄在18周岁以上,在潮汕地区常住5年以上,且自愿参加调查且能够合作者。采用现场流行病学调查的方法,经本人同意后,由经过训练的调查人员对调查对象逐一进行体格检查、问卷调查和生化检查。为研究影响血脂异常的环境危险因素,采用成组病例-对照研究方法,依据《2007年中国血脂防治指南》规定的血脂异常诊断标准入选血脂异常的个体作为病例组,同时选取同期体检同一单位血脂正常且无服用降血脂药史的个体作为对照组,共获得资料齐全的病例1120例,其中男性923人,女性197人,平均年龄44.1±11.6岁;对照1021例,其中男性694人,女性327人,平均年龄38.7±11.7岁。为了探讨血脂异常与脂代谢相关基因多态性的关系,采用配对病例-对照研究,在已入选的病例和对照中进一步按照性别、年龄进行1:1的配对,共获得384对病例-对照,采用高通量Beckman SNPstream系统对脂代谢相关基因ApoE rs157580和LPL rs326基因型进行检测。采用EPiData3.0建立数据库,数据由专人录入,数据经核查及整理后运用SPSS 13.0 （SPSS Inc.,Chicago, USA）和SAS 9.1（SAS Institute Inc., Cary, North Carolina, USA）软件进行统计分析。计量资料采用（ X±SD）进行统计描述,正态性检验采用单样本K-S拟合优度法,对非正态分布的数据采用对数转换成近似正态分布。成组设计的病例-对照研究中两组均数的比较采用t检验;多组均数的比较采用方差分析。计数资料采用率进行统计描述,统计推断采用χ2检验。应用单因素与多因素非条件logistic回归研究相关环境因素与血脂异常的关系。配对设计的病例-对照研究计数资料统计推断采用配对χ2检验,应用条件logistic回归研究相关环境因素与血脂异常的关系。运用Haploview软件对基因进行Hardy-Weinberg平衡检验多态性进行分析;采用多因子降维法（GMDR）分析基因与基因以及基因与环境的交互作用。显著性检验水准取α=0.05。结果1.血脂异常人群中各项体格检查指标及生化指标的均值均高于正常人群相应指标的均值（P <0.05）。2.多元非条件Logistic回归显示:潮汕人群男性血脂异常的危险因素是:年龄（OR=1.03）、坐位时间（OR=1.27）、饮酒（OR=1.16）、墨鱼摄入（OR=1.14）、动物内脏摄入（OR=1.18）、体重指数（OR=1.91）、血糖异常（OR=1.83）;保护因素为运动频次（OR=0.78）;女性血脂异常的危险因素是:年龄（OR=1.05）、墨鱼摄入（OR=1.31）、体重指数（OR=1.70）、血糖异常（OR=2.70）、高血压（OR=1.96）;保护因素为运动频次（OR=0.78）。3. ApoE rs157580,LPL rs326基因位点多态性的分布均符合Hardy-Weinber平衡。ApoE rs157580 C>T基因型和等位基因频率在病例组和对照组中的分布差异无统计学意义（分别为P=0.918,P=0.743 ） ;LPL rs326 T> C等位基因频率在病例组和对照组中分布差异无统计学意义（P=0.067）,而基因型频率的分布差异有统计学意义（P=0.012）。调整血脂异常危险因素后,LPL rs326T> C携带等位基因T发生血脂异常的危险性明显高于CC基因型,aOR=3.1 （P<0.05）。4.调整血脂异常危险因素后,ApoE rs157580 C>T与LPL rs326 T> C之间对血脂异常的影响存在交互作用。当ApoE rs157580为TT基因型且LPL rs326为CT或TT基因型时,血脂异常的患病风险最高（aOR=3.7,P<0.05）。5.调整血脂异常危险因素后,ApoE rs157580 C>T和LPLrs326 T> C与体重指数之间对血脂异常的影响存在交互作用。肥胖合并ApoE rs157580携带TT基因型时血脂异常患病风险最高（aOR=2.6,P<0.001）;肥胖合并LPLrs326 T> C携带T等位基因组的血脂异常患病风险最高（aOR=7.0,P<0.001）。结论1.年龄、坐位时间、饮酒、墨鱼摄入、腌制品摄入、动物内脏摄入、体重指数、血糖异常、高血压是潮汕人群血脂异常的危险因素,而运动频次是保护因素。2. LPL rs326 T> C是潮汕人群中血脂异常的易感因素,而未发现ApoE rs157580 C>T与血脂异常相关。3. ApoE rs157580 TT基因型与LPL rs326 CT/TT基因型协同增加血脂异常的危险性。4.肥胖不仅是血脂异常的高危因素,同时与LPL rs326 CT或TT及ApoE rs157580 TT基因型共同增加血脂异常的危险性。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩写注解
• 1 前言
• 2 研究内容和方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 6 展望
• 7 参考文献
• 附录1 综述
• 参考文献
• 附录2 问卷调查表
• 附录3 变量赋值表
• 附录4 已发表文章
• 附录5 个人简历
• 致谢