GC-51冻干亚微乳剂的制剂学研究及初步药效学评价

论文摘要

本课题研究目的是解决Cheliensisin A（GC—51）的静脉给药制剂学问题，并对该药物制剂进行相应的理化性质、稳定性、安全性和体内外抗肿瘤效应进行初步评价。本文首先测定了GC-51的熔点、溶解性、稳定性、油水分布系数等理化指标，并结合其水溶性很差，不稳定的特点，进行了多种静脉给药剂型的预实验研究，并最终确定GC-51冻干亚微乳剂为最适宜剂型。进而采用单因素和星点设计—效应面优化法相结合的方法筛选出制备GC-51冻干亚微乳剂的最佳处方及工艺，并建立GC-51冻干亚微乳剂的含量测定方法，进行了影响因素实验和长期稳定性实验。对GC-51冻干亚微乳剂进行了溶血性实验、刺激性实验和急性毒性实验，将其作为安全性指标。采用MTT法对体外抗肿瘤细胞活性进行筛选和比较，测定了其浓度依耐性和时间依耐性。建立小鼠肺转移肿瘤模型，并用GC-51冻干亚微乳剂对其进行治疗，以比较小鼠生长状态、抗肿瘤抑制率、生存期等指标初步评价其体内药效学。结果：制得的GC-51冻干亚微乳剂外观结实平整，加水再分散后，粒径为168±5nm，PDI为0.133±0.070，粘度为水的2.80倍，PH值为7.04，等渗，制剂处方工艺稳定，储存温度在30℃以下，密闭隔绝空气，其物理化学性质很稳定，储存期预期较常规乳剂长；GC-51冻干亚微乳剂几乎不溶血，对家兔几乎无刺激性，小鼠尾静脉注射GC-51冻干亚微乳剂后，无不良反应出现，最大耐受量可达120mL／kg·day，所制得的GC-51冻干亚微乳剂安全性合格，初步实验结果确定可用于静脉给药；体外，GC-51冻干亚微乳剂对HepG2、Hela、A549、CT26四种肿瘤细胞均有较强的抑制作用，且具有一定的时间和浓度的依赖性；与多柔比星、顺铂、五氟尿嘧啶等常规抗肿瘤药物比较，其对该几种肿瘤细胞的增殖抑制作用都较强，具有较广抗瘤谱；体内分布和药代动力学预实验中，体内检测不到GC-51，药物消除很快，半衰期很短，而体外血浆中的稳定性也表明，GC-51极易被生物酶所降解，半衰期很短，机制尚不清楚；体内GC-51冻干亚微乳剂的抗肿瘤效果较顺铂差，但从动物的生长状态、皮毛、饮食及脾脏指数可看出，GC-51冻干亚微乳剂的毒副作用低于顺铂；体内抗肿瘤效果远低于体外，说明体内生物环境对其影响较大，这与前面的实验结论和对体内实验的预测结果一致。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一章 制剂处方设计前研究
• 1. 仪器与试药
• 2. 方法与结果
• 2.1 GC-51理化性质考察
• 2.2 剂型分析及预试
• 2.3 小结
• 3. 讨论
• 3.1 分配系数的测定
• 3.2 pH值的选择
• 3.3 给药途径选择
• 参考文献
• 第二章 GC-51冻干亚微乳的制备及理化性质研究
• 1. GC-51亚微乳的处方及工艺筛选
• 1.1 仪器与材料
• 1.2 实验内容与结果
• 2. GC-51冻干亚微乳的理化性质研究
• 2.1 仪器与材料
• 2.2 实验方法与结果
• 3. 讨论
• 3.1 冻干亚微乳剂考察指标
• 3.2 冻干亚微乳剂的稳定性
• 3.3 星点设计—效应面优化法
• 第三章 GC-51冻干亚微乳含量测定及稳定性研究
• 1. GC-51冻干亚微乳中GC-51含量测定
• 1.1 仪器与试剂
• 1.2 方法与结果
• 2. GC-51冻干亚微乳稳定性研究
• 2.1 仪器与试剂
• 2.2 方法与结果
• 3. GC-51冻干亚微乳剂在血浆中的稳定性及其体内药动学和体内分布初探
• 3.1 仪器与试剂
• 3.2 方法与结果
• 4. 结论与讨论
• 4.1 储存条件
• 4.2 体内代谢
• 第四章 GC-51冻干亚微乳的安全性研究
• 1. 溶血试验
• 1.1 实验仪器、动物与材料
• 1.2 方法与结果
• 2. 刺激性试验
• 2.1 实验仪器与材料
• 2.2 方法与结果
• 2.3 结论
• 3. 急性毒性试验
• 3.1 实验材料与仪器
• 3.2 实验方法
• 3.3 实验结果
• 4. 实验结论
• 5. 讨论
• 5.1 溶血性
• 5.2 刺激性
• 5.3 急性毒性
• 参考文献
• 第五章 GC-51冻干亚微乳的体外细胞学研究
• 1 仪器与试剂
• 1.1 实验仪器
• 1.2 细胞株
• 1.3 细胞培养基及主要溶液的配制
• 1.4 试药配置
• 2 实验方法
• 2.1 细胞培养
• 2.2 浓度依赖型MTT实验
• 2.3 时间依赖型MTT实验
• 3. 结论
• 4. 讨论
• 4.1 关于实验方法的探讨
• 参考文献
• 第六章 GC-51冻干亚微乳的体内药效学试验
• 1. 仪器与试药
• 1.1 实验设备
• 1.2 主要试剂
• 1.3 实验动物
• 1.4 细胞株
• 2. 实验方法与结果
• 2.1 小鼠肺转移肿瘤模型的建立
• 2.2 预试
• 2.3 给药
• 2.4 荷瘤小鼠的治疗效果观察
• 2.5 抗结肠癌肺转移作用观察
• 2.6 组织学及病理学观察
• 2.7 统计学分析
• 3. 实验结果
• 3.1 GC-51冻干乳剂可以抑制结肠癌肺转移肿瘤的生长
• 3.2 GC-51冻干乳剂可以延长荷瘤小鼠的生存周期
• 4. 结论
• 5. 小结和讨论
• 5.1 小鼠肺转移肿瘤模型的建立
• 5.2 GC-51冻干亚微乳和顺铂治疗小鼠肺转移肿瘤
• 参考文献
• 结论
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介