E.tenella肌动蛋白解聚因子抗原定位及免疫保护性研究

论文摘要

在已知ADF基因序列的基础上设计引物,扩增ADF开放阅读框,将其克隆入原核表达载体并表达出重组ADF蛋白,利用此重组ADF蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体用于抗原定位,同时用该重组蛋白经不同免疫途径免疫雏鸡检测其免疫保护力。结果:扩增出357bp的ADF开放阅读框,与原序列经Blast比对同源性为100%,并表达出17KDa的重组融合蛋白,表达量为40%。成功制备两株单克隆抗体2E5和2D6,亚型鉴定分别为IgM和IgG1。抗原定位结果显示,ADF分布于子孢子细胞质中,且主要位于子孢子中部,两极极少或没有。免疫保护结果显示,口服组与红对照组相比在细胞免疫水平以及攻虫后在降低卵囊排出、减轻盲肠病变和体重增加方面均差异极显著(P<0.01),其ACI为163.1,说明重组ADF蛋白具有一定的免疫保护力。本研究为预防鸡球虫病奠定了基础。

论文目录

• 内容提要
• 前言
• 第一篇 文献综述
• 第一章 鸡球虫病免疫学及鸡球虫疫苗研究进展
• 1 鸡球虫的种类及其所引起的鸡球虫病
• 2 鸡球虫的生活史及各发育阶段保护性抗原
• 3 球虫抗原刺激机体产生的抗球虫免疫保护作用
• 4 鸡球虫疫苗研究进展
• 5 鸡球虫疫苗存在的问题及解决办法
• 6 展望
• 第二章 肌动蛋白解聚因子/丝切蛋白（ADF/cofilin）研究进展
• 第二篇 研究内容
• 第一章 柔嫩艾美耳球虫ADF 基因的克隆分析及原核表达
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第二章 抗柔嫩艾美耳球虫ADF 单克隆抗体的制备
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第三章 柔嫩艾美耳球虫F2 杂交株子孢子ADF 的抗原定位
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第四章 重组ADF 抗原对鸡柔嫩艾美耳球虫的免疫保护性实验
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 结论
• 参考文献
• 中文摘要
• 英文摘要
• 致谢
• 导师及作者简介