乌司他丁对毛细血管渗漏综合征毛细血管通透性影响的实验研究

论文摘要

目的：通过制备大鼠毛细血管渗漏综合征模型,测定大鼠血清VEGF、IL-2的浓度、观察毛细血管渗漏综合征大鼠组织形态学及肺、肾组织毛细血管内皮细胞NF-κB的表达,探讨乌司他丁对毛细血管渗漏综合征大鼠模型毛细血管通透性影响的可能机制。方法：1、成年健康SD大鼠,雄性,SPF级,20只,随机分为正常组（Normal组）和模型组（Model组）,每组各10只。采用盲肠结扎穿刺腹膜炎（CLP）模型,制备大鼠毛细血管渗漏综合征模型。开腹后肉眼观察大鼠腹腔大体情况,伊文思兰法测血浆蛋白跨毛细血管转移率评价毛细血管通透性,干湿比重法测组织含水量、伊文思兰法测组织毛细血管通透性,光镜下观察毛细血管渗漏综合征大鼠脏器形态学改变。2、成年健康SD大鼠,雄性,SPF级,80只,随机分为正常组（Normal组）、乌司他丁组（UTI组）和模型组（Model组）；其中正常组大鼠20只,乌司他丁组及模型组各30只。造模方法同上述,造模后观察实验动物12小时,处死前颈静脉取血2ml,3000rpm, 10min,离心取上清ELISA法测血清VEGF、IL-2;处死动物后取肺、肝、肾、脑组织分别行病理学检查、干湿比重法测含水量、伊文思兰法测毛细血管通透性；免疫组织化学法观察肺、肾组织毛细血管内皮细胞NF-κB表达,并比较不同组肺、肾组织毛细血管内皮细胞NF-κB灰度值。结果：1、①造模后12小时,模型组开腹后可见大量血性渗液,肠管表面可见大量脓苔。②模型组血浆蛋白跨血管转移率（TER值）明显高于正常组,差异有显著性（P<0.05）；③肺、肝、肾、脑各组织毛细血管通透性变化：肺、肝、肾组织毛细血管通透性均有不同程度升高,与正常组比较,模型组肺、肝、肾组织毛细血管通透性有明显升高（P<0.05）,脑组织毛细血管通透性与正常组比较无明显差异（P>0.05）④肺、肝、肾、脑各组织干湿比变化：模型组肺、肝、肾、脑各组织干湿比均高于正常组,差异有显著性（P<0.01, P<0.05, P<0.01, P<0.05）;⑤模型组肺、肝、肾、脑组织常规HE染色可见明显病理学改变。2、①腹腔大体情况：模型组12h后腹腔可见大量血性渗液,肠管表面可见大量脓苔。乌司他丁组大鼠腹腔的渗出较少且红色较浅。肠管表面有少量脓苔。②肺、肝、肾、脑各组织毛细血管通透性变化：模型组肺、肝、肾组织毛细血管通透性明显高于正常组和乌司他丁组（P<0.01）,乌司他丁组肺、肝、肾组织毛细血管通透性仍高于正常组,差异有有统计学意义（P<0.01）。模型组、乌司他丁组和正常组组间脑组织毛细血管通透性无统计学差异（P>0.05）；③肺、肝、肾、脑各组织干湿比变化：乌司他丁组肺、肝、肾、脑干湿比较模型组明显减轻（p<0.05）；但乌司他丁组肺、肝、肾、脑干湿比高于正常组（P<0.05）；④模型组血清VEGF、IL-2较正常组和乌司他丁组明显升高（P<0.05）,乌司他丁组血清VEGF、IL-2高于正常组（P<0.05）。⑤模型组肺、肝、肾、脑组织常规HE染色病理学改变较乌司他丁组和正常组严重,乌司他丁组病理学改变接近正常组。⑥模型组肺、肾组织毛细血管内皮细胞NF-κB表达强阳性,灰度值较正常组和乌司他丁组明显降低（p<0.05）,乌司他丁组灰度值较正常组低（p<0.05）。⑦模型组肺、肝、肾、脑组织电镜超微结构改变较乌司他丁组和正常组严重,乌司他丁组病理学改变接近正常组。结论：1.CLP可致大鼠CLS,可用于大鼠CLS模型建立。2.UTI可部分改善CLS毛细血管通透性,在一定程度上可减轻组织水肿。3.UTI可降低CLS模型血VEGF、IL-2,可降低组织NF-x B表达。4.UTI改善CLS毛细血管通透性是否呈剂量依赖性尚有待研究。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 英文缩略语表
• 前言
• 第一部分 大鼠毛细血管渗漏综合征模型的建立
• 材料与方法
• 1 材料
• 2 方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 乌司他丁对毛细血管渗漏综合征毛细血管通透性影响的实验研究
• 材料与方法
• 1 材料
• 2 方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 导师评阅表