口服精氨酸促进长骨线性生长的作用及机制的研究

论文摘要

目的：（1）临床观察及评价口服左旋精氨酸（L-精氨酸,L-arginine）促进矮小儿童身高增长的作用。（2）通过动物实验,研究口服L-精氨酸促进长骨线性生长的作用,并从与下丘脑-垂体生长轴及一氧化氮（NO）信号转导通路相关的基因表达的角度探讨其促进长骨线性生长的作用机制。（3）观察口服精氨酸对实验动物重要脏器可能存在的毒性作用,以评价其治疗的安全性。方法：（1）45例矮小儿童给予口服左旋精氨酸,门诊随访观察,检测治疗前后的身高、骨宽度（BW）、骨矿含量（BMC）及骨密度（BMD）。采用自身配对t检验进行统计分析。（2）以5周龄的雄性SD大鼠为实验对象,对照组喂饲生理盐水,干预组喂饲左旋精氨酸,疗程4周。采用骨形态计量学方法分别测定胫骨生长板宽度（GP）及矿化沉积率（MAR）,股骨骨小梁体积百分数（BV/TV,%）、成骨细胞面积（Ob.S/BS,%）及破骨细胞面积（Oc.S/BS,%）；以放射免疫法测定血清生长激素（GH）浓度；以实时定量-聚合酶链反应（Real-time PCR）检测下丘脑神经型一氧化氮合酶（nNOS）,可溶性鸟苷环化酶α1（sGCα1）,可溶性鸟苷环化酶β1 （sGCβ1）,cGMP依赖的蛋白激酶Ⅱ（PKGⅡ）,生长激素释放激素（GHRH）,生长抑素（SS）及垂体生长激素（GH）基因表达水平；并以免疫印迹方法（Western blot）测定下丘脑nNOS、sGCal及sGCβ1的蛋白表达水平。两组间均数比较采用t检验进行统计分析。（3）以5周龄的SD大鼠为实验对象,对照组喂饲生理盐水,干预组喂饲精氨酸,疗程12周。光镜及透射电镜下观察每组大鼠大脑皮层、下丘脑、垂体、心脏、肝脏、肾脏的组织形态及超微结构。结果：（1）经左旋精氨酸口服治疗后,矮小儿童生长速率（GV）及身高的标准差计分（SDS）明显提高（P<0.05）；骨矿含量及骨密度明显增加（P<0.05）。（2）所有干预组大鼠的胫骨生长板宽度及股骨成骨细胞面积明显增加（P<0.05）；血清GH浓度明显升高（P<0.05）：下丘脑nNOS、sGCal基因及蛋白表达均明显上调（P<0.05）,SS基因表达明显下调（P<0.05）,垂体GH基因表达显著上调（P<0.01）。（3）干预组大鼠大脑皮层、下丘脑、垂体、心脏、肝脏、肾脏的组织形态及超微结构与对照组相比均无明显差异。结论：（1）身材矮小患儿口服精氨酸治疗后身高增长加速,骨矿含量及骨密度增加,且无明显的不良反应。（2）口服精氨酸在促进矮小儿童身高增长的同时,亦能使骨质代谢处于正平衡状态。（3）口服精氨酸可通过nNOS-NO-sGC-cGMP途径使下丘脑SS的基因表达下调、垂体GH基因表达上调,从而使垂体GH的合成及分泌显著增多。（4）口服精氨酸可通过促进垂体GH的合成、分泌增多,使血清GH的水平显著增高,引起长骨生长板宽度增加,成骨细胞功能活跃,从而显著促进长骨的线性生长。（5）本课题中左旋精氨酸的剂量和疗程均在安全范围内,对重要脏器无明显毒副作用。

论文目录

• 缩略词表
• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 口服精氨酸促进矮小儿童身高增长作用的临床评估
• 1 病例选择
• 2 一般资料
• 3 治疗及观察方法
• 4 统计方法
• 5 结果
• 6 讨论
• 小结
• 第二部分 口服精氨酸促进大鼠长骨线性生长的作用及机制的研究
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 小结
• 第三部分 L-精氨酸对大鼠的在体毒性研究
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 小结
• 结论
• 创新点
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 在校期间发表文章
• 致谢