论文摘要
目前在肿瘤的放射治疗中,经常发现同种肿瘤及同病理类型的不同病人其治疗效果有很大差异,对周围正常组织的损伤程度也不同。其中一个重要的原因就是肿瘤细胞对射线的敏感性不同。本研究旨在建立敏感而快捷的方法和指标,在放疗前预测不同患者的肿瘤辐射敏感性,据此设计不同的个体化放疗方案,达到优化治疗的目的。通过体外实验和动物体内实验,对不同肿瘤细胞株和动物接种实体瘤经不同剂量γ射线照射后,用PCR和单细胞凝胶电泳技术分析产生线粒体DNA4977缺失(AmtDNA4977)的不同剂量水平和DNA断裂水平,以此来判断其辐射敏感性。在此基础上,采取同样方法检测临床患者肿瘤照射后诱导出的AmtDNA4977和DNA断裂水平,结合放疗效果判断患者肿瘤辐射敏感性。对AmtDNA4977并结合肿瘤组织DNA双链断裂的检测,为临床提供一个经济快捷的预测肿瘤细胞辐射敏感性的指标。Smac是细胞内的促凋亡蛋白,其活性基团SmacN7是促凋亡功能的最小单位,只在受损细胞内发挥作用。肿瘤细胞内凋亡抑制蛋白(IAPs)的高表达会抑制细胞凋亡,降低肿瘤的辐射敏感性。Smac蛋白可以与IAP直接结合,解除其凋亡抑制功能,从而提高肿瘤的辐射敏感性,成为目前放射生物学的研究前沿方向。但是辐射耐受的肿瘤细胞内Smac蛋白呈低表达,且外源的SmacN7不能进入细胞。因此,把SmacN7导入细胞,并明确其促凋亡机理,是本项目主要研究内容。人ANTP是较早发现的细胞穿膜肽。我们把Smac N7与ANTP连接形成融合肽,以ANTP作为引导肽将Smac N7导入肿瘤细胞,探讨该融合肽对辐射诱导的细胞凋亡信号转导关键因子XIAP, caspase通路等的影响,阐明该融合肽的辐射增敏机理。本项目将对探索新的辐射增敏药物、提高放疗疗效具有很大的指导价值和现实意义。