枯草杆菌B1⑥菌株胞外多糖发酵条件及免疫活性研究

论文摘要

本文依据微生物培养基选择和配制的工业发酵生产原则,对Bacillus subtilisB1⑥菌株工业化产多糖发酵条件做了系统研究。通过单因素实验、正交实验以及不同发酵条件实验对Bacillus subtilis B1⑥产多糖量进行比较,发现在微生物生长发育过程和生物合成过程中,培养基中碳氮的比例（C/N）在发酵工业中非常重要,同时还需要添加大量元素和微量元素,如镁、硫、磷、钾、锰等来促进微生物的生长。结果表明:Bacillus subtilisB1⑥菌株工业化产多糖发酵过程中,培养基组成对多糖发酵有重要影响;实验确定了该菌株多糖发酵的最佳培养基配方及发酵条件。从发酵液中提取Bacillus subtilisB1⑥胞外多糖,经过聚丙烯酰胺凝胶电泳和纤维素阴离子交换色谱发现:多糖纯度较高。用纸层析和GC对多糖进行组分分析,结果表明:含量较高的组分为葡萄糖和阿拉伯糖。GC结果还表明:多糖具有标样中出现的7种单糖成份鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、岩藻糖,但由于含量较少,纸层析只有两个显色斑,无法显色其他成分。说明多糖可能由一种高含量的葡萄糖、阿拉伯糖和其他成分组成。在Bacillus subtilis B1⑥胞外多糖功能活性研究方面,通过小鼠游泳实验,发现该菌胞外多糖对抗疲劳能力有一定增强作用;其次,多糖浓度为100μg/ml的溶液能够有效地抑制肿瘤细胞生长,引起其凋亡;通过抗肿瘤实验进一步验证:该菌胞外多糖具有一定的抗肿瘤能力。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 1.1 多糖的介绍
• 1.2 多糖的研究概况
• 1.3 多糖的生物活性
• 1.4 细菌多糖研究状况
• 1.5 本课题研究意义及内容
• 1⑥产多糖发酵条件研究'>第二章 枯草芽孢杆菌B₁⑥产多糖发酵条件研究
• 2.1 简述
• 2.2 实验器材和试剂
• 2.2.1 实验仪器和设备
• 2.2.2 主要材料和试剂
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 培养基
• 2.3.2 标准曲线的制作
• 2.3.3 碳、氮源对多糖发酵的影响
• 2.3.4 不同金属离子对多糖发酵的影响
• 2+浓度对多糖发酵的影响'>2.3.5 不同Ca²⁺浓度对多糖发酵的影响
• 2.3.6 装液量对多糖发酵的影响
• 2.3.7 起始pH对多糖发酵的影响
• 2.3.8 温度对多糖发酵的影响
• 2.3.9 菌龄对多糖发酵的影响
• 2.3.10 接种量对多糖发酵的影响
• 2.3.11 摇床速度对多糖发酵的影响
• 2.4 实验结果
• 2.4.1 标准曲线
• 2.4.2 碳、氮源对多糖发酵的影响
• 2.4.3 不同金属离子对多糖发酵的影响
• 2+浓度对多糖发酵的影响'>2.4.4 不同Ca²⁺浓度对多糖发酵的影响
• 2.4.5 装液量对多糖发酵的影响
• 2.4.6 起始pH对发酵多糖的影响
• 2.4.7 温度对多糖发酵的影响
• 2.4.8 菌龄对多糖发酵的影响
• 2.4.9 接种量对发酵多糖的影响
• 2.4.10 不同摇床速度对多糖发酵的影响
• 2.5 结论与分析
• 1⑥胞外多糖分离鉴定和组分分析'>第三章 枯草芽孢杆菌B₁⑥胞外多糖分离鉴定和组分分析
• 3.1 简述
• 3.2 实验器材和试剂
• 3.2.1 实验仪器和设备
• 3.2.2 实验材料和试剂
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 胞外多糖提取分离及鉴定
• 3.3.2 胞外纯多糖组分分析
• 3.4 实验结果
• 3.4.1 胞外多糖提取
• 3.4.2 胞外多糖纯度鉴定结果
• 3.4.3 胞外多糖组分分析结果
• 3.5 结论与分析
• 1⑥胞外多糖免疫活性研究'>第四章 枯草芽孢杆菌B₁⑥胞外多糖免疫活性研究
• 4.1 简述
• 4.2 实验材料和方法
• 4.2.1 实验材料
• 4.2.2 实验原理及方法
• 4.3 实验结果
• 4.3.1 胞外多糖对小鼠抗疲劳能力实验
• 180细胞调亡的实验'>4.3.2 胞外多糖诱导小鼠S₁₈₀细胞调亡的实验
• 4.3.3 胞外多糖抗肿瘤活性研究
• 4.4 结论与分析
• 第五章 展望
• 致谢
• 参考文献:
• 附录