论文摘要
防治靶器官损害与降压是高血压病治疗的基本原则,血压昼夜节律异常与高血压靶器官损害和心血管事件发生呈明显的相关关系,是独立于血压水平的重要致病因素。血压昼夜节律的产生和维持与时钟基因的周期性表达有关。时钟基因bmal1、per2是体内生物钟系统运行的关键基因,其表达水平和节律变化直接调节血压的昼夜节律。肝阳上亢证是高血压病各期及不同病程中构成比最高的中医证型。天麻钩藤饮是平肝潜阳治法的代表方剂,对高血压病肝阳上亢证具有确切的治疗作用。尽管在认识高血压中医证候本质和天麻钩藤饮作用机制研究方面已经取得一定进展,但仍存在许多问题：①虽然国际上己将动态血压指标体系（血压水平、血压变异性、血压昼夜节律）作为评价降压药物疗效的基本指标,但国内尚未见有将这一指标体系用于中药复方研究的报道；②仍限于单纯考察药物对某一指标静态水平的考察,缺乏对其调节机体动态平衡作用的研究,未能充分体现中药复方的特点；③机制研究缺乏系统性和深度,对其具体作用靶点和作用机制尚无准确解释。因此本实验从调节高血压所致的时钟基因bmall,、per2的表达节律异常方面来探讨平肝潜阳法代表方剂天麻钩藤饮对高血压病肝阳上亢证的治疗作用及其通过干预AngⅡ-AT1（血管紧张素11-血管紧张素Ⅰ型）受体信号通路的可能作用途径。实验中,我们复制高血压病肝阳上亢证大鼠模型,通过考察时钟基因bmal1、per2等的表达来阐明天麻钩藤饮调节血压昼夜节律的机制和可能作用途径。1高血压病肝阳上亢证动物的血压昼夜节律特征及天麻钩藤饮的干预作用（1）高血压病肝阳上亢证大鼠模型的建立据病症结合原则,采用双肾一夹加灌附子汤法建立高血压病肝阳上亢证大鼠模型。结果表明此方法模型大鼠存活率为95.83%,成功率为83.41%,可用于本实验的研究。（2）天麻钩藤饮对模型大鼠血压昼夜节律的调节作用研究采用无线遥测技术测定24小时动态血压后以血压昼夜节律曲线的特征值（调整中值、振幅、峰值相位）为指标运用ChronoS-Fit程序进行分析评价。结果表明天麻钩藤饮对模型大鼠血压昼夜节律有调节作用。2天麻钩藤饮对模型大鼠血压节律影响机制的研究（1）天麻钩藤饮影响模型大鼠血浆血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、儿茶酚胺（CA）含量及昼夜节律的研究使用Elisa试剂盒检测不同时间点的AngⅡ和CA含量,建立数学模型,以节律特征值为指标评价天麻钩藤饮对模型大鼠血浆AngⅡ和CA的节律调节作用。结果表明天麻钩藤饮调节模型大鼠血浆AngⅡ和CA的节律。（2）天麻钩藤饮对模型大鼠血管紧张素Ⅰ型受体（AT1）的影响建立RT-PCR方法考察AT1受体mRNA表达水平。结果表明天麻钩藤饮影响模型大鼠血管紧张素Ⅰ型受体（AT1）的表达。（3）天麻钩藤饮对模型大鼠per2、bma11 mRNA表达的影响建立RT-PCR方法考察per2、bma11 mRNA的表达水平,结果表明天麻钩藤饮影响模型大鼠per2、bma11的表达。3血压昼夜节律与时钟基因的相关性分析对实验指标运用Chronos-Fit、LabFit程序进行统计分析,表明血压昼夜节律与时钟基因per2、bma11有相关性。