论文摘要
目的：采用猕猴（恒河猴）为动物模型评价抗乙肝新药—美他卡韦（Metacavir）是否具有潜在的线粒体毒性及其严重程度,为临床安全用药提供参考依据。方法：（1）动物分组及剂量设计：27只猕猴共分5组,阳性对照组[齐多夫定（AZT）组,3只]、Metacavir高、中、低剂量组和对照组（各6只）。Metacavir各剂量组分别设给药期（3个月）和恢复期（4周,各2只）。剂量为AZT 50mg/kg; Metacavir高剂量组120mg/kg,中剂量组40mg/kg,低剂量组13mg/kg,对照组为生理盐水。给药途径：AZT组为口服给药,Metacavir各组为静脉注射给药。给药频率：每周6次,每日上午9-12时给药。（2）临床症状观察。（3）HE染色光镜观察各组组织病理学变化。（4）透射电镜观察肝脏、肾脏、心肌和骨骼肌线粒体超微结构变化。（5）分光光度法测定肝脏、肾脏、心肌和骨骼肌线粒体呼吸链复合体Ⅰ-Ⅳ活性变化。（6）定量PCR检测肝脏、肾脏、心肌和骨骼肌mtDNA含量变化。结果：（1）临床观察：AZT组动物给药期出现恶心、呕吐,食欲降低,Metacavir给药期未见明显临床症状。（2）组织病理学观察结果：给药期高剂量组动物（4/4只）肝脏、小肠、胃、肾均出现不同程度病变。中剂量组动物（4/4只）肝、肾出现病变,部分动物（3/4只）胃、小肠（1/4只）有病理变化。高剂量组、中剂量组其它组织及对照组、低剂量组各组织均未见异常剖检病变和组织病理变化。AZT组动物肝脏和肾脏均出现病变。恢复期所有剂量组组织未见异常病理学变化。（3）透射电镜观察结果：首次给药3月,对照组动物和Metacavir 40mg/kg组显示肝、肾、心肌和骨骼肌未见线粒体形态变化；Metacavir 120mg/kg组肾、心肌线粒体形态结构正常,肝细胞糖原颗粒减少，骨骼肌部分线粒体嵴断裂。恢复期均未见异常病理性变化。AZT 50 mg/kg组肝、’肾、心肌和骨骼肌均出现一定病理变化。（4）线粒体呼吸链复合体活性检测结果：①复合体Ⅰ：首次给药3月,与对照组比,AZT组肝脏、肾脏、心肌和骨骼肌活性极显著降低约50%（P<0.01）,Metacavir 120 mg/kg组肝脏、心肌和骨骼肌活性显著下降（P<0.05）；其他各组及恢复期各组活性与同期对照组相比无显著性差异。②复合体Ⅱ：给药3月,与对照组比,AZT 50mg/kg组心肌和骨骼肌活性极显著降低（P<0.01）,肝脏活性显著降低（P<0.05）,肾脏活性有降低趋势,但无统计学差异；Metacavir 120mg/kg组心肌和骨骼肌活性显著下降（P<0.05）。其他各组及恢复期各组活性与同期对照组比无显著性差异。③复合体Ⅲ：首次给药3月,与对照组比,AZT 50mg/kg组肝、肾和骨骼肌活性极显著下降（P<0.01）,心肌活性显著下降（P<0.05）；Metacavir各组与对照组比均无显著性差异。恢复期各组活性与同期对照组比无显著性差异。④复合体Ⅳ：首次给药3月,AZT 50mg/kg组心肌活性极显著下降（P<0.01）,肾脏和骨骼肌活性显著下降（P<0.05）；Metacavir各组与对照组比均无显著性差异。恢复期各组活性与同期对照组比无显著性差异。（5）mtDNA含量检测结果：QPCR技术对mtDNA（Cytb基因）和核DNA（Actin基因）定量。实验3个月后,与对照组比,AZT 50mg/kg组骨骼肌、心肌、肝脏mtDNA含量极显著降低70%以上（P<0.01）,肾mtDNA含量显著降低（P<0.05）；Metacavir 120mg/kg组骨骼肌、肝脏mtDNA含量显著降低（P<0.05）,心肌mtDNA含量极显著降低（P<0.01）,但均高于AZT 50mg/kg组,恢复期4周,Metacavir 120mg/kg组各组织mtDNA含量有上升趋势。结论：（1）AZT在50mg/kg剂量下,猕猴连续口服3月对骨骼肌、心肌、肾脏、肝脏组织线粒体存在明显结构改变和功能障碍；同时呼吸链复合体活性和mtDNA含量（拷贝数）降低。（2）Metacavir 120mg/kg剂量下对骨骼肌、心肌、肝脏表现出一定的线粒体损伤,其损伤程度：骨骼肌>肝脏、心肌,对肾脏线粒体损伤弱,停药4周毒性反应指标有恢复趋势；Metacavir 120mg/kg剂量对线粒体的损伤程度比AZT 50mg/kg弱。（3）Metacavir 40mg/kg组对各组织未见明显线粒体损伤,对动物线粒体功能不构成影响,可为临床设计人用剂量和主要观察指标提供参考依据。（4）Metacavir对猕猴没有潜在的线粒体毒性,且Metacavir对机体的损伤是可逆的。
论文目录
相关论文文献
标签：猕猴论文; 线粒体超微结构论文; 线粒体呼吸链复合体活性论文;