严重急性呼吸系统综合征（SARS）的血浆差异蛋白质组研究

论文摘要

2002年底爆发的严重急性呼吸综合征（Severe Acute Respiratory Syndrome,SARS）迅速传播影响到全球32个国家和地区,经鉴定确认病源为一种未知的冠状病毒,后命名为SARS相关冠状病毒。据世界卫生组织2003年8月的通报,共计8347人感染SARS病毒,813人死亡。但是关于SARS的致病机制仍然不很清楚。在本文中,我们采用蛋白质组差异凝胶电泳技术,对健康人群与SARS病人的疾病进展期和恢复期血浆蛋白质进行表达谱分析,研究其变化差异,希望为阐述疾病的机制提供线索。由于血浆中白蛋白和免疫球蛋白G（immunoglobulin G,IgG）的含量占70%,对其它的低丰度蛋白造成很大掩盖,所以我们在双向电泳前预先去除这两种高丰度蛋白。通过比较健康和SARS病人血浆,基质辅助激光解吸附—飞行时间质谱鉴定,共得到七个明显变化的蛋白（>1.5倍）。表达上调的蛋白是:血清类粘蛋白（alpha-1-acid glycoprotein）、人胎球蛋白（fetuin）、抗胰凝乳蛋白酶（antichymotrypsin）、结合珠蛋白（haptoglobin）;表达下调的蛋白是:转铁蛋白（transferrin）、转甲状腺素蛋白（transthyretin）、载脂蛋白A-I（apolipoproteinA-I）。并且通过免疫杂交的方法,对其中与肺功能密切相关的两个蛋白抗胰凝乳蛋白酶和人胎球蛋白,进行了表达量差异的确认。这些表达量明显升高的蛋白都具有炎症抑制的作用,并且在恢复期多数蛋白的表达水平有所回归。结果提示这些蛋白的表达水平与病情密切相关,在疾病的进展过程中机体处于一种炎症控制的保护状态,力图在免疫激活防御中保持平衡防止过度的炎症损伤。同时,我们发现血清类粘蛋白、转甲状腺素蛋白、结合珠蛋白的不同修饰形式表达的变化并不完全一致,提示在疾病的进展过程中不同的翻译后修饰可能发挥作用。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• SARS病人血浆的蛋白质组研究
• 1.1 材料与方法
• 1.1.1 主要试剂
• 1.1.2 设备
• 1.1.3 实验方法
• 1.2 结果与分析
• 1.2.1 去除血浆高丰度蛋白的效果评价
• 1.2.2 DIGE图像分析
• 1.2.3 质谱鉴定结果
• 1.2.4 血浆差异蛋白在进展期与恢复期的丰度变化
• 1.2.5 差异蛋白的验证
• 结论
• 致谢
• 附录：硕士期间发表或投稿的学术论文目录及全文