益气活血中药对脑出血大鼠脑内TSP-1、TSP-2及其受体CD36蛋白表达的影响

论文摘要

目的和背景:脑出血（intracerebral hemorrhage,ICH）占全部脑血管病的35%左右,有很高的发病率和死亡率,30天内的死亡率为50%,40%的存活者遗留严重残疾,只有10%的病人病后可以独立生活,是威胁中老年人健康的主要疾病之一。脑出血属于中医“中风”范畴,继往认为其病因病机有风、痰、火、气、血、虚等六端,属本虚标实之证,治疗多从风痰论治。20世纪80年代以来,众多学者根据微观辨证和中医理论“离经之血便是瘀”的理论,开始将急性脑出血归于中医血证,认为血溢脉外是发病的原因,血蓄于脑是基本的病机,活血化瘀是治疗的关键。其中王清任根据“气能行血”理论创制的益气活血经典方补阳还五汤在脑出血治疗中效果显著,已证实其有改善微循环,改善缺血缺氧,保护脑细胞,促进血肿吸收及脑水肿消退,抑制炎症反应等作用。脑出血损伤区随着血肿、水肿的吸收,炎症的消退,遭到破坏的微血管系统必然通过血管新生而在病灶区重建,以恢复损伤区的血液灌注,为脑组织的修复奠定基础。血管新生是由血管新生因子和抑制因子动态平衡的调整来完成的。凝血酶敏感蛋白-1（thrombospondins-1,TSP-1）和凝血酶敏感蛋白-2（thrombospondins-2,TSP-2）的TSR序列与其受体CD36结合后,能抑制内皮细胞的迁移,促进内皮细胞凋亡,从而抑制血管新生,是重要的血管新生抑制因子。因此,我们推测益气活血中药有可能在脑出血后通过影响TSP-1、TSP-2及其受体CD36蛋白的表达,调整机体对血管新生的抑制作用,改变血管重建进程,促进脑组织的修复,而发挥其“祛瘀生新”的作用。本实验采用免疫印迹（western-blotting）检测脑出血大鼠脑内TSP-1、TSP-2及CD36蛋白的表达,通过观察TSP-1、TSP-2及CD36蛋白在脑出血损伤区的表达规律及益气活血中药干预后的变化规律来初步探讨益气活血法在脑出血损伤区血管重建中的作用机制。方法:将155只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、益气活血组、益气组和活血组,立体定位向脑内苍白球注入Ⅶ型胶原酶复制脑出血模型,对相应的组分别灌服补阳还五汤及该方的益气药组和活血药组。各组于造模及灌胃后1d、4d、7d、14d、21d和28d（正常组大鼠于1d）随机抽取5只大鼠,断头法取得脑血肿区脑组织,采用Western blotting检测正常组及其它各组各时间点TSP-1、TSP-2及CD36蛋白的表达。实验数据均采用SPSS12.0统计软件处理。结果:正常组和假手术组不同时间点TSP-1、TSP-2和CD36蛋白表达无明显变化。模型组TSP-1蛋白在脑出血后1d开始表达,4d达高峰,4d-14d逐渐下降,14d-28d各时间点表达无差别。益气活血组和活血组TSP-1蛋白表达在1d和4d均低于模型组（P＜0.01）,益气组TSP-1蛋白表达在4d低于模型组（P＜0.01）:模型组TSP-2蛋白在脑出血后1d开始表达,1d-7d各时间点表达无明显差别,7d-28d表达呈逐渐上升趋势并在28d达高峰。益气活血组TSP-2蛋白表达在14d-21d上升趋势较其他三组缓慢（P＜0.01）,在21d表达较其它三组弱（P＜0.01）,在28d表达较其它三组强（P＜0.01）;模型组CD36蛋白在脑出血后1d开始表达,4d达高峰,4d-14d逐渐下降,14d-28d开始上升并于28d再次达高峰,4d模型组CD36蛋白表达高于其它三组（P＜0.01）,28d益气活血组CD36蛋白表达高于其它三组（P＜0.01）结论:1.脑出血后血肿区TSP-1蛋白早期表达较强,TSP-2蛋白晚期表达较强,CD36蛋白呈双峰表达。2.益气活血中药有可能通过改变TSP-1、TSP-2及CD36蛋白表达水平,动态调节血管新生的抑制机制,促进微血管重建和脑组织修复。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩写词汇集表
• 论文正文
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 第三章 实验结果
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 在校期间科研成果及发表论文