论文摘要
芦蒿,菊科蒿属植物,具有药食两用性,在南京八卦洲地区大面积种植。作为蔬菜,人们以采食冬春季的芦蒿嫩茎为主,而老茎、叶及秋季的芦蒿秸秆因缺乏精深加工技术而无法利用。为推进芦蒿资源的综合利用和促进传统中药的进一步发展,本研究以农产品废弃物芦蒿秸秆为材料,通过75%乙醇提取、柱层析分离和现代的化学结构鉴定方法,对分离得到的化合物进行结构鉴定,并对芦蒿秸秆的提取物和化合物单体进行抑制糖基化终末产物(AGEs)形成的效应研究。主要研究结果如下:1通过对NKA-Ⅱ, AB-8, HPD417, DM130, D101, HPD826, ADS-17,聚酰胺8种树脂静态吸附和解吸性能的对比,选择吸附和解吸性能良好的AB-8大孔吸附树脂进行吸附洗脱条件的优化。确定芦蒿秸秆总黄酮富集纯化的最佳吸附洗脱条件为:pH4.0,上样浓度1.476mg/mL,上样流速1mL/min,上柱体积为树脂体积的2.5倍,洗脱剂为体积分数60%的乙醇,洗脱流速1mL/min,最大洗脱体积为1.5-2.0BV左右。经纯化后,产品中总黄酮的纯度由5.80%增加到30.26%,提高了5.2倍。由此可见,AB-8树脂是芦蒿秸秆总黄酮良好的纯化剂,达到了富集纯化的目的,具有一定的推广应用价值。2利用多种分离技术,包括大孔树脂、硅胶、十八烷基硅烷键合硅胶(ODS)、Sephadex LH-20等柱层析技术,从芦蒿秸秆提取物中分离化合物单体,并通过化学方法和波谱技术,包括液质联用、1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HMQC确定了4种化合物和一组同分异构体的化学结构。分别为化合物1、山奈酚-3-O-葡萄糖酸、芦丁、木犀草素;同分异构体为3,5-二咖啡酰奎宁酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸。其中化合物1为新化合物,除芦丁和木犀草素外,其他化合物首次从芦蒿中分离得到。3将黄酮含量最高的AB-8洗脱组分(30%乙醇洗脱物、50%乙醇洗脱物)进行分离纯化,得到2种黄酮单体:木犀草素和芦丁。实验数据显示,木犀草素和芦丁对AGEs的形成具有很好的抑制作用,在浓度为2.5mmol/L时,芦丁对BSA-MGO形成的AGEs的抑制率达到89%,对BSA-GO形成的AGEs的抑制率为77%;木犀草素在浓度为lmmol/L时,对BSA-MGO形成的AGEs抑制率为81%。木犀草素在低浓度下,仍具有较强的捕获二羰基化合物的能力,说明其可以作为AGEs的天然抑制剂来预防和减轻糖尿病及糖尿病并发症。4芦蒿秸秆总黄酮浸膏经AB-8树脂分离后共收集到4组含有黄酮的洗脱液(F-10(10%乙醇洗脱物)、F-30(30%乙醇洗脱物)、F-50(50%乙醇洗脱物)、F-70(70%乙醇洗脱物)),各分离的洗脱组分对AGEs的形成均具有抑制作用,抑制效果为F-50>F-30>F-10>F-70,此结果与F-30和F-50分别含有的主要黄酮成分芦丁和木犀草素具有较好的AGEs抑制效果相一致。同时发现芦蒿秸秆对AGEs形成的抑制效果与总黄酮含量存在显著的线性关系。由此,推断F-50组分因其优良的抑制AGEs活性可以应用于保健食品的工业化生产中。