论文摘要
白念珠菌对氟康唑耐药性的获得是临床治疗白念珠菌感染失败的主要原因。本课题组研究证实小檗碱与氟康唑合用对耐氟康唑的临床白念珠菌具有显著的协同抑菌作用。本课题首先建立了四步分离提取白念珠菌总蛋白的方法，该方法分辨率高，并且能够溶解采用常规方法不溶的疏水蛋白质，提高了细胞蛋白质的提取率，根据图谱的蛋白分布图形分析，表明此方法可以提高2-DE的分辨率，进而增加鉴定工作的准确度，并且特别适用于疏水蛋白质的蛋白质组学研究。本研究首次对临床耐药白念珠菌分别在不加药、氟康唑（64μg／ml）、小檗碱（16μg／ml）及氟康唑（64μg／ml）与小檗碱（16μg／ml）联合作用6小时的总蛋白质进行了初步蛋白质组学研究，建立了上述4种样品的总蛋白质2-DE图谱，获得10种有显著差异表达的蛋白质（Adh1p、Gap1p、Fba1p、Snz1p、Eno1p、Pot14p、Aco1p、Ino1p、IPF13836、IPF20104），认为与小檗碱协同氟康唑抗耐药白念珠菌的作用机制相关。本课题采用POLARstar多功能微板检测仪检测上述4种样品细胞内活性氧（ROS）的产生量，结果证实两药合用对白念珠菌内源性ROS的产生呈相加作用。本研究表明，小檗碱协同氟康唑抗耐药白念珠菌的作用可能主要与阻断耐药白念珠菌的能量代谢通路有关；两药协同还引起其他一批功能蛋白的表达改变有待进一步研究。该研究为寻找新的抗耐药白念珠菌药物提供了新思路。