论文摘要
多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）是育龄期妇女最常见的内分泌紊乱性疾病之一,具有高度遗传异质性,常会导致高雄激素血症,卵巢多囊性改变,排卵障碍,胰岛素抵抗和中枢性肥胖,远期并发症有糖尿病,代谢综合征和不孕。该病发病机制复杂,关于PCOS致病候选基因的研究很多,但是目前仍没有广泛认可的致病基因和遗传方式。遗传因素和环境因素都不能完全很好的解释该病的发病机制。目前,表观遗传学在多囊卵巢综合征发生发展中的作用日益受到重视,已经成为多囊卵巢综合征发病机制的研究热点,受到国内、外学者的广泛关注。本课题从基础和临床两方面,拟对3例资料完整的胰岛素抵抗的PCOS患者和1例正常对照组的血液标本进行基因组甲基化芯片筛选,分析选出高甲基化表达的基因,并且对选出的基因进行验证。在临床实验部分,拟对48例胰岛素抵抗的PCOS患者和48例正常对照组,对选取的高甲基化基因,采用MassARRAY（?）EpiTYPERTMDNA甲基化分析技术,进行检测,从而发现并确定基因的高甲基化和PCOS发病之间的关系,为PCOS表观遗传学研究提供理论依据。第一部分基础研究目的对3例胰岛素抵抗的PCOS患者和1例正常对照组进行基因组甲基化芯片筛查,选出和PCOS发病可能相关的高甲基化基因,并且对芯片结果进行验证。方法采用Roche-NimbleGen甲基化芯片对3例胰岛素抵抗的PCOS患者和1例正常对照组血液标本进行基因甲基化水平的筛选,采用MassARRAY（?）EpiTYPERTMDNA甲基化分析技术,对芯片结果进行验证。结果RPS4X,KCNJ11,LMNA三个基因启动子区CpG岛均发生高甲基化改变,对芯片结果进行验证后发现仅有LMNA基因启动子区CpG岛发生高甲基化改变。结论LMNA基因甲基化状态的改变可能会影响LMNA基因后续的翻译和表达,和PCOS的发病可能相关。第二部分临床研究目的通过研究PCOS患者和正常对照组LMNA基因甲基化状态的改变,以期发现LMNA基因甲基化的改变和PCOS发病的相关性。方法使用MassARRAY（?）EpiTYPERTMNA甲基化分析技术,对两组人LMNA基因CpG岛上的20个甲基化位点进行检测,解析其在PCOS发病中的作用。结果LMNA基因CpG岛发生甲基化改变的位点,其中有12个CG位点PCOS患者组和对照组有差异,其余8个CG位点两组之间是无显著差异。结论LMNA基因CpG位点高甲基化状态的改变可能与PCOS的发病相关。1. RPS4X, KCNJ11, LMNA三个基因启动子区CpG岛均发生高甲基化改变,对芯片结果进行验证后发现仅有LMNA基因启动子区CpG岛发生高甲基化改变。2. LMNA基因CpG岛发生甲基化改变的位点,其中有12个CpG位点PCOS,其余8个CpG位点两组之间无显著差异。LMNA基因CpG位点高甲基化状态的改变可能与PCOS发病相关。
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