发育早期半胱胺处理对肉仔鸡下丘脑CRH的影响及其机制

论文摘要

本试验旨在探讨发育早期半胱胺处理对肉仔鸡下丘脑内CRH的影响及其相关机制。试验通过蛋内注射半胱胺,观察基础状态下和LPS刺激状态下出雏后生长仔鸡下丘脑内CRH基因和CRH免疫阳性神经元的变化,探讨发育早期半胱胺处理对快速生长期仔鸡HPA轴敏感性的影响,并比较母鸡饲喂半胱胺对后代胚胎及1日龄新生雏鸡下丘脑CRH的影响,对半胱胺作用的相关机制进行了初步探讨。1蛋内注射半胱胺对仔鸡下丘脑CRH的影响及其相关机制将罗斯308种蛋200枚随机分为两组,生理盐水对照组（100μL注射用生理盐水）和半胱胺组（小头敲孔注射100μL含700μg CS-HCL/个蛋）,两组种蛋在相同条件下孵化,20胚龄采样时,称取胚重,取下丘脑;法氏囊、脾脏、肝脏、胸浅肌、腓肠肌称重记录。同时,每组各灌流3只取脑用于免疫纽化。出雏后称重,子代转入育雏室在相同条件下饲养。结果表明蛋内注射半胱胺对子代20胚龄胚重、1日龄出雏重没有影响,对其20胚龄的免疫器官指数（肝体比、脾体比和法氏囊比）没有影响,胸体比和腓体比也没有影响。但是半胱胺组20胚龄下丘脑内cRH和ss mRNA水平及下丘脑室旁核的CRH免疫阳性细胞数均显著下调（P＜0.05）。GR mRNA水平半胱胺组和试验组之间比较无显著差异。饲养第二周周末称重后随机分为四组（对照组和半胱胺组各自再分为两组,即腹腔分别注射LPS组和注射生理盐水组）,在16日龄每只鸡腹腔注射500μg/Kg BWLPS,对照组注射等量生理盐水,在18日龄和20日龄按首次剂量重复注射,最后一次注射后两小时后采样,取其血清和下丘脑;法氏囊、脾脏、肝脏、胸浅肌、腓肠肌称重记录。每组各灌流3只取脑用于免疫组化。结果发现在基础状态下,下丘脑内CRH mRNA水平半胱胺组与对照组相比无显著差异;然而,在LPS注射后,半胱胺组CRHmRNA水平显著高于对照组（P＜0.05）,这与血清中皮质酮变化是一致的。以上结果提示:半胱胺蛋内注射可通过程序化调控下丘脑CRH,提高生长期仔鸡HPA轴应对LPS刺激的敏感性。2母鸡饲喂半胱胺对子代胚胎期及1日龄下丘脑CRH的影响选取67周龄矮脚B种鸡（三黄鸡的一种）480只,平均随机分成对照组和试验组,对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂400 mg/Kg饲料的CT2000（主要有效成份是CS-HCL,含量30%）。采取人工授精。于五周末收集三天的蛋,在实验室进行孵化。在孵化的16胚龄、20胚龄和1日龄采样,取下丘脑。同时,20胚龄和1日龄每组各灌流3只取脑用于免疫组化。结果发现:母鸡饲喂半胱胺组对子代16胚龄、20胚龄和1日龄下丘脑内的CRH mRNA水平没有影响;20胚龄下丘脑内ss mRNA水平也没有变化,对20胚龄和1日龄下丘脑内室旁核的CRH免疫阳性神经元的数目没有影响。这说明对母鸡的试验处理没有改变子代下丘脑的CRH和SS mRNA的水平及下丘脑室旁核的CRH免疫阳性神经元的数目。以上试验表明,蛋内注射半胱胺,显著降低了20胚龄仔鸡下丘脑CRH、SS mRNA水平及下丘脑CRH蛋白水平,并且增加了子代出雏后快速生长期HPA轴免疫应激敏感性。然而母鸡饲喂半胱胺,没有影响到子代下丘脑的CRH和SS mRNA的水平及下丘脑室旁核的CRH免疫阳性神经元的数目。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 引言
• 本文部分缩写的中英文对照
• 第一篇 文献综述
• 第一章 促肾上腺皮质激素释放激素的研究进展
• 1 CRH的结构与分布
• 2 CRH的生理学作用
• 3 CRH的合成与分泌调节
• 4 CRH的个体发育和HPA轴的代谢程序化
• 第二章 半胱胺对动物应激和免疫机能的影响
• 1 半胱胺的理化性质
• 2 半胱胺的生物学功能
• 3 半胱胺对动物抗应激和免疫机能的作用
• 4 半胱胺的作用机理
• 第二篇 试验研究
• 第三章 蛋内注射CS对子代下丘脑CRH的影响及其相关机制初探
• 1 材料与方法
• 2 试验结果与分析
• 3 讨论与小结
• 第四章 母鸡饲喂CS对胚胎期及1日龄子代下丘脑CRH的影响
• 1 材料与方法
• 2 试验结果与分析
• 3 讨论与小结
• 全文结论
• 参考文献
• 致谢
• 硕士期间文章发表情况