论文摘要
目的研究沙蚕毒素类杀虫剂巴丹对绿猴肾细胞（Vero cell）的毒性作用及ca2+、氧化应激在其引起的细胞损伤中发挥的作用，为研究此类化学物质给人类和动物的危害提供依据。方法以0.01mmol／L-1mmol／L浓度的巴丹作用于Veto细胞4h、8h、12h、24h、48h，通过MTT法观察细胞存活率；以0.01mmol／L-1mmol／L浓度的巴丹作用于Vero细胞8h、12h、24h、48h，检测乳酸脱氢酶（LDH）漏出率；0.01 mmol／L、0.1 mmol／L、1 mmol／L巴丹作用于vero细胞8h、12、24h后倒置显微镜下观察细胞形态，照相记录；分别以抗氧化剂VitC（维生素C）10μmol／L、50μmol／L、100μmol／L，ca2通道阻滞剂Ver．（维拉帕米）0.001 mmol／L、0.005 mmol／L、0.1 mmol／L，ca2+鳌合剂EGTA 0.5μmol／L、1.25μmol／L、2.5μmol／L、5μmol／L预处理Vero细胞30min后加入0.01mmol／L-1mmol／L浓度的巴丹共同作用于Vero细胞24小时，MTT法检测细胞存活率、LDH漏出率；以10μmol／L、50μmol／L、100μmol／LmVitC，0.001mmol／L、0.005mmol／L、0.1mmol／L Ver．作用于Vero细胞30min后加入各浓度巴丹继续作用1h，荧光分光光度计检测Vero细胞内ROS含量。结果巴丹能引起Vero细胞LDH漏出率升高、细胞存活率下降、细胞内ROS水平升高，呈时间、剂量依赖关系，细胞形态变化明显，出现坏死，时间延长、剂量加大，细胞坏死加快。应用VitC、Ver．后细胞坏死减轻，细胞存活率增高，LDH漏出率下降，ROS降低。应用EGTA后，细胞坏死加重。结论巴丹对Vero细胞存在明显毒性作用，ca2+以及氧化应激在其引起的细胞坏死中发挥重要作用。对进一步研究沙蚕毒素类农药引起细胞损伤的机理奠定基础，为研究和防治沙蚕毒素类农药造成的人类及动物的危害提供依据。