论文摘要
本研究以梨为试验材料,结合基因组DNA特异PCR扩增,扩增片段同收、克隆和测序的技术手段,鉴定了部分梨品种的自交不亲和S基因型,研究其自交不亲和特性,取得的主要结果如下：用梨自交不亲和基因的特异引物‘’FTQQYQ”和"anti-IIWPNV",对20个梨品种的基因组DNA进行了特异PCR扩增,对扩增片段进行同收、克隆和测序,鉴定出了20个梨品种的自交不亲和基因型（S基因型）：‘香水’S17S31,‘早香水’S26S42,‘山梨3号’S33S41,‘山梨5号’S4S42,‘云南麻梨1号’S9S42,‘云南麻梨2号’S42Sx,‘豆梨’S30S31,‘面梨’S19S41,‘早红考密斯’SeSd,‘赤花梨’S26S15,‘2月15日’S4S12,‘11月11日’S2S26,‘扫帚苗子’S15S26,‘鞍山1号’S13S31,‘兴城谢花甜’S17S31,‘白八里香’S19S31,‘皮胎’S22S43,‘黄金对麻’S19S29。对18个甘肃地方梨品种进行基因型鉴定,确定了14个梨品种的S基因型。‘临夏香把’S12S21、‘甘谷黑梨’S16S54、‘康乐白果’SbSi、‘武都甜梨’S26Si、‘临夏黄麻’S3Se、‘康乐酥木梨’S1Sh、‘临夏萨拉’S16Se、‘九泉长把梨’S6S22、‘临姚麻甜梨’S22Sd、‘九泉麦梨’S6S17、‘漫路窝窝果’S12S21、‘武山糖梨’S8S19、‘康乐甘长把’S22Sd、‘河政甘长把’S22Sd。品种‘甘谷香水’和‘礼县新八盘’含有Se基因,‘临夏大吊蛋’和‘甘谷红霞’分别含有一个S26、S16基因。在‘甘谷黑梨’中发现一个新S等位基因,暂定名S54。针对不同研究人员对S基因型鉴定结果不一致的15个梨品种,利用S基因的特异引物对多地多点取样37份试材的基因组DNA,进行特异PCR扩增,并对扩增片段进行回收、克隆和测序。明确这些梨品种的自交不亲和S基因型：‘宝珠梨’S22S42、‘苍溪雪梨’S5S15、‘寒香’S12S31、‘杭青’S1S4、‘金秋梨’S3S9、‘锦丰’S17S19、‘龙香’S16S42、‘南果梨’S11S17、‘苹香梨’S31Sd、‘青魁’S1S3、‘清香’S4S7、‘秋白’S17S19、‘雅青’S4S17、‘延边大香水’S12S16、‘早梨18’S4S28。经过比对分析认为Genebank已登录S位点基因中,S12-RNase（登录号EU117115）与S36-RNase基因（登录号：DQ417607）为同一基因,S17（登录号AY249432）与S34（登录号DQ269500）为同一基因。并初步探讨鉴定结果出现争议的原因,主要是采样错误和实验技术方法的自身局限性。