杨则高谭少辉王雅（山西省长治市妇幼保健院病理科山西长治046011）
【中图分类号】R737.33【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2011）8-0023-02
【摘要】细胞学检查作为宫颈癌筛查的一种方法，对宫颈癌的早期发现、早期诊断、早期治疗作出了重大贡献。由于它价格低廉，使用方便，受到广大妇女的欢迎。DNA倍体分析技术是一种很好的方法，癌细胞在癌变过程中DNA含量改变在前，形态改变在后，超早期检查，可以提前3-5年发现早期宫颈癌。我们在妇女防癌检查中部分地使用DNA倍体分析技术，效果良好，现将我们的应用研究介绍如下。
【关键词】DNA倍体分析宫颈癌
1临床资料
此资料为我院2010年10月—2011年2月的所有进行DNA倍体定量分析的患者，最大年龄65岁，最小年龄22岁，平均年龄43.5岁。
2方法
2.1仪器与试剂用麦克奥迪(厦门)全自动细胞图像分析系统、TDZ5-WS多管架自动平衡离心机、MX-S（F）混匀仪、CJJ78-1磁力加热搅拌器、电热恒温培养箱、保存液、Feulgen染色试剂。
2.2标本采集妇科医师取材，与液基细胞手法相同，将贴上标签的标本管送到病理细胞室制片。
2.3制片方法标本确认并编号；排列玻片；添加细胞分散剂；将采集的细胞液在震荡器上震荡5秒钟，倒在离心管中，离心沉淀（离心机转速1500转/分钟）5分钟，倒去上清液，稀释细胞沉淀，转移细胞悬液，滴片，晾干，用Feulgen染色。
2.4用麦克奥迪(厦门)全自动细胞图像分析系统对染色片中的每一个细胞核进行扫描分析，根据每个细胞核的123个核特征参数值，找出病变细胞，自动进行分类和计数，得出辅助诊断意见，可见DI大于2.5的异倍体细胞1-2个，4-6个月定期复查；可见DI大于2.5的异倍体细胞3-10个，建议活检；可见DI大于2.5的异倍体细胞10个以上，建议活检。
3结果
细胞DNA定量分析正常宫颈细胞大多数分布在DNA指数(DI)为1的位置，少数在DI为2的位置上，没有超过2.5的细胞，宫颈上皮细胞为DNA整倍体(2C细胞)，无异倍体峰出现。有少数DNA异倍体细胞时，细胞大多数分布在DI为1的位置，但也有少部分细胞DI超过了2.5，形成了异倍体单峰。有大量DNA异倍体细胞时，更多的细胞DI超过了2.5，形成了异倍体双峰。
3个及以上异倍体细胞共检验员出23例,做活检送病理检测,共检出慢性宫颈炎8例，患病率34.78%；CIN1级6例,患病率为26.09%；CIN2级4例，患病率为17.39%；CIN3级2例，患病率为8.70%；宫颈癌3例，患病率为13.04%。
4讨论
4.1DNA细胞定量分析的优势
本研究采用先进的取材、制片方法加上DNA倍体分析系统，进行妇女宫颈癌的筛查，它是以人群自愿参与普查为基础,共采集宫颈细胞DNA样本487份,利用DNA倍体定量分析进行初步筛查,出现异倍体细胞及异倍体细胞峰再进行活检,以病理组织学诊断为金标准。DNA异倍体的出现是遗传基因变异所致的,也是染色体异常改变的标志。我们发现异倍体细胞的数量与宫颈宫颈病变程度正相关，本次研究用细胞DNA定量分析筛查共发现异倍体细胞及异倍体细胞峰74例，占15.20%,这部分人是我们重点调查跟踪对象,对这部分人及早采取医学干预手段防止癌变具极其重要的临床意义。
肿瘤病理学研究显示，细胞癌变时，其细胞核内的DNA结构和含量都会发生异常变化，DNA含量增多，DNA倍体状况发生改变，出现DNA倍体异常细胞。通过DNA倍体分析系统对细胞核DNA含量与倍体状况进行测定和分析，研究证实，用DNA定量分析方法较常规细胞学方法在宫颈癌的早期发现及诊断方面更有优势，可弥补细胞学诊断技术有限的缺陷，适合在基层单位大力推广。
4.2DNA细胞定量分析在临床上的指导作用
国内有报道显示大多浸润性宫颈癌均有染色体异常改变，DNA异倍体的出现是染色体异常的表现，同时也是一种细胞癌变的特征指标，在CINⅡ、CINⅢ、CIS和浸润癌病例中分别有59%、84%和87%有异倍体细胞出现。细胞DNA定量分析图不仅能识别宫颈细胞涂片中的大量DNA异倍体，还能识别少量DNA异倍体细胞。本文中74例均可见细胞DNA倍体异常。病变级别越高，DNA倍体异常细胞和异倍体细胞峰出现的频率越大。这与国外相关报道一致。
4.3DNA细胞定量分析对宫颈HPV感染有一定的提示意义
宫颈的人乳头瘤病毒（HPV）感染是宫颈癌的主要危险因素。宫颈HPV感染后DNA倍体分析检测出现异常，原因可能为HPV,DNA片段能整合到宿主宫颈上皮细胞核DNA内，并且异常表达，导致细胞的有丝分裂异常（包括多极有丝分裂、染色体不均衡分裂等）、染色体的数量和结构异常，细胞核面积增大，使DNA的含量和倍体状况发生改变。因此，DNA倍体分析检测对于宫颈HPV感染有一定的提示意义。
综上所述，DNA倍体分析系统具有准确度高、敏感性强和重复性好的优点，可作为大规模宫颈癌筛查的一种新方法，结合阴道镜检查和病理活检可以早期诊断宫颈癌前病变及宫颈癌，对宫颈癌前病变及宫颈癌的早期诊断、早期治疗、降低死亡率具有明显意义。
参考文献
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[2]王淑贞.实用妇产科学[M].北京：人民卫生出版社，1989.646，568.