槲皮素对人肝细胞微粒体甘油三酯转运蛋白、载脂蛋白B表达的影响

论文摘要

目的:观察槲皮素对脂肪变性人肝HL-7702细胞甘油三酯含量、载脂蛋白B （apoB）及肝细胞微粒体甘油三酯转运蛋白（MTP ）表达的影响,以探讨肝细胞脂肪变性的可能发生机制及槲皮素的防治作用。方法:取正常人肝HL-7702细胞作为研究对象。用10%（V/V）医用脂肪乳注射液和10%（V/V）胎牛血清的RPMI-1640完全培养基孵育24小时建立脂肪变性肝细胞模型。油红O染色观察细胞形态和细胞内脂滴的形成情况,高效液相色谱法（HPLC）检测细胞内甘油三酯的含量,半定量RT-PCR法检测肝细胞apoB及MTPmRNA水平的表达。实验分为7组:第一组为空白对照,即正常肝细胞组;第二组为为模型组,即脂肪变性肝细胞组;第三组至第五组在脂变肝细胞中分别加入不同剂量槲皮素,使槲皮素终浓度分别为20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L;第六组为阳性药物对照组,即脂肪变性肝细胞加入吉非罗齐,使其终浓度为40μmol/L;第七组为正常肝细胞加40μmol/L槲皮素对照组。以上各组继续培养24小时后观察肝细胞形态和肝细胞内脂滴的形成情况、肝细胞内甘油三酯的含量、肝细胞内apoB及MTPmRNA水平的表达。然后将40μmol/L的槲皮素与脂肪变性人肝HL-7702细胞共同处理12h、24h、48h观察肝细胞形态和肝细胞内脂滴的形成情况、肝细胞内甘油三酯的含量、肝细胞apoB及MTPmRNA水平的表达。实验数据以x±s表示,用SPSS13.0统计软件对数据进行分析,以P<0.05认为有统计学意义。结果:用含10%脂肪乳的RPMI-1640培养基孵育人肝HL-7702细胞24小时后,经油红0染色后倒置显微镜下可观察到人肝HL-7702细胞胞浆内充满大量被油红O红染的脂滴;且HPLC测定细胞内总甘油三酯含量明显增高（P﹤0.001）,加入槲皮素（20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L）处理脂肪变性肝细胞24小时后,结果显示:油红O染色示胞浆内脂滴较处理前减少;HPLC结果显示:槲皮素呈浓度依赖性的降低脂肪变性人肝细胞内甘油三酯的含量,同时呈浓度依赖性的增加apoB及MTP的mRNA的表达。将40μmol/L的槲皮素与脂肪变性人肝HL-7702细胞共同处理12h、24h、48h后,结果显示:槲皮素呈时间依赖性的降低脂肪变性人肝HL-7702细胞内甘油三酯的含量,同时呈时间依赖性的增加apoB及MTP mRNA的表达。结论:1、槲皮素能降低脂肪变性人肝HL-7702细胞内甘油三酯的含量;2、槲皮素能上调apoB及MTP mRNA的表达。

论文目录

• 1. 主要英文缩略语索引
• 2. 中文摘要
• 3. 英文摘要
• 4. 正文
• （1） 前言
• （2） 材料与方法
• （3） 实验结果
• （5） 讨论
• （6） 结论
• 5. 参考文献
• 6. 综述
• 7. 致谢