论文摘要
目的应用差异蛋白质组学方法,研究急性心肌梗死（AMI）后间充质干细胞（MSCs）归巢的目标区域-梗死周围区中功能蛋白的表达变化,了解其参与调控的MSCs心肌归巢的分子机制。方法结扎大鼠左前降支制作急性心梗模型,先后建立对照组、心梗后1d、4d和10d组。分别观察四组大鼠心脏的组织病理学变化。以二维凝胶电泳对大鼠梗死周围区或相应区域的心肌蛋白进行分离,筛选、鉴定出其中表达变化符合心梗后MSCs心肌归巢时间变化趋势的蛋白点,然后对蛋白功能进行生物信息学分析,寻找出其中功能与归巢过程可能相关的蛋白。蛋白质组学结果以western免疫印迹和免疫组化方法验证。结果实验显示,AMI后大鼠心脏组织病理学变化具有明显的时间规律和区域特征。AMI后梗死周围区中发生明显差异表达的蛋白点中,符合MSCs心肌归巢时间变化规律的蛋白点有42个,其中鉴定出32个,对应于29种蛋白。其后我们选择了其中的3个蛋白CRMP2、prohibtin和cofilin-1进行了蛋白定位（免疫组化）和表达（western blotting）研究,结果与蛋白质组学基本相符。生物信息学分析显示,这些差异蛋白可按功能分为5类:骨架蛋白,应激相关蛋白,能量代谢相关蛋白,炎症反应蛋白及其他,其中的CRMP2;PP2A,subunit B,B-alpha isoform和RACK1可能与MSCs的心肌归巢相关。结论差异蛋白质组学方法可能成为MSCs心肌归巢研究的一个新的有力工具。本研究提示CRMP2,PP2A,subunit B,B-alpha isoform和RACK1可能作为重要的功能蛋白参与了MSCs的心肌归巢的调控。
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