论文摘要
目的探讨在ER阳性乳腺癌中PR表达不同的患者其临床、病理学及肿瘤分子生物学特征的差异,分析可能导致PR表达不同的原因,寻求判断内分泌治疗反应性的辅助指标。在细胞及分子水平研究生长因子（EGF）对激素敏感乳腺癌细胞促增殖作用与ER传导通路间关系,探讨α2-肾上腺素能信号传导通路与乳腺癌细胞ER及EGF通路之间的关系。方法第一部分回顾性研究4000例ER+/PR—或ER+/PR+的乳腺癌患者,单因素及多因素比较两者临床病理特征及免疫组化法测定的分子生物学指标的差异。第二部分1.将ER的选择性拮抗剂氟维司群作用于乳腺癌细胞,WST法细检测胞体外增殖情况,判断氟维司群对MCF-7、T-47-D及MCF-7 RTR（阿霉素耐药MCF-7）乳腺癌细胞生长的影响。2.用EGF作用于MCF-7细胞,WST法检测细胞增殖情况,并观察其与氟维司群之间的相互作用。3.Western blot法检测氟维司群及EGF对乳腺癌细胞ER表达的影响。4.将α2-肾上腺素受体的抑制剂育亨宾作用于MCF-7细胞,WST法检测细胞增殖情况,及其与EGF作用的相互影响。5.用Western blot法检测育亨宾及EGF对乳腺癌细胞ER表达的影响。结果第一部分ER+/PR+和ER+/PR—的乳腺癌患者的年龄峰值均为50岁,显著高于ER—/PR—患者的年龄峰值48岁（P＜0.05）。单因素发现提示ER+/PR—的乳腺癌较ER+/PR+者倾向肿瘤直径大,淋巴结转移个数多、组织学分级低,ER表达水平低,HER-2呈高表达（P＜0.05）,而P53及PS2则呈现低表达（P＜0.05）;logist多因素分析显示影响两者不同表型的独立因子有:肿瘤ER表达水平（OR=2.598,95%CI=1.702～3.966,P=0.001）、PS2状态（OR=1.417,95%CI=1.020～1.970,P=0.038）,及HER-2表达状态（OR=0.575,95%CI=0.398～0.829,P=0.003）。此外,临床指标方面年龄也是PR表达的重要影响因素。大于50的患者PR阳性率仅为小于50岁患者的一半（OR=0.607,95%CI=0.452～0.817,P=0.001）。第二部分氟维司群能显著抑制MCF-7及T-47-D细胞的增殖,对MCF-7 RTR细胞的增殖无显著影响,且氟维司群能显著下调乳腺癌细胞表达ER程度。EGF能显著促进MCF-7细胞的增殖,并下调激素依赖型乳腺癌细胞ER的表达。但EGF的促增殖作用能够被氟维司群部分阻断。育亨宾能够显著抑制MCF-7细胞的增殖,且同样能够阻断EGF对细胞的促增殖作用。育亨宾还能增强MCF-7表达ER,并抑制EGF对ER表达的下调作用。结论ER+/PR+与ER+/PR—的乳腺癌可能有相同的起病原因,但ER+状态下PR表达与否可能有多方面的因素导致二者的生物学行为不同,PS2可能是很好的辅佐判断患者对内分泌治疗反应性的指标。针对这些差异寻找新的治疗靶向可能更有助于改善ER+/PR—患者的内分泌治疗效果及预后。在激素依赖的MCF-7细胞中EGF与ER之间存在密切的联系,EGF可能通过ER而促进细胞的增殖,这一作用能够被雌激素受体抑制剂所阻断。此外α2-肾上腺素受体的抑制剂同样能够阻断EGF对细胞的促增殖作用,且能够增强细胞ER的表达,它可能成为乳腺癌治疗的新靶点。