利辛县IBD流行病学调查及其防制研究

论文摘要

针对近年鸡传染性法氏囊病（infectious bursal disease, IBD）的流行日益复杂,免疫失败事件经常发生的现状,为做好利辛县传染性法氏囊病的防制工作,我们从以下三个方面进行了IBD调研与试验,旨在弄清近年来IBD的流行特点与变化趋势,为IBD有效防制奠定基础。（1）2006-2009年间利辛县6个重点乡镇鸡群传染性法氏囊病的流行情况及流行病学进行了调查。研究结果发现,IBD的发病季节有全年化趋势,但每年仍以6-9月份为发病高峰期;发病鸡的日龄范围扩大：病变以法氏囊呈胶冻样水肿和肾脏尿酸盐沉积为主要特征,二者出现率分别占67.2%和73.11%；其它病变多不典型；发病鸡群中免疫鸡群占78.17%,二次发病鸡群约占16.98%；宿主和易感家禽的范围扩大。调研结果提示,当前需要寻求IBD防制新策略,减少免疫鸡群的野毒感染风险,并加强IBD综合防控措施。（2）利辛县地方流行株的分离与鉴定。本研究利用病料采集、鸡胚接种、动物回归试验、ELD50测定技术、RT-PCR技术,对疑似发生典型性IBD鸡群进行IBDV分离与鉴定,成功分离到BZ03、BZ05和BZ02三株（超）强毒力地方流行毒株。本研究结果提示,（超）强毒株的存在可能是造成免疫鸡群发病的原因之一,同时,研究结果也为今后进一步研究IBDV分子流行病学、分子生物学及为今后有效免疫预防奠定基础。（3）分离株疫苗研制与保护效果试验。将分离株BZ03, BZ05和BZ02第10代鸡胚传代毒作为种毒接种鸡胚,同时用疫苗毒B87接种鸡胚,用收获的鸡胚绒毛膜尿囊液试制出三价油乳灭活苗和B87油乳灭活苗,并进行了检测和免疫效果比较。结果表明,所制备的三价油乳灭活苗单独免疫和三价油乳灭活疫苗与活疫苗联合免疫效果及B87油乳灭活苗组免疫效果明显优于活疫苗组,且由地方毒株所制备的三价油乳灭活苗未呈现对不同毒株抵抗性的不同；相对而言,B87油乳灭活苗组和活疫苗组在攻毒试验中,对不同毒株的攻击保护率均较低,且呈现出了一定的差异性。本研究一方面,为今后利辛县IBD的防制提供了物质基础；同时,研究结果也提示,野毒株与疫苗株抗原性相关性的研究有助于减少免疫鸡群感染野毒的风险。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 图表目录
• 文献综述
• 试验一 利辛县IBD流行情况调查
• 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 IBD血清Ⅰ型标准阳性血清
• 1.2 IBD快速诊断试纸
• 1.3 IBD病料
• 1.4 流行情况调查
• 1.5 病料采集
• 1.6 IBD病料的初步处理
• 1.7 IBD快速诊断试纸检测
• 1.8 琼扩试验
• 1.9 材料的整理与数据分析
• 2 结果与分析
• 2.1 流行病学调查、临床症状与病理剖检变化
• 2.2 各类鸡群中不同月份IBD的发病情况
• 2.3 发病日龄
• 2.4 同一鸡群反复发病
• 2.5 免疫鸡群发病情况
• 2.6 IBDV的宿主和易感群体
• 2.7 鸡法氏囊病主要病变的出现率
• 3 讨论
• 3.1 利辛县传染性法氏囊病流行的基本情况
• 3.1.1 中小规模养鸡场和养鸡专业户鸡群为IBD高发群体,危害较为严重
• 3.1.2 肉鸡发病季节全年化趋势明显,蛋鸡以4-10月份为高发期
• 3.1.3 发病日龄范围扩大
• 3.1.4 免疫鸡群仍有较高的发病率,同一鸡群可反复发病
• 3.1.5 宿主和易感群体范围扩大
• 3.1.6 疾病呈非典型且复杂化
• 3.2 应采取的措施
• 3.2.1 科学选址,改进布局,加强饲养管理
• 3.2.2 坚持全进全出制
• 3.2.3 合理的免疫程序和使用安全有效的疫苗,减少易感鸡群数量
• 3.2.4 发病鸡群及时采取控制措施,病死鸡合理处理
• 试验二 利辛县IBDV地方流行强毒株BZ03、BZ05和BZ02的分离与鉴定
• 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 引物设计与合成
• 1.3 病料采集与处理
• 1.4 鸡胚接种试验
• 1.5 IBDV RT-PCR鉴定
• 1.5.1 RNA的反转录及PCR扩增
• 1.5.2 PCR产物凝胶电泳
• 1.6 鸡胚半数致死量（ELD50）的测定
• 1.7 动物回归试验
• 2 结果与分析
• 2.1 鸡胚接种试验
• 2.2 IBDV RT-PCR检测结果
• 2.3 动物回归试验
• 2.4 分离株ELD50的测定
• 3 讨论
• 3.1 IBDV地方分离株致病性
• 3.2 利辛地区IBD流行特点
• 试验三 IBDV地方株鸡胚毒三价油乳灭活苗的研制及其免疫效果评价
• 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 种毒、抗原和活疫苗
• 1.2 主要试剂
• 1.3 鸡胚与试验用鸡
• 1.4 IBDV地方毒株和疫苗毒种毒的培育
• 1.5 试纸法和AGP法检测IBDV抗原
• 1.6 制苗病毒液的培养
• 1.7 病毒液的灭活
• 1.8 制苗用水相的处理
• 1.9 制苗用相油的制备
• 1.10 疫苗的制备
• 1.10.1 疫苗物理性状的检测
• 1.10.2 疫苗无菌性试验
• 1.10.3 疫苗安全性试验
• 1.11 疫苗免疫效力的检测与比较
• 1.12 攻毒试验
• 1.13 保存期的测定
• 1.14 田间试验
• 2 结果
• 2.1 BZ03、BZ05、BZ02株及B87株IBDV鸡胚毒的培育
• 2.2 疫苗物理性状的测定
• 2.3 无菌性检验结果
• 2.4 安全性试验结果
• 2.5 免疫效力的测定结果
• 2.6 攻毒试验结果
• 2.7 田间试验结果
• 2.8 保存期测定
• 3 讨论
• 3.1 IBDV地方分离株油乳苗保护效果
• 3.2 IBDV三价油乳灭活苗保护效果
• 3.3 IBDV分离株抗原性
• 3.4 IBDV分离株最佳鸡胚传代次数
• 全文结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介
• 在读期间发表的学术论文